LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒课件

1、LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒1 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒2 125,000+ 受试者受试者 在国际主流专业杂志和会议报告中，已有超过在国际主流专业杂志和会议报告中，已有超过100项临床研究和项临床研究和 综述分析的结果支持综述分析的结果支持Lp-PLA2 作为一个心血管疾病的标志物作为一个心血管疾病的标志物 在传统危险标志物的基础上提供了新的信息在传统危险标志物的基础上提供了新的信息 国际研究国际研究一致结果一致结果 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒3 国际权威指南国际权威指南一致推荐一致推荐 2010 ACCF/AHA

2、无症状成人心血管风险评估指南无症状成人心血管风险评估指南 可考虑对可考虑对中等风险的无症状成人中等风险的无症状成人进行进行Lp-PLA2 检测检测 以进一步评估风险。以进一步评估风险。 2011 AHA/ASA 卒中一级预防指南卒中一级预防指南 在在未有心血管疾病的患者未有心血管疾病的患者中检测炎症指标如中检测炎症指标如hs-CRP或或 Lp-PLA2可以鉴别出有可以鉴别出有较高卒中风险较高卒中风险的患者。的患者。 2012 AACE 高脂血症管理与动脉粥样硬化预防指南高脂血症管理与动脉粥样硬化预防指南 一些研究证明，在有一些研究证明，在有必要进一步对患者进行风险评级时，必要进一步对患者进行风

3、险评级时， Lp-PLA2检测比检测比h hs-CRP具有更高的特异性具有更高的特异性。 2012 ESC 欧洲心血管疾病预防临床实践指南欧洲心血管疾病预防临床实践指南 对对有复发急性血栓事件的高风险患者可以检测有复发急性血栓事件的高风险患者可以检测 Lp-PLA2 以进一步评估风险以进一步评估风险。 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒4 国内专家国内专家一致认可一致认可 “脂蛋白相关磷脂酶脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2)是是 血管内皮炎症的独立危险因子，也是目前血管内皮炎症的独立危险因子，也是目前 检测血管内皮炎症的新指标检测血管内皮炎症的新指标。对心脑血管。对心脑血

4、管 栓塞性疾病的预测、治疗和预后的判断具栓塞性疾病的预测、治疗和预后的判断具 有重要意义。有重要意义。” 中华医学会心血管病学分会中华医学会心血管病学分会 主任委员，著名心血管专家主任委员，著名心血管专家 胡大一教授胡大一教授 中国工程院院士，美国心脏病中国工程院院士，美国心脏病 学院院士，著名心血管专家学院院士，著名心血管专家 张运教授张运教授 “脂蛋白相关磷脂酶脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2)已已 成为成为AS抗炎治疗的新靶点抗炎治疗的新靶点，初步研究发现，初步研究发现 通过抑制磷脂酶通过抑制磷脂酶A2，可以减少血管壁脂质，可以减少血管壁脂质 的沉积和巨噬细胞的浸润。的沉积和巨噬细胞

5、的浸润。” 摘自摘自动脉粥样硬化不稳定斑块的研究进展动脉粥样硬化不稳定斑块的研究进展 摘自摘自2012中国脑卒中大会主题论坛报告中国脑卒中大会主题论坛报告 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒5 临床一线临床一线期待已久期待已久 “心血管医生最关心的一点就是高危患者心血管事件发生风心血管医生最关心的一点就是高危患者心血管事件发生风 险。如果能够早期预防，在发生重大事件之前把危险控制住，那就可险。如果能够早期预防，在发生重大事件之前把危险控制住，那就可 以减少病死率。但目前临床常用的检测指标如肌苷激酶等出现时为时以减少病死率。但目前临床常用的检测指标如肌苷激酶等出现时为时 已晚，

