选修1 3填空教师版

1、 微生物的利用 一。培养基种类 固体培养基， 培养基，配制固体培养基时，需要添加凝固剂 如 成分：一般都含有水、 、氮源和无机盐等最基本的物质，有时还需要加入特殊的 营养物质。 2无菌技术 对实验空间、操作台可用 或酒精消毒，操作者的手用 消毒。 实验用的培养器皿和培养基一般用 法灭菌，接种环 方法灭菌。 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。 4.不能加热灭菌的化合物，要用 过滤 固体。琼脂、碳源、紫外线 酒精 高压蒸汽灭菌法 酒精灯火焰 G6玻璃砂漏斗 二、大肠杆菌的培养和分离 1大肠杆菌 (1)性质：大肠杆菌是革兰氏 性、 的肠道杆菌。 (2)用途：大肠杆菌是 技术中被广

2、泛采用的工具。 2实验原理 (1)扩大培养原理：将大肠杆菌接种在 培养基中，使其快速分裂繁殖。 (2)分离纯化原理：将待检测微生物样品通过 或 接种在 培养基上，样品中的每一个细胞或孢子都可以生长繁殖形成单个菌落。将单个菌落接种到 培养基上，经培养后，即可得到一个微生物的纯种。 阴性、兼性厌氧 划线或涂布 LB固体 斜面 3实验步骤 培养基 固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌50 mL LB50 mL LB液体培养基和 灭菌 个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形成平面4将培养基分别倒入 倒平板 12 h在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养 接种 用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次

3、，划线? ?在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿分离? 后，24 h12?，放在37恒温培养箱中培养培养皿倒置?盖在下面培养? ?可看到划线的末端出现不连续的单个菌落观察? 用接种环取出单个菌落，用划线法接种在斜面培养基上，保存? ? 冰箱中保存培养24 h后，置于4 37 菌种? (1)稀释的大试管中，充分1 mL大肠杆菌培养液，加入到盛有9 mL_用1 mL无菌吸管吸取53412、10混匀，稀释_倍；按照同样的方法依次进行稀释制成10、1010、106 10系列稀释度的大肠杆菌稀释液。 划线或涂布(2) 划线分离法右手拿拿皿底，a操作：在_旁，左手 接种环，挑取大肠杆菌培养液在平板上划

4、线。平行划线时，第一次划线及每次划线之间划线。b划线方法：_划线和_c 接种环，划线结束后也要灼烧接种环 都要 涂布分离法 浸在盛有酒精的烧杯中。_a将 取不超过b0.1 mL的_，滴加到培养基表面。 。10 s8c将蘸有少量酒精的玻璃刮刀在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却 d用玻璃刮刀将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。 页 1 第(3)培养：将接种的平板_于培养箱或温室中37 培养1224 h。 无菌水 10 (2)a.酒精灯火焰 b平行 连续 灼烧 a.涂布器 b菌液 (3)倒置 第2课时 分离以尿素为氮源的微生物 1实验原理 (1)以尿素为氮源的微生物含有

5、酶，可以通过降解尿素作为其生长的氮源。 (2)尿素固体培养基的唯一氮源为 ，只有能合成 的微生物才能分解尿素 (3)脲酶可使尿素分解产生氨，从而可使加入 的尿素固体培养基变 。其利用尿素的反应式为： 脲酶CO 2NHOCOH 酚红指示剂 红 ：(NH)脲酶 尿素 脲酶23222 2实验步骤 (1)倒平板 在60 左右时，将两只三角瓶中已灭菌的 培养基和 培养基，在 旁分别倒入两个培养皿中，在水平的超净台上 ，平放至 。 (2)制备细菌悬液 2土壤1010 min，即成 的三角瓶中，振荡在无菌条件下，将1 g土样加到有99 mL 345土壤稀释液。取样时，尽量只取 稀释液。依此法制备10 、10

6、 和10。摇匀， 放在试管架上。 (3)用 法分离细菌 45的土壤稀释液各 10 和10 mL，分别加到有LB培养基和尿素培养基的培养皿取 中，再将保存在 中的玻璃刮刀(或涂布器)放在酒精灯火焰上，待刮刀(或涂布器) 上火焰熄灭，在 旁打开培养皿，将菌液涂布到整个平面上。 (4)培养 将培养皿 ，在37 中培养2448 h。 (5)观察 3实验结果 (3)在尿素培养基上的菌落周围会出现 的环带。 LB固体培养基和尿素固体 酒精灯 摇匀， 凝固 无菌水 悬液 涂布分离法 0.1 70%酒精 酒精灯火焰 倒置 恒温箱 红色 第3课时 果汁中的果胶和果胶酶 1果胶 (1)组成：果胶是植物 的主要成分

