消痛灵搽剂质量标准分析论文_优秀论文

1、 消痛灵搽剂质量标准分析论文【摘要】目的建立消痛灵搽剂的质量标准。方法采用薄层色谱法（TLC）对处方中的栀子、姜黄、乳香、没药进行定性鉴别；采用反相高效液相色谱法（RPHPLC）定量分析消痛灵搽剂中大黄素和大黄酚的含量。结果TLC分离效果好, 斑点清晰；大黄素在0.2481.984g, 大黄酚在0.2922.336g范围内呈良好的线性关系, 平均回收率大黄素为99.7%, RSD0.64%；大黄酚为99.2%, RSD0.89%。结论该方法简便、准确、重复性好、能有效控制该复方制剂的质量。【关键词】消痛灵搽剂；大黄素；大黄酚；薄层色谱；反相高效液相色谱Abstract：ObjectiveToe

2、stablishthequalitystandardofXiaotonglinglinimentMethodsFructusGardeniae,RhizomaCurcumaelongae,Olibanum,MyrrhawereidentifiedbyTLC.ThecontentofemodinandchrysophanolinXiaotonglinglinimentwasdeterminedbyRPHPLCResultsTheidentifiedcharacteristicsofchromatographyweredistinctandthespotswereclear.Thestandard

3、curvewaslinearwithintherangeof0.2481.984gforemodinand0.2922.336gforchrysophanolTheaveragerecoveryofemodinwas99.7%withRSDof0.64%,withthatofchrysophanolwas99.2%withRSDof0.89%ConclusionThemethodisconvenient,accurateandhasagoodreappearanceThepreparationsqualitycanbecontrolledeffectivelyKeywords：Xiaotong

4、lingliniment；Emodin；Chrysophanol；TLC；HPLC消痛灵搽剂是由我院文绍敦教授根据中医药理论和多年临床经验, 筛选有效药物研制而成的中药复方外用制剂, 全方以大黄为君药, 栀子为臣药, 佐以姜黄、乳香、没药, 具有清热止痛、化淤散结的功效, 主要用于治疗急性痛风性关节炎、跌打损伤、局部淤肿疼痛等病症, 临床疗效显著。为了有效控制该制剂的质量, 本文建立了TLC法对栀子、姜黄、乳香、没药等4味药材进行定性鉴别；并采用RPHPLC法测定君药大黄中的大黄素和大黄酚的含量。研究结果表明, 该方法具有简便、准确、重复性好、专属性强等特点, 能有效控制消痛灵搽剂的质量。1仪

5、器与试药高效液相色谱仪（LC10AT泵, SPD10A紫外检测器, 日本岛津公司）；N2000型色谱数据工作站（浙江大学智能信息工程研究所）；KQ100超声波清洗器（浙江昆山市超声仪器有限公司）；硅胶G板（自制, 规格：12cm24cm)；大黄素、大黄酚、栀子苷、姜黄素对照品（中国药品生物制品检定所）；乳香、没药对照药材由青海大学医学院中药教研室魏全嘉教授鉴定；消痛灵搽剂及阴性对照样品（自制）；甲醇为色谱纯, 其他试剂均为分析纯。2薄层色谱鉴别2.1栀子的TLC法鉴别取消痛灵搽剂作为供试品溶液。取缺栀子的阴性样品作为阴性对照溶液。另取栀子苷对照品, 加甲醇制成每毫升含2mg的溶液, 作为对照品

6、溶液。吸取上述溶液各3l, 分别点样于同一块硅胶G薄层板上, 以氯仿-甲醇（52）为展开剂, 展开, 取出, 晾干。用10%的硫酸乙醇液显色, 110烘至斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与对照品色谱相应的位置上, 显浅黄色斑点, 阴性对照溶液在相应的位置上无此斑点。结果见图1。2.2姜黄的TLC法鉴别取消痛灵搽剂作为供试品溶液。取缺姜黄的阴性样品作为阴性对照溶液。另取姜黄素对照品, 加甲醇制成每毫升含2mg的溶液, 作为对照品溶液。吸取上述溶液各3l, 分别点样于同一块硅胶G薄层板上, 以甲醇-醋酸乙酯-甲酸（5.51.20.6）为展开剂, 展开, 取出, 晾干。用浓氨水显色, 110烘至斑点

7、显色清晰。供试品色谱中, 在与对照品色谱相应的位置上, 显黄色斑点, 阴性对照溶液在相应的位置上无此斑点。结果见图2。图1栀子的TLC图谱（略）图2姜黄的TLC图谱（略）2.3乳香的TLC法鉴别取消痛灵搽剂作为供试品溶液。取缺乳香的阴性样品作为阴性对照溶液。另取乳香对照药材0.5g, 加乙醚10ml, 超声处理20min, 滤过, 滤液作为对照药材溶液。吸取上述溶液各3l, 分别点样于同一硅胶G薄层板上,以石油醚（3060）-醋酸乙酯（346）为展开剂, 展开, 取出, 晾干。用5%香草醛硫酸溶液显色, 110烘至斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显紫色斑点, 而阴