6、而已晚，而脂蛋白相关磷脂酶脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测为临床提供了一个预警及风险定量检测为临床提供了一个预警及风险 评估的有力工具评估的有力工具。”北京大学第三医院心内科主任北京大学第三医院心内科主任 高炜高炜 “现有的检验指标如胆固醇、现有的检验指标如胆固醇、LDL、HDL确实在心血管疾病确实在心血管疾病 风险评估方面发挥一定作用，但并不全面。甚至有些方法如血小板活风险评估方面发挥一定作用，但并不全面。甚至有些方法如血小板活 化检测还不够稳定。因此化检测还不够稳定。因此实验室迫切需要一个方法稳定、特异性强又实验室迫切需要一个方法稳定、特异性强又 独立于胆固醇之外的风险评估方法，而脂蛋白相关磷

7、脂酶独立于胆固醇之外的风险评估方法，而脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测定量检测 就提供了这样一个方法就提供了这样一个方法。” 中国医师协会检验医师分会会长中国医师协会检验医师分会会长 丛玉隆丛玉隆 “我国一年心外科手术量已达到我国一年心外科手术量已达到18.5万例，但还远不能满足万例，但还远不能满足 我国患者需要，原因就在于我国心血管疾病发病率太高，每年新增冠我国患者需要，原因就在于我国心血管疾病发病率太高，每年新增冠 心病患者心病患者300万。因此预防的作用比治疗更重要，并且其社会效益要万。因此预防的作用比治疗更重要，并且其社会效益要 远高于手术。而远高于手术。而脂蛋白相关磷脂酶脂蛋白相关磷脂酶

8、A2定量检测为心血管疾病预防提供定量检测为心血管疾病预防提供 了一个有力武器了一个有力武器。” 中国医师协会心脏外科医师分会副会长中国医师协会心脏外科医师分会副会长 孙孙 立忠立忠 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒6 2011.7.16 北京北京 钓鱼台国宾馆钓鱼台国宾馆 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒7 国家国家863高科技成果高科技成果 中国中国首家首家和和唯一唯一上市产品上市产品 中国中国首家首家和和唯一唯一上市产品上市产品 国家国家863科技攻关项目高科技成果科技攻关项目高科技成果 快速监控和预测心脑血管栓塞性疾病快速监控和预测心脑血管栓塞性疾

9、病 填补中国心脑血管疾病快速预警检测的空白填补中国心脑血管疾病快速预警检测的空白 与会专家：与会专家： 中国人民解放军总后卫生部原副部长中国人民解放军总后卫生部原副部长 陈陈 新年新年 广东省卫生厅副厅长广东省卫生厅副厅长 耿庆山耿庆山 中国医药生物技术协会副会长中国医药生物技术协会副会长 于修成于修成 科技部火炬高技术产业开发中心处长科技部火炬高技术产业开发中心处长 雷庆雷庆 西西 中国医师协会心脏外科医师分会副会长中国医师协会心脏外科医师分会副会长 孙立忠孙立忠 中国医师协会检验医师分会会长中国医师协会检验医师分会会长 丛玉隆丛玉隆 北京大学第三医院心内科主任北京大学第三医院心内科主任 高

10、炜高炜 北京大学首钢医院心血管医学中心主任北京大学首钢医院心血管医学中心主任 王宏王宏 宇宇 卫生部北京医院心内科主任卫生部北京医院心内科主任 许峰许峰 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒8 心脑血管疾病是造成人类死亡的心脑血管疾病是造成人类死亡的 主要病因主要病因 男 性 女 性 恶性肿瘤 心脏病 脑血管病呼吸系统疾 病 恶性肿瘤恶性肿瘤心脏病心脏病脑血管病脑血管病呼吸系统疾病呼吸系统疾病 来源：来源：2012中国卫生统计年鉴中国卫生统计年鉴来源来源: :美国国家健康中心美国国家健康中心2012年统计数据年统计数据 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒9 心

11、脏猝死：经常是首次心脏病爆发心脏猝死：经常是首次心脏病爆发 Myerburg RJ et al. Circulation.2012;125:1043-1052 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒10 研发背景研发背景 动脉粥样硬化（动脉粥样硬化（AS) )是造成心脑血管疾病的主要原因是造成心脑血管疾病的主要原因 AS是一种炎症反应性疾病是一种炎症反应性疾病 在粥样斑块在粥样斑块形成、进展和最终破裂形成、进展和最终破裂的过程中均有的过程中均有炎性炎性 介质介质的参与的参与 寻找一个能够反映这种动态变化过程的炎性介质就能寻找一个能够反映这种动态变化过程的炎性介质就能 够检测并跟踪