7、，由 和 组成。 的果实中果胶含量最多。 (2)作用：起着将植物细胞 的作用，去掉果胶，植物组织将变得 。 (3)性质：果胶不溶于 ，这是鉴别果胶的一种简易方法。 2.果胶酶 (1)来源：黑曲霉、 等。 (2)组成：果胶酶并不是特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，主要包括果胶酶和 。 细胞壁 半乳糖醛酸 半乳糖醛酸甲酯 山楂 粘合在一起 松散 乙醇 苹果青霉 果胶甲酯酶 第4课时 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 2固定化酶：将 的酶用 或 方法 上，使之成为 而又有 。 3将酶改造成固定化酶的原因是 由于酶 ，且不利于 ，所以要将酶改造成固定化酶。 4酶固定化的方法有 法、 法、

8、法和 法等。本实验用的是 法。 5固定化酶作用的机理 将固定化酶 ，当 时，在 的作用下 。 水溶性 物理或化学 某种介质 不溶于水 酶活性的制剂 在水溶液中很不稳定 工 页 2 第业化使用 吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法 吸附法 装柱 底物经过该柱 酶 转变为产物 二、-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验 1实验原理 将 固定在 上，一定浓度的淀粉溶液经过 后，可使淀粉水 解成 。用 测试，若流出物呈 色，表明有 生成。 2实验材料 (1)-淀粉酶的固定化 在烧杯中将5 mg-淀粉酶溶于4 mL 中 再加入5 g ，不时搅拌 30 min后将上述溶液加入1支注射器中 用10倍体积的

9、洗涤此注射器 (除去 游离淀粉酶，流速为1 mL/min) (2)可溶性淀粉溶液 取50 mg可溶性淀粉溶于100 mL 中，搅拌均匀。 -淀粉酶 石英砂固定化酶柱 糊精 淀粉指示剂 红色 糊精 蒸馏水 石英砂 蒸馏 水 未吸附 热水 3实验步骤 将灌注了固定化-淀粉酶的注射器放在注射器架上，用滴管加 溶液，使该溶液以 mL/min的流速过柱。 (2)接取流出物 待从固定化酶柱中流出 mL的溶液后，接收0.5mL流出液。 (3)流出物鉴定 在流出物中加入 溶液，观察颜色。用水稀释 倍后再观察颜色。 (4)洗涤、保存固定化酶柱 实验后，用 倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在 冰箱中保存。 (5)几

10、天后取出冰箱中该固定化酶柱，重复实验，观察结果。 淀粉 0.3 5 KI-I1 10 4 2 第5课时 果酒及果醋的制作 一、用葡萄制作葡萄酒 原理 酵母菌在 条件下进行 发酵，将葡萄糖氧化成乙醇。反应式为： 4步骤 (1)冲洗取2.55 kg的 葡萄用 洗净在鲜红紫色的 溶液中浸泡约5 min用 洗净沥去水分，待用。 (2)榨汁 用多功能榨汁机以 速将葡萄打成浆状(也可以用杵和研钵捣烂)。 (3)制作酵母悬液 加少量温水适量干酵母(2.5 kg葡萄约用1 g干酵母)放在一小烧杯中干酵母成糊状加少40 许 ，混匀，放置片刻待酵母悬液中出现 即可。 装入发酵瓶(4) 。 装量不要超过 的，否则效

11、果不好。 瓶上所加的玻璃管最好是 (5)酒精发酵 ；若 _。若温度偏低，则发酵时间 发酵温度： 。 温度高于30 ，要采取降温措施，否则 天。 发酵时间： 。 鉴别发酵完毕的依据：发酵瓶中 (6)过滤、分装、保存的细口2 L仍然浑浊)(分装到1(过滤， 用 除去葡萄皮和籽)滤液)(发酵液浑浊 )。清澈即为葡萄酒 瓶中，加盖密封，静置) ( 页 3 第延30_ 弯曲 25 低速 蔗糖 气泡 2/3 无氧 酒精 成熟 水 高锰酸钾 清水 上清液 停止出现气泡 两层纱布 酒的风味不佳 23 长 二、用果汁制作果酒 )、梨、柑橘或其他水果。 (最好原料 (1)制取果汁： 层纱布过滤即成果汁。 多功能榨

