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文档简介

1、项目一 天然植物有效成分提取子项目一、黄芩根中黄芩苷的提取1、【项目目的】( 1)掌握黄芩苷不同提取工艺和操作要点,不同工艺对产品得率和品质的影 响;(2)通过黄芩苷含量检测,掌握定性、定量方法在黄酮类物质检测中的应用;(3)通过对黄芩苷的单因素和正交实验优化,掌握正交方法在植物有效成分提 取中的应用;(4)通过黄芩苷的提取工艺优化实训,掌握黄酮类物质提取的一般规律。2、【项目任务】(1)通过查阅文献,掌握水提法、醇提法在黄芩苷提取中的基本原理;(2)查阅文献设计不同的黄芩苷提取工艺,并结合正交实验进行黄芩苷的提取 工艺优化,得到提取得率最大化;(3)查阅文献并结合黄芩苷国标检测方法,对提取中

2、黄芩苷含量进行准确测 定;(4)总结黄芩苷提取工艺各环节具体参数,得出最佳工艺条件,并分析存在的 问题,各小组以PPT形式作出整体汇报。3、【项目要求】( 1)能够全面准确采用单因素实验对可能影响提取得率的因素进行测定分析, 同时确定主要影响因素;( 2)在单因素的基础上进行正交分析,确定合适的因素和水平设计正交实验; (3)通过正交分析确定最佳提取工艺条件4、【项目背景】(1)黄芩及黄芩苷简介黄芩( Scutellaria baicalensisGeorgi )具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。其主要成分黄苓苷(Baicalin)是从黄苓根中提取分离出来的一种黄酮 类化合物,具有抑菌、

3、利尿、抗炎、抗变态及解痉作用,且具有较强的抗癌反 应等生理效能。黄芩苷还能吸收紫外线,清除氧自由基,同时,又能抑制黑色 素的生成,是一种很好的功能性美容化妆品原料,具有较高的开发利用前景。黄芩化学成分研究逐渐为药学和化学工作者所重视,目前,国内对黄芩苷 提取工艺的研究有较多报道,其提取方法主要有温浸法、煎煮法、微波法、超 滤法等,但如何提高黄芩苷收率和纯度一直是实际生产中存在的问题,缺乏对 整个工艺条件进行全面研究,因此,有必要对影响黄芩苷提取工艺及其影响因 素作一全面探讨。A、水提法黄苓粉碎为20-40目,提取2次,物料比为10和5倍,时间为60 min和30 min,分离方式为先用双层细滤

4、布过滤再离心分离,60C用盐酸调pH 23,再70 C保温60 min,静置3 h,蒸馏水分离洗涤两次,干燥得黄苓苷粗品,测 量黄芩苷的含量,计算提取率。工艺流程原料选择f粉碎f煎煮f过滤f离心f调节Ph值f保温f静置f洗涤f粗 制品一加蒸馏水溶解f调节Ph值f加乙醇f调节Ph值f冷却f过滤f干燥f成 品。B、回流提取法黄酮苷类 (如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等 )一般可用丙酮、醋酸乙 酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇一 水(1:1)或甲醇。乙醇和甲醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂,高浓度的醇 (如 90、 95)宜于提取甙元, 60左右浓度的乙醇或甲醇水

5、溶液适宜于提取 甙类物质。可以采用一定浓度的醇溶剂提取,测量黄芩苷的含量,计算提取 率。黄萍粗粉4倍量60鴻乙酸浸泡过夜,次日90P回渝提3(加陌 量依次为4, 3f 2倍人璋次attain,过滤,合井滤液誌液商渣冋收乙脾至无前唏水液加热至8O*C5盐酸调pH为1-2*保謀30Eim室温静置24沉淀,离心沉淀上濟淞协倍水搅样成混悬戒.20NaOH 调pH为7,静置离心沉谴上清加热至40X:, Btt卜加入綁体积乙脖 (1:1九混匀,静置.离卍上清液沉淀盐酸调pH为1“2 8QC保温3Omin( 皇隘放置,沉谗,离心上清液沉淀干燥*粗黃苓口C、黄苓苷含量测定方法标准曲线的绘制:精确称取黄苓苷标准

6、品 50 mg,用50%乙醇溶解并定容 于100 mL容量瓶,配制0.5 mg/mL黄苓苷标液,分别吸取标液 0.5,1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0 mL于100 mL容量瓶中,用50%乙醇定容,紫外可见分 光光度计278 nm处测吸光值,得到吸光度-浓度回归曲线。样品含量的测定:精确称取实验所得黄苓苷粗品 50 mg用50%乙醇溶解定 容于100 mL容量瓶。用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,吸取续滤液 2.5 mL于100 mL容量瓶中,用50%乙醇定容。另取50%乙醇作空白,于278 nm波长处测吸 光度,由回归方程式计算出对应浓度,按下式计算黄苓苷含量。黄

7、苓苷含量(%)=对应浓度(卩gmL) x 100X40样品重(mg) 5、【项目实训流程】 (1)在教师指导下,按照材料中所述的参考方法,自行设计并完成黄芩苷提取 工艺实训方案;(2)通过正交实验,得出提取得率较高的生产工艺,并确定影响提取的主要因 素和影响程度;( 3)完成提取工艺总结报告:列表记载提取得率; (4)对不同的提取工艺条件的提取得率进行比较分析,提出提取工艺的最佳条 件,简要估算每种工艺对应的加工成本(不含人工费) ;( 5)掌握黄酮类物质提取的一般规律和方法。6、【项目成果形式】(1)黄芩根中黄芩苷类物质提取工艺条件详细设计方案,每小组提交1 份;(2)优化后的黄芩苷提取工艺

8、,并列出主要影响因素及影响程度;( 3)每小组提供黄芩苷提取实训总结报告 1 份,并对整个工艺环节作出详细总 结和分析;(4)以PPT形式作出汇报,小组成员随机汇报。7、【项目评价考核标准】( 1)、考核要求( N+2)A、考核形式分为过程性考核(N)和终结性汇报考核,比例为4:6 ;B、学生出勤率达到75%或以上的要求,否则或不获准参加该科目之考评。C、过程考核主要是对学生的查阅文献并设计生产工艺条件、实际操作技能进行 考核,主要包括提取设计方案的制定、项目组织与实施、出勤情况、仪器操作 能力等;( 4)终结性考核主要是考核本实训的详细优化后的提取工艺及其存在的问题总 结,包括工艺条件、工艺总结报告、汇报 PPT等。( 2)、考核比重考核类型考核比重 100%考核项目及比重考核标准考核项目比重过程考核(N)40%出勤率5%出勤率需达到75%上为满分, 低于75%本项为0,教师评定。设备使用10%小组成员能够熟练使用提取、过 滤相关设备,并了解设备的基本 原理,教师、小组评定。设计方案25%小组设计方案并作出书面汇报,合理可行,且符合生产 25分, 设计基本合理20分,设计大部 分不合理5分

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