12、动脉粥样硬化的严重程度够检测并跟踪动脉粥样硬化的严重程度 目前目前脂蛋白相关磷脂酶脂蛋白相关磷脂酶A A2 2（Lipoprotein-Associated Phospholipase A2， ，Lp-PLA2) )已被国际专家公认 已被国际专家公认为一种新为一种新 的的炎性反应标志物炎性反应标志物 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒11 内容内容 心脑血管疾病现状及研发背景心脑血管疾病现状及研发背景 Lp-PLA2与动脉粥样硬化的关系与动脉粥样硬化的关系 临床研究临床研究 临床意义临床意义 康尔克康尔克Lp-PLA2定量检测试剂盒简定量检测试剂盒简 介介 产品详解与注意事项

13、产品详解与注意事项 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒12 Lp-PLA2 脂蛋白相关磷脂酶脂蛋白相关磷脂酶A2，英文缩写，英文缩写Lp-PLA2。 。 又称血小板活化因子乙酰水解酶（又称血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）。）。 分子量为分子量为45KDa 。 由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌，由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌， 并受炎性介质的调节。并受炎性介质的调节。 水解水解ox-LDL-C上的磷脂，生成促炎物质上的磷脂，生成促炎物质lyso- PC和和ox-FA，因此具有，因此具有促炎症和促动脉粥样硬促炎症和促动脉粥样硬 化的作用化的作用 。 LpPLA2

14、人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒13 Lp-PLA2在粥样斑块形成中的作用在粥样斑块形成中的作用 粥样斑块形成粥样斑块形成 血管腔血管腔 氧化型氧化型 LDL 内膜内膜 中膜中膜 Lp-PLA2 溶血卵磷脂溶血卵磷脂 氧化脂肪酸氧化脂肪酸 泡沫细胞泡沫细胞 单核细胞单核细胞 粘附分子粘附分子 巨噬细胞巨噬细胞 细胞因子细胞因子 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒14 稳定斑块稳定斑块vs易损斑块组织学特征对比易损斑块组织学特征对比 薄纤维帽薄纤维帽 厚纤维帽厚纤维帽 小型坏死脂质池小型坏死脂质池 Lp-PLA2Lp-PLA2 血管腔血管腔血管腔血管腔 血栓血栓 大型坏

15、死脂质池大型坏死脂质池 稳定斑块稳定斑块 Lp-PLA2 含量较低含量较低( (深色染色深色染色) ) 纤维帽厚，胶原含量高纤维帽厚，胶原含量高 小型坏死脂质池小型坏死脂质池 炎症程度较轻炎症程度较轻 易损斑块易损斑块 Lp-PLA2 含量较高含量较高( (深色染色深色染色) ) 纤维帽薄，胶原含量低纤维帽薄，胶原含量低 大型坏死脂质池大型坏死脂质池 炎症程度较重炎症程度较重 Corson MA et al, Am J Card Suppl 2008:101 (41F-50F) LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒15 斑块易损性与其斑块易损性与其Lp-PLA2含量成正比含量成

16、正比 疾病进展疾病进展 Lp-PLA2 染成棕红色染成棕红色 早期斑块早期斑块 出现脂质池出现脂质池 稳定斑块稳定斑块 纤维帽变薄，纤维帽变薄， 出现小型坏死出现小型坏死 脂质核脂质核 易损斑块易损斑块 薄纤维帽薄纤维帽 破裂斑块破裂斑块 血管中出现血栓血管中出现血栓 Kolodgie F, et al. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2006 血栓 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒16 25 已发表研究结果显示已发表研究结果显示: :Lp-PLA2 升高升高导致心血管事件导致心血管事件风险加倍风险加倍 Packard (WOSCOPS), N