8、性对照溶液在相应的位置上无斑点。结果见图3。2.4没药的TLC法鉴别取消痛灵搽剂作为供试品溶液。取缺没药的阴性样品作为阴性对照溶液。另取没药对照药材0.5g, 加乙醚10ml, 超声处理20min, 滤过, 滤液作为对照药材溶液。吸取上述溶液各3l, 分别点样于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-丙酮（172）为展开剂, 展开, 取出, 晾干。用5%香草醛硫酸溶液显色, 110烘至斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显紫色斑点, 而阴性对照溶液在相应的位置上无斑点。结果见图4。图3乳香的TLC图谱（略）图4没药的TLC图谱（略）3含量测定3.1色谱条件色谱柱：Hypersi

9、lC18柱（250mm4.6mm, 5m）；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（8713）；检测波长：254nm；流速：1.0mlmin-1；进样量：10l。3.2线性范围的考察精密称取大黄素对照品6.2mg, 大黄酚对照品7.3mg, 分别置两个50ml量瓶中, 加甲醇使溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液2, 4, 6, 10, 16l, 进样, 在上述色谱条件下测定峰面积, 以大黄素、大黄酚进样量为横坐标, 峰面积积分值为纵坐标, 绘制标准曲线, 得回归方程为：Y大黄素=1.26103X12.95, r=0.9997；Y大黄酚=2.81103X7.52, r=0

10、.9995。结果表明, 大黄素、大黄酚进样量在0.2481.984g和0.2922.336g线性关系良好。3.3供试品溶液的制备精密量取消痛灵搽剂样品3ml, 置水浴上蒸干, 残渣加适量甲醇溶解, 转移至10ml量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液作为供试品溶液。3.4阴性对照实验取缺大黄阴性对照样品, 按“3.3”项下方法制备阴性对照品溶液, 取10l进样, 结果在与大黄素、大黄酚对照品保留时间相同的位置上无色谱峰出现, 表明缺大黄的阴性对照品溶液对测定无干扰。3.5精密度实验精密吸取大黄素、大黄酚对照品溶液各10l,在上述色谱条件下连续进样5次, 大黄素、大黄酚峰面积积分

11、值的RSD分别为0.86%, 1.02%, 结果表明该方法的精密度良好。3.6重复性实验取同一批号样品5份, 分别按“3.3”项下操作, 依法测定, 计算得大黄素、大黄酚的平均含量分别为0.136, 0.283mgml-1, RSD分别为1.53%和0.71%。3.7稳定性实验取同一供试品溶液放置不同时间(0, 2, 4, 8, 12h)后进样, 测定峰面积, 结果RSD为0.23%, 表明溶液在12h内保持稳定。3.8加样回收实验取已知含量的样品5份, 分别精密加入大黄素对照品溶液（0.124mgml-1）、大黄酚对照品溶液（0.146mgml-1）各2ml, 按“3.3”项下制备回收率测定

12、用样品溶液, 依法测定, 计算回收率, 大黄素平均回收率为99.7%, RSD=0.64%；大黄酚平均回收率为99.2%, RSD=0.89%, 结果表明本方法的回收率好。3.9样品测定精密吸取对照品和供试品溶液, 依上述条件进行测定, 记录峰面积, 按外标法以峰面积计算含量。结果见表1。表1样品含量测定结果（略）4讨论薄层色谱法（TLC）鉴别项下选用的展开系统均参照中国药典（2005年版）的鉴别方法1制定, 方中栀子、姜黄选择主要有效成分栀子苷、姜黄素作为对照品, 而乳香、没药无对照品, 则选用对照药材作对照, 样品及阴性对照品采用平行试验,结果表明各检出成分分离效果好, 不受其他成分的干扰

13、, 操作简便, 专属性强, 可作为该制剂的定性控制指标。大黄为消痛灵搽剂的君药, 主要含有游离和结合的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚, 其中大黄素具有抑菌、抗炎、免疫调节、抑制血小板聚集、改善微循环、降低血液黏度、抗氧化、清除自由基、保护肝肾等作用2；大黄酚具有止咳、抗菌、止血、抗氧化、清除自由基等作用3, 这些药理作用在很大程度上与该复方制剂的功能主治相一致, 故选择君药大黄中的大黄素、大黄酚作为质量控制指标成分, 结合文献4用RP-HPLC进行含量测定, 前处理过程简单, 阴性无干扰, 灵敏度高, 准确性及重现性好, 可作为本品的定量控制指标。根据样品测定结果, 5批样品中大黄素的平均含量为0.131mgml-1, 大黄酚的平均含量为0.287mgml-1, 考虑到药材来源、制剂工艺等因素, 建议其限度为本品含大黄以大黄素和大黄酚的总量计,不得少于0.4mgml-1。【