医院检验中心VMA操作规程

1、医院检验中心 VMA操作规程 试剂：Reagent B1M Tris75ml550mReagent C0.2N 醋酸钠冲洗液l550mReagent 10.2N 醋酸钠微柱缓冲液lReagent 24M碳酸钾缓冲液30mlReagent 32 瓶、每瓶 0.4 克 NaIO4Reagent 42 瓶、每瓶 2.5 克 Na2S2O5VMA标准1瓶树脂柱50 支另外试剂乙醇（分析纯）1N 乙酸： 57.1ml 冰醋酸+D.water 至 1000ml试剂准备 :NalO4 溶液：4%Reaent 3+10ml D.water 2-8C 稳定 2周Na2S2O5溶液:10% Reagent 4+2

2、5ml D.water 2-8C稳定2周VMA标准液:1N乙酸5ml加至VMA标准瓶中浓度为1.2mgVMA/ml 2- 8C稳定4周，-20C稳定3月收集标本前 3 天、病人禁食香蕉、 香草、巧克力、 咖啡、 茶及呋喃嘧啶类药物、包括 2,5 一二羟基苯甲酸和 2,5 一二羟基苯乙酸。收集：干净容器，加入 15ml 20%HCI(或12ml 25%HCI)作稳定剂重要：调整标本PH值1.53.5注意：用尿液质控必须用 0.1N HCl溶解,若用D.water则需加 10ul6N HCl/2.0 ml操作步骤 :A. 在第一次操作分析前须完整仔细阅读操作手册B. 让所有试剂和标本到达室温C.

3、在非常熟练之前 , 所有试验必须双份D. 为有良好的实验操作 , 每次操作须携带质控操作过程 :1. 准备标准 :Tube 1:standard So: Oul(=Omg VMA/L) +2.0mlurineTube 2:standard S1:25ul(=15mg VMA/L)+2.0mlurine2. 吸 2.0ml 标本和质控到标记的试管中。3. 用试剂B调至PH大约5.57.5(PH指示纸)接近或超 过PH7.5时会出现混浊，加少许1N乙酸全悬浮，让树脂下沉（避免气泡），去帽、除滴头，让 柱完全在架上下流。5. 加标准、质控、标本到相应的柱中，让其完全流经， 去除洗出液。6. 转移柱子

4、到相应试管中（16X 160mm ,每柱中加10mlReagent1 收集洗出液 , 去除过滤柱。7. 每管准备测定和空白 , 测定和空白管加 2.0ml 洗出液。8. 加 0.2ml Reagent 2 到每管中 , 混匀 35秒。9. 每支测定管加 0.1ml Reagent 3, 每支空白管加0.2ml Reagent 4, 充分混匀。10. 37 C水浴 3011. 未冷却测定管中直接加 0.2ml Reagent 4, 空白管中加 0.1ml Reagent 3 充分混匀 .测定:在360nm波长以D.water为空白测出吸光度在 380nm波长以 D.water 为空白测出吸光度计

5、算:a Eso(380)=Eso(380) - EBo(380) Eso(360)=Eso. (360)-EBo(360) Es1(380)=Es1(380) - EB1(380) Es1(360)=Es1(360)-EB1(360) Et(380)=Et(380)-EBt(380)Et(360)=Et(360)-EBt(360)bNet Eso= Eso(360) - Eso(380)Net Es1 = Es1(360) - Es1(380)Net Et= Et(360) - Et(380 )cCorr.Es1=Nets1-Netsod VMAt(mg/L)=15mg/corr.Es1 x

6、NetEtMgVMA/24h = mgVMA/L 24h 尿量正常范围 :mg VMA/24h:1-8 mg VMA/24h VMASo: Oul 标准 +2.0ml 尿液S1: 25ul 标准 +2.0ml 尿液用B试剂调整每管2.0ml尿液的PH:5.5-7.5,出现混加少许 1N 乙酸摇动使柱完全悬浮 , 脂下降 （无气泡 ）, 去帽, 去滴头相应标本加入柱中 , 余液用 3ml D.water 冲洗加入 +10ml Reagent C到柱中 , 完全流经 , 去除洗出液移柱至相应管中 +10ml Reagent 1. 收集洗出液 , 去除柱每管均设定测定和空白 , 且每管加 2.0ml 洗出液“B” 和 “T” +0.2ml Reagent 2 混匀 3-5 秒JTB