17、 Engl J Med 2000 CHD Blake (WHS), J Am Coll Cardiol 2001 CHD Blankenberg (AtheroGENE), J Lipid Res 2003 - CAD Ballantyne (ARIC), Circulation 2004 - CHD LDL 250 ng/mL hsCRP 3 mg/L Lp-PLA2 CRP LDLHDLTG 4% 46% 10% 7.4% 4.7% 42.6% 22.8% 90份未患心脏病健康人群的血样份未患心脏病健康人群的血样43份健康成人份健康成人4周周7次抽血血样次抽血血样 Lerman A, Mc

18、Connell JP. Am J Card Supplement 2008. LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒22 冠心病患者冠心病患者LDL-C水平：水平： 72%的患者低于的患者低于130 mg/dL 130 LDL-C (mg/dL) Get With the Guidelines database, levels at admission Sachdeva et al. Am Heart J 2009; 157:111-7.e2 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒23 总胆固醇及总胆固醇及LDL-C在冠心病预测中在冠心病预测中 的局限性的局限性 F

19、ramingham心脏研究心脏研究26年随访数据显示：年随访数据显示： 35%冠心病患者的总胆固醇水平冠心病患者的总胆固醇水平 0.05 未患卒中未患卒中 卒中患者卒中患者 P = 0.44 P = NS P 0.05 Ballantyne CM, et al. AHA 2004 Berger K, et al. Stroke 1998 Tanne D, et al. Circ.2001 4. Bowman TS, et al. Stroke 1998 Oei HH, et al. Circ. 2005 Wannamethee SG, et al. Stroke 2000 LpPLA2人血浆脂

20、蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒25 传统风险因子在冠心病患者中传统风险因子在冠心病患者中 的流行程度的流行程度 0 Risk Factors 19.4% 1 Risk Factor 43% 2 Risk Factors 27.8% 3 Risk Factors 8.9% 4 Risk Factors 0.9% N=87,869 分析的四个分析的四个传统风险传统风险因子因子: 高血高血压压，吸烟，高血脂症，糖尿病，吸烟，高血脂症，糖尿病 Khot UM, et al. JAMA 2003. 62.4% 冠心病患者仅含有冠心病患者仅含有0-1个传统风险因子个传统风险因子 LpPLA2人血浆脂蛋白

21、相关磷脂酶A2定量检测试剂盒26 Mayo 研究研究: : 利用利用Lp-PLA2 预测心梗后生存期预测心梗后生存期 0.0 3.0 4.0 5.0 6.0 1.0 2.0 5.4* 2.2 1.0 166 ng/mL 167-218 ng/mL 219 ng/mL * p 0.001 after multivariate adjustment for age, sex, hypertension, BMI, diabetes, smoking, LDL-C Gerber Y, et al. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2006 Hazard Ratio 发生发

22、生MI后，高水平后，高水平Lp-PLA2患者患者1年内死亡风险年内死亡风险 是低水平患者的是低水平患者的5倍倍 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒27 Mayo 研究：利用研究：利用L Lp-PLA2 预测预测 冠心病患者主要心血管事件发生率冠心病患者主要心血管事件发生率 95% 的的Lp-PLA2 200 ng/ml 患者患者4年内未发生年内未发生 心血管事件心血管事件 Brilakis ES et al. Mayo Heart Study. Euro Heart J 2005 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒28 北曼哈顿卒中研究北曼哈顿卒中研究( (

23、NOMAS) ) ： 利用利用Lp-PLA2 预测卒中复发风险预测卒中复发风险 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 High Lp-PLA2High hs-CRP Risk Ratio (Highest vs. Lowest Quartile) 0.7 1.0 2.1 (95% CI 1.04-4.18) 1.9(95% CI 1.01-3.42) 复发性卒中事件复发性卒中事件 N=80, 其他心血管事件其他心血管事件 N=122 Adjusted for demographics, traditional risk factors, stroke severity, and bo

