培养基配制和灭菌方法验证0001

1、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证方案文件编码：项目姓名签名日期起草审核审核批准生效 日期年份页内硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证方案目录人硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证计划次硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证小组名单头硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证方案硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证培训记录S、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证附属记录6、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证报告7、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证合格证书硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证计划一.年月日_年月日,根据我公司认证领导小组的要求及验证委员会的安排，对硫乙醇酸盐流

2、体培养基配 制和灭菌方法进行验证，具体安排如下： 制定验证方案，由硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验 证小组组长负责起草。验证方案讨论、修改、审批和培训。验证工作实施。二、年月日一年月日，三、年月日一年月日，四、年月日一年月日，根验证悄况与记录，书写验证报告。五、年月日_年月日，验证报告审核批准，合格证发放。硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证小组名单组长:成员:一、目的通过验证验证所采用的硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法，适合于我公司硫乙 醇酸盐流体培养基的制备，为质量控制试验提供优质培养基。并培养基配制和灭菌的操 作方法，为培养基配制和灭菌人员提供正确的操作方法，使培养基配制和灭菌标

3、准化、 程序化。二、适用范围本方案适用于本公司硫乙醇酸盐流体培养基的配制和灭菌方法的验证。三、内容A概述培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。适宜的培养基制备方法、 贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时，应严格按照培养基厂商提供的使用说明配制，如质量/体积、中、制备条件、灭菌条件和操作步骤等。培养基若采用不适当的加热和灭菌条件，有可能引起颜色变化、透明度降低、的改变。因此，培养基应釆用验证的灭菌程序灭菌，培养基灭菌方法和条件，应通过适用性检查试验进行验证。此外， 对高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证，以保证在一定的装载方式下的正常热分

4、布。 温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基的过热，过度灭菌可能会破坏绝大多数的细 菌和真菌培养基促生长的质量。灭菌器中的培养基的容积和装载方式也将影响加热的速 度。因此，应根据灭菌培养基的特性，进行全面的灭菌程序验证。根据培养基的特性，按制定的方法进行配制和灭菌，根拯验证结果判断是否符合验 证标准。若符合，按验证的方法和条件进行培养基的配制和灭菌，若不符合，重新制定 方案，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。2验证项目及认可标准验证内容验证项U验证标准配制灭菌前的焰727&灭菌灭菌温度fsrc灭菌时间伤分钟灭菌效果（刃值）f2灭菌后歼值6973灭菌后外观性状符合规定适用性灵敬度检査符

5、合规定检査无菌性检査符合规定有效期外观性状符合规定验证保存三灵敬度检査符合规定周无菌性检査符合规定连续验证M次配制的硫乙醇酸盐流体培养基。3.验证依据3,f.刃勺5382005培养基制定指南3,2,3,3.药品生产质量管理指南（刃矽版）3,4.中华人民共和国药典（aw年版二部）3,5.中国药品检验标准操作规程（勿/0年版）药品生产验证指南（逐版）（国家食品药品监督管理局）“验证方法与内容4丄实验准备器具；电磁炉（最大功率 边勿）、大烧杯（阮讹）、不锈钢锅、玻璃棒、试管、硅胶塞、细绳、牛皮纸、分析天平、药匙、量筒（如、必M）等。名称生产厂家型号校验悄况生化培养箱电热恒温培养箱自动台式灭菌器电子天

6、平数字酸度计生物安全柜超净工作台设备培养基及试剂名称生产厂家批号纯化水硫乙醇酸盐流体培养基营养肉汤培养基营养琼脂培养基氢氧化钠稀盐酸嗜热脂肪芽胞菌（44验证用菌株来源于贵州省药品检验所验证菌株菌株 代数培养基培养温度培养时间（小时）大肠埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽抱杆 菌0色念珠菌黑曲霉菌42验证内容阿执行标准2配制容器及配套器具的清洗严格按照玻璃器皿清洗操作规程执行。培养基的配制严格按照培养基管理规程执行。匕自动台武灭菌器严格按照沁左为力型台式灭菌器使用维护保养操作规程执行./取同一批硫乙醇酸盐流体干粉培养基配制三批进行以下验证。422配制灭菌过程z称量取硫乙醇酸盐流体干粉培养基羽右克加纯化水

