SPN与心脑血管疾病易感性

1、单核苷酸多态性与心脑血管疾病易感性 snp及检测技术 snp 的概念 单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，snp） 同一物种不同个体基因组dna的等位序列上单个核苷酸存在 差别的现象。 它是人类可遗传变异中最常见的一种。 它由单碱基的转换, 颠换、 插入及缺失等变异引起 单核苷酸多态性在基因组中的位置和分类 一是遍布于基因组的大量单碱基变异; 5-端非编码区snp 3-端非编码区snp 其他非编码区snp 二是分布在基因编码区(coding region) , 称其 为csnp，属功能性突变。 基因编码区snps（coding-region snps，

2、csnps） 同义snp：引起aa残基改变 非同义snp snp在基因组内的形式: snp在单个基因或整个基因组的分布是不均匀的： （1）非转录序列要多于转录序列 （2）在转录区非同义突变的频率, 比其他方式突变的频率低 得多。 位于外显子区并改变氨基酸序列的snp以及位于基因表达调 控区的snp可能具有重要临床意义和功能意义 snp 的特点 在遗传学分析中, snp 作为一类遗传标记得以广泛 应用, 主要源于这几个特点: （1）密度高snp在人类基因组的平均密度估计 为 11000 bp , 在整个基因组的分布达 3106个, 遗传距离为 23cm , 密度比微卫星标记更高, 可以 在任何一

3、个待研究基因的内部或附近提供一系列标 记。 （2）富有代表性某些位于基因内部的snp 有可 能直接影响蛋白质结构或表达水平, 因此, 它们可能代 表疾病遗传机理中的某些作用因素。 snp 的特点 （3）遗传稳定性 与微卫星等重复序列多态性标 记相比, snp 具有更高的遗传稳定性。 （4）易实现分析的自动化snp标记在人群中 只有两种等位型(allele) 。这样在检测时只需一个 “ + - ”或“全无”的方式，而无须象检测限制性片 段长度多态性，微卫星那样对片段的长度作出测 量，这使得基于snp的检测分析方法易实现自动 化。 检测snp的常用技术 以凝胶电泳为基础的分析方法 以pcr( al

4、lele specific pcr, aspcr )为基础的分析技术 以酶为基础的分析技术 以杂交为基础的分析技术 等位基因特异 pcr ( as-pcr) 原理：原理：根据 snp位点设计特异引物,其中一条链(特 异链)的3末端与 snp位点的碱基互补(或相同) , 另一条链(普通链)按常规方法进行设计,因此,as- pcr技术是一种基于snp的pcr标记。因为特异引 物在一种基因型中有扩增产物,在另一种基因型中没 有扩增产物,用凝胶电泳就能够很容易地分辨出扩增 产物的有无,从而确定基因型的 snp。 直接测序是最容易实施的snp 检测方法。通过直接测序 检测snp 的基本原理是: 通过对不

5、同个体同一基因或基因 片段进行测序和序列比较, 以确定所研究的碱基是否变异, 其检出率可达100%。采用直接测序法, 还可以得到snp 的类型及其准确位置等snp 分型所需要的重要参数。随着 dna 测序自动化和测序成本的降低, 直接测序法将越来越 多地用于snp 的检测与分型。 直接测序法直接测序法(direct sequencing) 心脑血管疾病易感性 易感性 易感性是指由遗传基础所决定一个个体患病的风险。也 可以理解为在相同环境下，不同个体患病的风险。 易感性完全由基因决定。在环境致病因子作用下的基因表 达往往起着更重要的作用。因为即使基因型一致，基因表 达还会受到甲基化、体细胞突变、

6、x染色体的随机失活等 影响。 心脑血管疾病 心脑血管疾病是全球范围严重威胁人类健康，造成人类死 亡最主要的原因,包括动脉粥样硬化、冠心病、高血压、 心衰和脑卒中等疾病。 心脑血管疾病发病过程是错综复杂的。 snp 在肾素 血管紧张素 醛固酮( raas) 系统相关作 用分析研究的进展。 基因多态性 1.肾素 血管紧张素 醛固酮( raas) 系统相关基因多态 性 2.受体阻断剂与cyp2d6基因多态性 3.他汀类药物与载脂蛋白 4.华法林与维生素k环氧化物还原酶和cyp2c9基因多态性 rass 肾素血管紧张素醛固酮系统( reninangiotensin aldosterone system

7、，raas)，在维持心脑血管系统正常 生理功能的过程中起着重要的调节作用，该系统中包括肾 素、血管紧张素原、血管紧张素等一系列激素及相应酶 ，在它们的共同作用下维持着机体内环境的稳定 血管紧张素原基因多态性 血管紧张素原基因( angiotensinogen，agt) 该基因定位 于1q42 43 处，编码区由5 个外显子和4 个内含子构成 。 该基因编码的产物是血管紧张素的前体，同时也是肾素作 用的惟一底物。第二外显子区存在2个可导致编码氨基酸 改变的基因突变点：met235thr和thr174met。带有235 thr等位基因的个体往往具有更高的血浆agt水平，可能是 部分原发性高血压的发

8、病原因；同时对血管紧张素转换酶 抑制剂等降压药物有更好的应答率。 血管紧张素原基因 但是对于agt 基因的多态性是否与心脑血管病存在关联还 不能完全确定。 来自日本的研究显示agt 基因m235t 多态性可能是独立 于血压等因素的心脑血管病发生的独立危险因素。 血管紧张素转换酶基因多态性 血管紧张素转换酶基因( angiotensin converting enzyme， ace) 该基因定位于染色体17q23。它含有26 个外显子和 25 个内含子，全长21kb。该基因编码的产物是将血管紧 张素i转换为血管紧张素的关键酶。在该基因的16 号内 含子内存在有插入( i) 和缺失( d) 两种变异体。研究显示 ，在隐性模型上ace 基因d 等位基因是脑梗死的一个中度 的独立的危险因素。 ace 基因可以通过不同的遗传机制影响心脑血管疾病的发 生与发展，是研究各类心脑血管疾病遗传易感性的主要候 选基因。 血管紧张素受体的基因多态性 血管