24、th markers 复发性卒中复发性卒中 首发卒中后任何心血管事件首发卒中后任何心血管事件 Elkind MS, et al. Arch Int Med 2006. Lp-PLA2 升高，卒中复发风险加倍升高，卒中复发风险加倍 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒29 一级预防一级预防 对急性冠脉综合征的预测评价对急性冠脉综合征的预测评价 经冠脉造影证实无冠脉狭窄者经冠脉造影证实无冠脉狭窄者(对照对照)28例、例、 急性冠脉综合征急性冠脉综合征(ACS)27例、稳定型心绞痛例、稳定型心绞痛(SAP)28例。例。 检测血浆检测血浆Lp-PLA2 水平。水平。 组别组别 例数例数

25、 Lp-PLA2(ng/ml) 急性冠脉综合征急性冠脉综合征(ACS) 27 706.00149.91* 稳定型心绞痛稳定型心绞痛(SAP) 2 427.7544.58* 无冠脉狭窄者无冠脉狭窄者(对照组对照组) 28 267.6992.67 注注: 与对照组比较与对照组比较 *P0. 001 陈锦峰陈锦峰, ,等等. .广东医学广东医学 2011;32(10):1263 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒30 二级预防二级预防 对进展性脑梗死的预测评价对进展性脑梗死的预测评价 168 例急性脑梗死例急性脑梗死(ACI) 患者每天进行患者每天进行NIH卒中量表卒中量表 (NI

26、HSS) 评分，其中进展性脑梗死评分，其中进展性脑梗死40例，稳定性脑梗死例，稳定性脑梗死 128例。检测血浆例。检测血浆Lp-PLA2 水平。水平。 组别组别 例数例数 Lp-PLA2(g/L) ACI组组 168 12.0587.104* 进展性脑梗死组进展性脑梗死组 40 17.30410.630* 稳定性脑梗死组稳定性脑梗死组 128 10.4194.576 正常对照组正常对照组 72 7.2683.112 注注: 与正常对照组比较与正常对照组比较 *P 0. 01; 与稳定性脑梗死组比较与稳定性脑梗死组比较 P 0. 01 王磊王磊, ,等等. .临床神经病学杂志临床神经病学杂志 2

27、011;24(4):309. . LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒31 病情评估病情评估 对神经功能损伤程度的评价对神经功能损伤程度的评价 选择动脉硬化性脑梗死选择动脉硬化性脑梗死(ACI) 患者患者128例和未卒中例和未卒中 对照者对照者88例为研究对象，检测血浆例为研究对象，检测血浆Lp-PLA2的水平。按的水平。按NIH中风中风 量表量表(NIHSS 评分评分)进行神经功能缺损程度评估。分析神经功能缺进行神经功能缺损程度评估。分析神经功能缺 损程度与血浆损程度与血浆Lp-PLA2水平相关性。结果水平相关性。结果r=0.829，P=0.001。 组别组别 例数例数 Lp

28、-PLA2(g/L) 轻型梗死组轻型梗死组 32 53.455.47* 中型梗死组中型梗死组 66 65.686.07* 重型梗死组重型梗死组 30 77.115.12 注注: 与重型梗死组比较与重型梗死组比较 *P0.05 梁江红梁江红, ,等等. .实用医学杂志实用医学杂志2009;25(14):2264. LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒32 疗效评价疗效评价 不同剂量阿托伐他汀治疗急性脑梗死不同剂量阿托伐他汀治疗急性脑梗死 选择急性脑梗死患者选择急性脑梗死患者86例，例， 随机分为随机分为2组：阿托伐组：阿托伐 他汀常规剂量组他汀常规剂量组43例：例：20mg/天，

29、大剂量组天，大剂量组43例：例：40mg/天，天， 分分 别于治疗前及治疗别于治疗前及治疗14天后测量患者血浆天后测量患者血浆Lp-PLA2 水平。另选择水平。另选择 43例健康体检者为对照组，不予阿托伐他汀治疗。例健康体检者为对照组，不予阿托伐他汀治疗。 阿托伐他汀治疗前后阿托伐他汀治疗前后血浆血浆Lp-PLA2(g/L)变化的比较变化的比较 常规治疗组常规治疗组 大剂量组大剂量组 对照组对照组 急性脑梗死组急性脑梗死组 治疗前治疗前 治疗后治疗后 治疗前治疗前 治疗治疗 30.522.91 43.955.70# 44.226.25 37.634.53* 43.695.16 35.634.1