12、汁机打碎 苹果 ) 1 L为例(2)配料(以 倒入果汁转动发酵瓶使 倒入 发酵瓶中加入向2 L200 g )，混匀、加盖。(约1 g干酵母 (3)发酵 天后剧烈发酵停止取出果酒过滤和分类。 3天后可见到气泡 注意事项：天 ，该情况不能持续 会使瓶内出现 发酵开始时，由于微生物的 以上。 ，使发酵作用尽快发生。 天后还看不到气泡，必须加入更多的 若 即为果酒。 个月，用6 法取出 (4)静置5 负压酵母悬液 10 微生物的需氧呼吸 切成大块 双层 蔗糖 蔗糖完全溶解 苹果 上清液 3 酵母 虹吸法3 三、用果酒制作果醋 。 1菌种 条件下，醋杆菌将乙醇氧化为 2原理在 醋酸。反应式为： 果酒。3

13、原料 步骤4瓶 酒水混合物倒入甲瓶中发酵在 把800 mL 200 将适量醋化醋杆菌的培养物或醋曲悬液加在中( 后倒入乙瓶中， 调pH至 mL酒一水混合物中混匀， 箱将水簇通气泵由 使锯末均匀湿透) pH用通气，通气不必太快48 h后，(中选) 则进行 性，若呈试纸检查 瓶中流出液的pH， 乙与丙处的螺下一步调节甲与乙间的双通活塞、检测流出滴/5min每天用pH丝夹，使流出液量为 不再减少pH至流出液?液 停止实验? 或甲瓶液体全部流入乙瓶? 1 乙 酸性醋化醋杆菌 有氧 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定第6课时 一、泡菜腌制 。 和 1菌种 主要是 发酵产物 和其他营养物质进行发酵， 的条件下，微

14、生物利用菜中的 2原理在 。 和醇类物质等，其中也有 有 步骤3 周左右腌至菜洗泡菜坛洗净，并菜、盐水、糖及调坛口用水封可开坛食用次防空气入内并切块味品入坛混匀热水洗内壁2 亚硝酸 无氧 有机酸 假丝酵母和乳酸菌 二、亚硝酸盐的定量测定 1原理 萘基乙二胺偶联，其产物与 发生重氮化反应后，N1形成 亚硝酸盐与 产物。亚硝酸盐溶液的浓度不同，呈现的颜色深浅不一：溶液浓度高，颜色深些，浓度低， 法予以定量。 颜色浅些，可用 2步骤 页 4 第(1)样品处理 腌制的泡菜25 g及少量泡菜汤打成匀浆，过滤、清洗制取滤液，用 溶液调pH至 8.0，再加入25 mL 溶液，产生 。 (2)测定 10 mL

15、样品溶液4.5 mL 缓冲液2.5 mL60% 溶液 5 mL 定容于25 mL容 量瓶中，静置后用光程为 cm的比色杯 在 _nm处测定光密度值(OD值)，以10 mL水为 对照。 (3)标准曲线 取0、0.5、1.0、3.0和5.0 mL亚硝酸钠标准溶液处理后测光密度值，以 为横坐标， 以 为纵坐标，绘制标准曲线。 (4)计算 X(mV)/(mV)，式中X为样品中亚硝酸盐含量，单位mg/kg；m为 ，单1122111 位g；m为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，单位g；V为样品处理液总体积，V212 为 。 对氨基苯磺酸 紫红色 光电比色法 氢氧化钠 硫酸锌 白色沉淀 氯化铵 乙酸 显色液

16、1_cm 550_nm 空白对照 亚硝酸钠质量 光密度值 样品质量 测定用 样品液体积 第7课时 植物的组织培养 一、植物组织培养1含义 取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在 的条件下接种在三角瓶 中的琼脂培养基上，给予一定的 和 ，使之产生 ，或进而 生根发芽。 2原理 。 4激素在植物组织培养过程中的作用 (1)培养基中加入的植物激素是 和 。 (2)两者的 决定组织是生根还是生芽。细胞分裂素与生长素的比例高时，诱 导芽的生成；细胞分裂素与生长素的比例 时，愈伤组织继续生长而不分化；细胞 分裂素与生长素的比例 时，会趋于生根。 无菌 温度和光照 愈伤组织 植物细胞的全能性