7、/沁z加热煮沸使其完全溶解。每次按照此处方量配制8547応。乙灭菌前的歼值测定取已配制好的硫乙醇酸盐流体培养基叫，放冷至右0调节 处值至7274范围内。以此比例来调节剩下的培养基的歼值。乙分装 将已调节好处值的硫乙醇酸盐流体培养基分装至妙25曲试管中，分装的 管数为12200管范围，用牛皮纸按45管/捆的方式包扎结实。其中一管只装约 g 以 备灭菌后最终歼值测定。/灭菌器中的培养基的数量及装载方式（满载）将分装好的S捆（0管/捆）培养基试管置于灭菌器中，按下图/、H 0、Q、W S点放置。灭菌器柜门指示菌的放置：将指示剂嗜热脂肪芽抱菌（菌浓度：I如如支）S支各放入S捆培养基中间的其中一支试管，

8、同时将已编号的S支校正好的点温度计插入0支待灭菌 培养基试管内，开始灭菌。将已装载好的硫乙醇酸盐流体培养基在Q/O条件下灭菌侈分钟。灭菌结束后记录各留点温度计点温度。同时取出S支已灭菌嗜热脂肪芽抱菌，直接置培养窃另取一支未经灭菌的嗜热脂肪芽抱菌指示剂一起培养，作为阳性对照。合格。根据颜色判断灭菌效果，培养后全部保持紫色灭菌合格。若由紫色变为黄色为不 对照管应由紫色变为黃色为该指示剂有效。灭菌后的歼值的测定 取勿M管已灭菌的硫乙醇酸盐流体培养基，放冷至右。测定歼值，应在6$7主范M内。外观性状灭菌后培养基应对其外观性状仔细检査，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉 塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。

9、贮存中培养基发生颜色变化、浑浊；固体培养基表面产生裂缝或涟漪等异常现象, 不符合使用规定时，应停止使用，重新进行配制和灭菌程序验证。4.23硫乙醇酸盐流体培养基的适用性检査无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基等应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的 要求。本检査可在供试品的无菌检査前或与供试品的无菌检査同时进行。a.无菌性检查每批培养基随机取S支（瓶），培养力天，应无菌生长。&灵敬度检査菌液制备 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至 营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生抱梭菌的的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流 体培养基中，刼站t?培养疗小时；上述培养物用无菌氯化钠溶液制成每

10、滋含 菌数小于/化r （菌落形成单位）的菌悬液。菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用，若保存在2-rc.可在小时内 使用。培养基接种 取每管装量为的硫乙醇酸盐流体培养基乡支,分别接种小于/力曲的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽泡杆菌、生砲梭菌各2支，另J支不接种作为 空口对照，培养三天，逐日观察结果。结果判断空0对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基 的灵敏度检査符合规定。5组织实施57.验证机构的组成2公司验证委员会，负责所有验证工作的领导和组织、审批验证方案和验证报告、 发放验证证书。S.M硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证工作小组，负责该验证项U的验证方

11、案起草、实施、组织与协调实施，负责验证样品检测，完成各项记录，根检验和验证 结果进行评定、完成验证报告。部门部门职责贵任人丄作划分质量部方案起草、实施、书写报告操作实施质量部取样、检验、出报告操作实施验证方案审定、批准、实施、发放验证合格证方案审核委员会方案批准四.附件及相关表格文件硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证报告文件编码:项U姓名签名日期起草审核审核批准生效日期年份-X 验证概述培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。中华人民共和国药典力年版二部规定：在实验室中，若釆用己验证的配置和灭菌程序制备培养基且过