30、6* 注注: 治疗前和治疗后比较治疗前和治疗后比较 *P0.05；与对照组比较；与对照组比较 #P175 ng/ml 175 ng/ml 175ng/ml 175ng/ml 4.0 mmol/L 3.3 mmol/L2.5 mmol/L1.8 mmol/L 测试测试 测量中高危患者的测量中高危患者的 Lp-PLA2 水平水平 治疗治疗 达到合适达到合适LDL-C 水平水平 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒36 名名 称称 规格规格 主要组成成份主要组成成份 9696人份人份4848人份人份2424人份人份 1 1 Lp-PLA2酶联酶联 反应板反应板 1 1块（块（96孔）

31、孔）1 1块（块（48孔）孔）1 1块（块（24孔）孔）Lp-PLA2Lp-PLA2包被抗体包被抗体 2 2 标准品标准品1 1 1瓶，瓶，70ul， 浓度：浓度：1000 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul， 浓度：浓度：1000 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul， 浓度：浓度：1000 ng/ml Lp-PLA2Lp-PLA2抗原，牛血清白蛋白抗原，牛血清白蛋白,磷磷 酸缓冲液酸缓冲液 3 3 标准品标准品2 1 1瓶，瓶，70ul, 浓度：浓度：500 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul,浓浓 度：度： 500ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul,浓浓 度：度： 500ng/ml Lp-

32、PLA2Lp-PLA2抗原，牛血清白蛋白抗原，牛血清白蛋白,磷磷 酸缓冲液酸缓冲液 4 4 标准品标准品3 1 1瓶，瓶，70ul, 浓度：浓度：250 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul， 浓度：浓度：250 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul， 浓度：浓度：250 ng/ml Lp-PLA2Lp-PLA2抗原，牛血清白蛋白抗原，牛血清白蛋白,磷磷 酸缓冲液酸缓冲液 5 5 标准品标准品4 1 1瓶，瓶，70ul, 浓度：浓度：100 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul,浓浓 度：度： 100ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul,浓浓 度：度： 100ng/ml Lp-PLA2Lp-PLA2抗

33、原，牛血清白蛋白抗原，牛血清白蛋白,磷磷 酸缓冲液酸缓冲液 6 6 标准品标准品5 1 1瓶，瓶，70ul, 浓度：浓度：50 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul， 浓度：浓度：50 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul， 浓度：浓度：50 ng/ml Lp-PLA2Lp-PLA2抗原，牛血清白蛋白抗原，牛血清白蛋白,磷磷 酸缓冲液酸缓冲液 7 7 标准品（空白）标准品（空白） 1 1瓶，瓶，70ul, 浓度：浓度：0 ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul,浓浓 度：度：0ng/ml 1 1瓶，瓶，50ul,浓浓 度：度：0ng/ml 牛血清白蛋白牛血清白蛋白,磷酸缓冲液磷酸缓冲液 8 8 稀释液

34、（稀释液（10倍）倍）1 1瓶瓶,1.5ml1瓶瓶,1.0ml1瓶瓶,0.5ml牛血清白蛋白牛血清白蛋白,磷酸缓冲液磷酸缓冲液 9 9 酶标记物酶标记物1 1瓶，瓶，15ml 1瓶，瓶， 7.5ml 1瓶，瓶，4ml 辣根过氧化酶标记抗体，牛血清辣根过氧化酶标记抗体，牛血清 白蛋白白蛋白,磷酸缓冲液磷酸缓冲液 1010洗涤液（洗涤液（20倍）倍） 1 1瓶，瓶，30ml1瓶，瓶，15ml1 1瓶，瓶，8ml磷酸缓冲液，吐温磷酸缓冲液，吐温 1111显色液显色液1 1瓶，瓶，10ml1瓶，瓶，5ml 1瓶，瓶， 2.5ml 四甲基联苯胺四甲基联苯胺 1212终止液终止液1 1瓶瓶, 6ml1瓶，