17、生长素和细胞分裂素摩尔浓度比 大 致相等 低 二、菊花的组织培养 1材料 MS培养基、 培养基、 培养基、 (NAA)、苄基腺 嘌呤(BA)、菊花幼苗。 2步骤 (1)制备外植体 在 中，取出一瓶已进行过 的菊花培养，在无菌培养皿上用无菌镊子和 无菌解剖刀切成几段，每段上至少有 张叶片。 (若是自然生长的茎进行组织培养，则可取一段茎在 中浸泡10 min，再放入 溶液中浸泡5 min，然后用另一 溶液浸泡5 min，最后在超净台中用 清洗，切段 ) (2)接种 在 旁，将每段放入1瓶 培养基中，使 插入培养基内，盖 上 。每瓶也可放入23段幼茎切段。 (3)生芽培养 在 下保持 的温度培养，每

18、天的光照不少于14.5 h。23周后长成 健壮的丛状苗。 (4)生根培养 将健壮的 在无菌条件下一个个转入 培养基中，在上述条件下继续培养。 (5)移栽锻炼 将生根的苗移至草 或 中，用玻璃罩或塑料布保持 以上的湿度，2 3天后打开玻璃罩逐渐降低 进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。 页 5 第(6)定植栽培 转移至土中培养，即可长成植株并开花。 发芽 生根 萘乙酸 超净台 无菌培养 1 70%乙醇 5%次氯酸钠 5%次氯酸钠 无菌水 酒精灯 生芽 茎的一部分 封口膜 日光灯 1825 丛状苗 生根 草炭土或蛭 石 80%以上 降低温度 第1课时 工具酶的发现和基因工程的诞生 1基因

19、工程的概念 基因工程是狭义的 。广义的遗传工程泛指把一种生物的遗传物质(细胞核、染 色体脱氧核糖核酸等)移到另一种生物的 中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在 中表达。其核心是构建 分子。 3基因工程的技术保障 限制性核酸内切酶、 和 的发现与应用，为基因工程的创建提 供了技术上的保障。 遗传工程 遗传物质 细胞 受体细胞 重组DNA 二、限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶是能够 和 DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 2来源 主要从 生物中分离，如细菌。 3作用 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。如：某种限制性核酸内切酶能识别G

20、AATTC序列，并在G和A之 间切断DNA， 4作用特点 具有专一性，一般每种限制性核酸内切酶只识别 种特定的核苷酸序列。 5结果 形成 末端。 识别和切割 原核 磷酸二酯键 一 粘性 三、DNA连接酶 1概念 形成 个DNA片段连接在一起，分子的酶。 的2DNA连接酶是将具有末端 2功能 缝合DNA片段。在基因工程中，可以将 和 DNA连接在一起。 3作用特点 两种来源不同的DNA用 的限制性核酸内切酶切割，形成 的粘性末端。 DNA连接酶能催化磷酸与脱氧核糖之间 的形成，将两DNA末端的缝隙“缝 合”起来。如图： 碱基互补 重组DNA 外源基因 载体 相同 相同 磷酸二酯键 四、质 粒 (

21、1)概念：质粒是能够 的双链环状 分子，它在细菌中以独立于 之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质。 (2)作用：质粒是基因工程中最常用的载体，可将 基因送入 细胞。 自主复制 DNA 拟核 外源基因 宿主细胞 第2课时 基因工程的原理和技术 1基本原理 让人们感兴趣的基因(即 基因)在宿主细胞中稳定和高效地表达。 2变异类型 。 1获得目的基因 如果目的基因的序列是已知的，可用 合成目的基因， 或者用 (PCR)扩增目的基因。 页 6 第如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以从 中获取。 2形成重组DNA分子 (1)一般用 限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA(如质粒)，形 成 。 (

22、2)用 将目的基因和载体DNA连接在一起，形成重组DNA分子， 目的基因) 基因重组 化学方法 聚合酶链式反应 基因文库 同一种 相同的粘性末端 DNA连接酶 3将重组DNA分子导入受体细胞 (1)常用受体细胞： 、枯草杆菌、 和动植物细胞等。 (2)导入方法举例：用质粒作为载体，宿主细胞应该选择 ， 用 处理大肠杆菌，增加其细胞壁的 ，使含有目的基因的重组质粒进入 大肠杆菌宿主细胞。 4.筛选含有目的基因的受体细胞 (1)筛选原因：不是所有细胞都接纳了 。 (2)筛选方法举例：若质粒上有四环素的抗性基因，含有这种重组质粒的受体细胞就能够在有 的培养基中生长，否则不能生长，这样就筛选到含有重组