12、程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检査试验可只进行一次。本公司采用的培养基均是北京三药科技开发公司生产的市售脱水培养基。为规范生测实验人员在配制培养基时标准化、程序化并符合中华人民共和国药典年版二部规定，特对培养基的配制程序进行验证。A验证组织与实施/ A验证小组成员及职责分工部 门部门职责责任人丄作 划分质量 部方案起草、实施、书写报告操作实 施质量部取样、检验、出报告操作实 施验证 委员 会方案审方案审定、批准、实施、核发放验证合格证方案批 准本验证山质量部负责并山相关人员根据硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证方案所规定的方法与步骤实施。2实施时间为：年月日一年月日。二.各项目验证结

13、论A灭菌前后歼值日期：年 月 日配制批号灭菌前值灭菌后歼值结果判定2外观性状日期年 月曰年 月曰结果判定配制批号灭菌后保存三周后M留点温度计温度记录日期：年 月曰配制批号灭菌后温度V结果判定指示剂培养结果日期：年 月曰配制批号灭菌后指示剂颜色结果判定阳性对照5灭菌后培养基无菌性检査A2 天4 天7天to 天/天2S4结 果判定6灭菌后培养基灵敏度检査6.菌液计数结果 日期：年 月曰指不菌名称菌液浓度（羽/M）标准 浓度平 板/平板2平均 菌落数金黄色葡萄球菌妙!26100铜绿假单胞菌妙滋怎7旳生抱梭菌妙矽的65?斛枯草芽他杆菌忽矽矽配制检査项目第一天第二 天第三天结果6W培养基灵敏度检査结果日

14、期：年 月曰配制批号检査项U第一天第二 天第三天结果判定阴性对照管金黄色葡萄球 菌管铜绿假单胞菌 管生抱梭菌管枯草芽抱杆菌 管日期：年 月曰批号判定阴性对照管金黄色葡萄球 菌管铜绿假单胞菌管生抱梭菌管枯草芽抱杆菌 管培养基灵敬度检査结果7 保存三周后培养基无菌性检査配制批号检査项U第一天第二 天第三天结果判定阴性对照管金黃色葡萄球 菌管铜绿假单胞菌管生抱梭菌管枯草芽抱杆菌 管6培养基灵敏度检査结果日期：年 月曰号、天4天7天9天/ 天2S4结 果判定日期:年 月曰72培养基无菌性检查结果配制批号:VA2天4天7天10天/天2S4结 果判定73培养基无菌性检査结果配制批号:日期:保存三周后培养基

15、灵敬度检査年 月曰菌液计数结果 日期：年 月曰指不菌名称菌液浓度（羽衣）标准 浓度平板/平板2平均菌 落数金黄色葡萄球菌妙35A00铜绿假单胞菌妙913)生抱梭菌妙滋&幺蚀枯草芽抱杆菌惣63*72保存三周后培养基灵敬度检査结果日期： 年 月曰配制批号检査项U第一天第二 天第三天结果判定阴性对照管金黄色葡萄球 菌管铜绿假单胞菌 管生抱梭菌管枯草芽抱杆菌 管保存三周后培养基灵敏度检査结果日期：年 月曰配制批号检查项U第一天第二天第三天结果判定阴性对照管金黃色葡萄球 菌管铜绿假单胞菌 管生抱梭菌管枯草芽抱杆菌 管了保存三周后培养基灵敬度检査结果日期： 年 月曰配制批号检査项U第一天第二天第三天结果判定阴性对照管金黄色葡萄球 菌管铜绿假单胞菌管生抱梭菌管枯草芽抱杆菌 管三.建议.结果分析和验证总结A建议/ A加强生测室检验人员的操作技能培训，使培养基配制和灭菌过程标准化，程当硫乙醇酸盐流体培养基在日常无菌检测时，应对其外观性