35、瓶，3ml1瓶，瓶，2ml硫酸硫酸 1313说明书说明书一份一份一份一份一份一份 产品组成及安全性 本试剂盒中采用的试剂都不具有毒本试剂盒中采用的试剂都不具有毒 性、致畸致突变性，也不含有人血液制性、致畸致突变性，也不含有人血液制 品，因此不具有生物学危害，但仍需作品，因此不具有生物学危害，但仍需作 为一般生物试剂加以防护。为一般生物试剂加以防护。 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒37 检验原理检验原理ELISA LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒38 样品处理样品处理 样品收集、处理和保存：样品收集、处理和保存： 血浆：用血浆：用EDTA抗凝管取血抗凝管

36、取血2ml，1500 r/min离心离心10 分钟，收集上清液。分钟，收集上清液。 血清：用普通管或促凝管取血血清：用普通管或促凝管取血2ml，4下放置下放置30分分 钟后，钟后，1500 r/min离心离心10分钟，收集上清液。分钟，收集上清液。 保存保存: : 血浆（清）如不即时检测，则须于血浆（清）如不即时检测，则须于-20保存保存 ，并避免反复冻融，并避免反复冻融。 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒39 操作方法操作方法 1） 从冰箱中取出试剂盒，室温平衡从冰箱中取出试剂盒，室温平衡20min，将标准品离心，将标准品离心，1000r/min，1min 2）分别加入分

37、别加入80ul稀释液（稀释液（1倍倍) )和和20ul待测样品或标准品于反应孔内待测样品或标准品于反应孔内, ,混匀混匀, ,37温育温育20min 3）弃去孔内液体，每孔加弃去孔内液体，每孔加300ul洗液洗液( (1倍），振荡倍），振荡20-30sec后弃去洗液，重复后弃去洗液，重复4次，拍干残液次，拍干残液 4）加入加入100ul酶标记物，混匀，酶标记物，混匀，37温育温育30min 5）重复步骤重复步骤 3） 6）每孔加入显色液每孔加入显色液100ul，混匀，混匀，37温育温育20min，避光，避光 7）加入加入50ul终止液终止液 8）立即用酶标仪在立即用酶标仪在450nm条件下测定

38、各孔条件下测定各孔OD值值 9）以以OD值为纵坐标（值为纵坐标（Y），相应），相应Lp-PLA2标准品浓度为横坐标（标准品浓度为横坐标（X），制作标准曲线），制作标准曲线 10）根据样品的根据样品的OD值计算得出样品的值计算得出样品的Lp-PLA2含量含量 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒40 检验结果的解释检验结果的解释 对临床的检测结果进行统计分析之后，对临床的检测结果进行统计分析之后， 175ng/ml以下正常以下正常, , 175ng/ml以上为危险。以上为危险。 如样本的如样本的Lp-PLA2的含量低于临界值，则视的含量低于临界值，则视 为正常；如高于临界值则提示

39、为其动脉可能为正常；如高于临界值则提示为其动脉可能 有粥样硬化炎症，且炎症与有粥样硬化炎症，且炎症与Lp-PLA2的含量的含量 成正比。成正比。 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒41 产品性能指标产品性能指标 剂量剂量- -反应曲线的线性反应曲线的线性 用logistic数学模型或其他数学模型拟合，剂量-反应曲线相关系数 （r）应不低于0.9900。 r2= 0.99998 r2= 0.97917 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒42 准确性准确性 试剂盒标准品与相应浓度的企业校准品同时进行分析测定，用 logistic数学模型或其他数学模型拟合，要求两条剂量-反应曲 线不显著偏离平行（t检验，t2.447），以企业校准品为 对照品，试剂盒标准品的实测值与标示值的效价比的平均值应 在0.9001.100范围内。 灵敏度灵敏度 试剂盒的最小检测值10ng/ml。 产品性能指标产品性能指标 LpPLA2人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2定量检测试剂盒43 精密度精密度 批内变异度（CV%）和批间变异度（CV%）均应不高于15.0% 特异性特异性 以试剂盒测定下列物质，测定值应符合要求： 人血清白蛋白（浓度60mg/mL）、癌