23、DNA分子的受体细胞。具体如下图： 5目的基因的表达 目的基因在 细胞中表达，产生人们需要的功能物质，如人胰岛素原。 1转基因植物 (1)传统育种方法的不足：培育新品种所需时间 ，而且 亲本难以杂交。 (3)培育成功的转基因农作物：抗除草剂的 ，抗植物病毒的 ，抗 害虫的 ，耐贮存的 等。 2基因治疗 (1)概念：基因治疗是向 中引入正常功能的 ，以纠正或补偿基因的缺 陷，达到治疗的目的。 三、基因工程与生态环境保护 1利用基因工程技术开发具有生物可 的新型塑料，以替代不可降解的化学合成塑 料。 2利用基因工程技术，对能够分解石油的 进行了改造，大大提高了其分解石油的能力。 3利用转基因微生物

24、吸收环境中的 、降解有毒化合物和处理工业废水。 大肠杆菌 酵母菌 大肠杆菌 氯化钙 通透性 重组DNA 四环素 宿主细胞 较长 远缘 转基因烟草 转基因番茄 转基因棉 转 基因番茄 目标细胞 基因 降解 细菌 重金属 第4课时 植物的克隆 1植物细胞的全能性 (2)原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套 ，都有发育成 为完整个体所需的全部基因。 (3)在生物体内细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织或器官，这是基因在特定的时间和空间条件下 的结果。 2植物组织培养 (1)一般程序：配制 培养基获取 的植物组织组织培养，获得 诱导新植株形成。 脱分化再分化(2)过程：离体的植物器

25、官、组织或细胞愈伤组织胚状体(或根、芽)幼苗 移入大田成熟植株。 遗传物质 选择性表达 半固体 消毒 愈伤组织 二、植物克隆的成就 1细胞培养 (1)过程：单个植物细胞经过培养基中成分的诱导，依次发育成细胞团、 、心形胚 页 7 第和 ，最后再生出完整的植株。 (2)细胞培养的诱导方法：主要通过平衡的植物激素配比进行调控。例如，适量的激动素和细胞分裂素配比可以诱导 的分化；适量的吲哚乙酸(IAA)及适当减除其他植物激素，则 可以诱导 。 2器官培养 在植物器官培养方面，雌性 的培养成果显著，例如子房的培养、胚囊的培养均已取 得进展。 3原生质体培养和植物细胞工程 (1)植物原生质体的获得方法：

26、在0.50.6 mol/L的 溶液环境(较高渗透压)下用 混合液处理根尖、叶片愈伤组织或悬浮培养细胞，将 消化除去。获得球形的 原生质体。 (2)植物细胞工程的概念和操作过程：培养植物细胞(包括原生质体)，借助基因工程方法，将 外源遗传物质(DNA)导入受体细胞(包括原生质体)中，或通过细胞 融合、 等将不同来源的遗传物质重新组合，再通过对这些转基因细胞或重组 细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株。 4多途径的植物克隆实践 植物克隆技术 应用 大量培养特定细胞系 能产生重要 (如某些中药)的细胞的大量克隆和产物的工业化生产 花药(花粉)培养，进行 克隆 选择细胞培养产生的表现出遗传变异的新植

27、株 在培养基中加入不同浓度NaCl或病原体的毒蛋白 在培养基中加入不同浓度的赖氨酸类似物 对烟草、大麦等育种 选择具备 性状的作物新类型 诱发和筛选 突变体 产生 突变体，其中赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的水平会升高 球形胚 胚状体 芽 生根 花器官 甘露醇 纤维素酶和果胶酶 细胞壁 显微注射 次生代谢产物 单倍体 有益性状 抗盐或抗病 抗赖氨酸类似物 第5课时 动物的克隆 1动物克隆的技术基础 动物克隆的技术基础是 。 2动物细胞培养 (2)原代培养和传代培养 将动物组织通过 或 方法分散成 细胞后进行的初次培养，称为原 代培养。初次培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度

28、过大导致营养枯 竭，影响细胞的生长，因此需要重新用 等处理，进行分瓶扩大培养，称为传代培 养。 动物的细胞和组织培养。酶或机械方法 单个 胰蛋白酶 生长 细胞培养 原基 整个 分化 3动物组织培养 (1)概念：动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或 特性。 (2)结果：由于细胞的运动、变化和培养物的组织成分发生变化，长期的培养结果最终成了简单的 。 (3)在广义的组培中还包括器官培养，即器官的 、器官的一部分或 器官在体外 和人工控制的条件下得以保存、生长，在此过程中保持器官的结构、功能及 能力。 4细胞系和细胞株 (1)细胞系：可 的细胞。原代培养物在首次传代时就成为细胞系，能连续培养下

