第六章微生物的生长

1、第第 六六 章章 测定微生物生长繁殖的方法 微生物的生长规律 影响微生物生长的主要环境因素 微生物培养法概论 有害微生物的控制 内容提要 第一节第一节 纯培养纯培养的分离方法的分离方法 稀释倒平板法 划线法 选择培养基分离法 单细胞挑取法 Viable cell count 1.dilute sample 1 ml 9 ml 10 100 1000 104 105 106 107 cell no/ml 2. plate out 0.1 ml Inoculating an agar plate to obtain single colonies Mixed culture Pure cultur

2、e Mixed culture Oral swab Swab from sole of shoe Each colony was examined microscopically 选择培养基分离法 1.dilute sample 1 ml 9 ml 10 100 1000 104 105 106 107 牛肉膏培养基牛肉膏培养基 土豆培养基土豆培养基 高氏培养基高氏培养基 固体培养法 液体培养法 好氧菌的固体培养 厌氧菌的固体培养 好氧菌的液体培养 厌氧菌的液体培养 试管培养 三角瓶（摇瓶） 台式发酵罐 高层琼脂柱 厌氧培养皿 Hungate rool-tube technique 厌氧罐 厌

3、氧手套箱 微生物培养法 实验室培养法 生产实践中的培养微生物装置 固体培养法 液体培养法 好氧菌-曲法培养 厌氧菌-堆积培养 发酵罐（Fermenter） . . . . . . . . . . . . . . . . . . Brewer 皿 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 高层琼脂柱亨盖特技术 厌氧菌（anaerobes） 将环境中氧吸掉；抽真空；深层培养氧对其有毒 能量来源于发酵无氧呼吸环式光合磷酸化或甲烷发酵 O2. - 超氧阴离子自由基 普遍存在 H2O+1/2O2 过氧化氢酶 （好氧菌） 2H2O过氧化氢酶 （耐氧菌） NADH2NAD

4、O2. +2H+ H2O2+O2 - SOD （好氧菌及耐氧菌） 1 1 1 细胞内缺泛SOD、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶 A. + B. A:B 共价结合 均裂 厌氧罐 anaerobic jar Anaerobic Glove Box 厌氧菌的培养 Different culture methods Liquid Culture Batch culture Batch 高温瞬时灭菌 辐射 可见光 紫外线（非电离辐射） No Image X射线与r射线 紫外线 O 紫外线（非电离辐射） 杀菌机制： 诱导核酸形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰 GGGGGGGG了核酸的复制H No Image 各种微

5、生物对紫外线抗性 干细胞强于湿细胞 芽孢，孢子强于营养细胞 多倍体 二倍体 单倍体 No Image X X射线与射线与r r射线射线 直接学说 间接学说 r r射线是放射性元素Co60发射出的高能射线， F 具强穿透能力，500干伦琴剂量用于诱变 育种，10万伦琴以上具杀菌作用。G No Image 高渗作用 等渗溶液对微生物生长有利 细菌处于低渗液中会吸水膨胀乃至破裂 细胞处于高渗液中会脱水引起质壁分离 导致死亡。J 控制微生物的化学物质(因素) 表面消毒剂表面消毒剂 抗代谢物 抗生素化学治疗剂 溶液状态 气体状态 生物药物素 酸和碱 重金属极其盐类 有机化合物 氧化剂 卤素 染色剂 表面

6、活性剂 表面消毒剂(surface disinfactant) 酸和碱酸和碱 前面讲过微生物细胞中的DNA，RNA，CL， Pr，E只有在中性条件下才能体现活性， 因此 强酸碱具杀菌作用。医院病房常用乙酸消毒。 重金属极其盐类 是杀菌剂和防腐剂，作用最强的是Hg,Ag,Cu,作用机 理：使蛋白质变性，使酶失活。（与E的SH结合。） 00202Hgcl2（升汞）溶液对大多数细菌有致死作用。 CuSO4对真菌、藻类有强杀伤力，波尔多（CuSO4碳）防植物病害。 另外还有砷，铋、锑的化合物是治疗梅毒的特效药。 011 AgNO3 可消毒皮肤，1浓度新生儿点眼预防眼炎 有机化合物有机化合物 醇、醛、酚

7、是常用的杀菌剂。 杀菌机制 损伤CW 使蛋白质变性（细胞膜，E失活） 抑制脱氢酶，氧化酶活性。 No Image 有机化合物有机化合物 甲醛：纯甲醛为气体，3740水液为福尔马林。 醇是脱水剂蛋白质变性剂,70乙醇杀菌效果最好。 酚：35的石碳酸溶液几分钟即可致死细菌甲 酚杀菌力最强，煤酚皂液（来苏尔）为甲酚和肥 皂的混合液 。 氧化剂氧化剂 K2MnO4使菌体蛋白质氧化，使酶失活。77777 013浓度可用于皮肤，果品、餐具、消毒。 H2O2清洗伤口。 酪AA+I2二碘酪氨酸 卤素 碘杀菌力强，37碘溶于7083的 乙醇中成碘酒。 氯及氯化物常用于水及食品消毒与水结 合放出原子氧（O）用于消

8、毒。上下 氯，碘是常用的消毒剂氯，碘是常用的消毒剂 染色剂 干扰菌体氧化还原电位 阻碍芽孢的形成。 No Image 表面活性剂 具有降低表面张力效应的物质叫表面活性剂。 常用的有新吉尔灭等，去污剂，肥皂等。一落 表面张力降低可抑菌或杀菌。五彩缤纷 抗代谢物(antimetabolite) 有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相 似，以至可以和特定的酶结合，从而阻碍了酶的功 能。干扰代谢的正常代谢。这些物质称为抗代谢物。 No Image 叶酸 磺胺类药物 氨基酸 5甲基色氨酸 吡哆醇 异烟肼 嘌呤 6巯基嘌呤 抗代谢物代谢物 二氢蝶啶二氢蝶啶二氢蝶酸二氢蝶酸二氢叶酸二氢叶酸四氢叶酸四氢

9、叶酸 （THFATHFA） 核核 酸酸 氨基酸氨基酸 前前 体体 PABA 酶酶酶酶酶酶 GluTMP COOHH2NNH2SO2R COOHH2N NH2SO2R 磺胺药(sulphonamides,sulfa drugs)抑菌机理 TMP:甲氧苄二氨嘧啶 (磺胺增效剂) 选择素力 是由微生物在代谢过程中产生（有的可人工合成）具 有一定浓度下抑制或杀死其他微生物的有机化合物。 F 每种抗生素都有一定的杀菌范围，称为抗菌谱。G 抗生素的诞生 神奇的抗生素 抗药性 抗生素(antibiotic) 抗生素的诞生 1928年A.Fleming发现青霉素 1940弗罗里提纯出青霉素 各种抗生素被相继发现并应用 人工合成半合成抗生素被相继开发出来 青霉素（penicillin） 英国科学家A.Fleming爵士 与弗莱明共同获得1945年 诺贝尔生理学和医学奖. 1940提纯出青霉素 澳大利亚病理学家霍华德.弗罗里 人工合成半合成抗生素被相继开发出来 6-氨基青霉烷酸 神奇 的抗生素 抑制细胞壁的形成 影响细胞膜的功能 干扰蛋白质合成 抑制核酸复制 和固醇结合影响细胞膜透性 氨苄青霉素（ampicillin） 和蛋白结合影响膜屏蔽作用 作用于呼吸链影响能量利用 白点是强度各异的抗生素 ，最底下的青霉素