29、去的细胞系称为 细胞系，不能连续培养下去的细胞系 称为 细胞系。二倍体细胞通常为有限细胞系。连续细胞系被认为是发生转化了的细 胞系，大多数具有 。有的连续细胞系是 ，具有异体致瘤性；有 页 8 第的连续细胞系获得了不死性，但保留 现象，不致癌。 (2)细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的 具有 的细胞称为细胞株。细胞株一般具有恒定的 、同功酶类型、 病毒敏感性和生化特性等。可以连续多次传代的细胞株称为连续细胞株，可传代次数有限的 细胞株称为 细胞株。 5克隆培养法(或细胞克隆) (1)概念：把一个 从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的 技术。 (2)

30、结果：由于来源于一个共同的祖细胞，所以称为 ，也就是克隆。 (3)提高细胞克隆形成率的措施：选择适宜的培养基、添加 (胎牛血清最好)、以 细胞支持生长、 (胰岛素等)刺激、使用CO培养箱、调节 等。 2 连续传代 连续 有限 异倍体核型 恶性细胞系 接触抑制 特殊性质 染色体组型 有限 单细胞 纯系 血清 滋养细胞 激素 pH 二、动物的细胞融合技术及其应用 1细胞融合与细胞杂交 原理： 。 诱导融合的方法 a物理方法和化学方法：电激法、 等。 b生物方法： (如仙台病毒)。 (2)细胞杂交 概念： 的细胞间的融合就是细胞杂交。 过程 应用：由于细胞杂交中染色体容易丢失，利用杂交细胞检测特定染

31、色体丢失与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系可以进行 。 2杂交瘤技术和单克隆抗体的制备 用外界 刺激动物，使其发生免疫反应，使 产生抗体。 利用 或聚乙二醇等作介导，使经免疫的动物的脾细胞与可以无限传代的 融合。 经过筛选、克隆培养，获得来自单一细胞的既能产生 、又能 增殖的杂交瘤 细胞克隆。 (2)杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点：可以从特异抗原成分 的抗原混合物中 提取单抗。 (3)单抗的运用：可作为 ，研究相应抗原蛋白的 、细胞学分布及其功能。 细胞膜的流动性 聚乙二醇 灭活的病毒 基因型不同 基因定位 抗原 B淋巴细胞 仙台病毒 骨髓瘤细胞 特异抗体 无限增殖 比例极少 特异探针

32、结构 三、动物的克隆繁殖 1动物细胞全能性的表现程度 (1)在动物发育过程中，细胞的发育潜能逐渐 。 3动物体细胞克隆 原理和主要技术：利用 的全能性进行 ，将动物的一个细胞核移入一个 已经去掉细胞核的 中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发 育为动物个体(克隆动物)。 变窄 细胞核 核移植 卵母细胞 第6课时 从受精卵谈起 1含义：成熟的精卵融合成为 的过程。 2过程： 精子附着于卵膜精卵质膜融合。 3同种动物精卵结合的原因之一：同种动物精子、卵细胞表面有 相互识别 的 。 受精卵 精卵识别 特异性 蛋白 二、胚胎发育的过程 1胚胎发育的概念 页 9 第受精卵发育为 的过程。

33、2胚胎发育的过程 原肠胚期组织、器官的形成幼体。 即卵裂，卵裂产生的细胞团叫卵裂球，随着卵裂球 (1)卵裂期：受精卵不断进行 个细胞时，其中的每一个细胞都具82 。当卵裂球含有 数目的增多，细胞逐渐 。 有 。如图)(2)囊胚期：具有囊胚腔、滋养层、内细胞团( 囊胚腔：囊胚中间的空腔，是由于卵裂球的细胞继续分裂，细胞间出现的间隙。 滋养层 外表的一层扁平细胞。 a存在部位： ，如胚盘。 b作用：进一步发育为 内细胞团 内部的细胞团。 a存在部位： 作用：不断增殖分化，将发育成完整的胚胎。b，能分化出成 的细胞，具有 细胞，是一种 c特点：是 体动物的所有组织和器官。 (3)原肠胚期 、胚孔的胚

34、胎时期。 原肠胚期是囊胚进一步发育形成的具有原肠腔、 胚胎的附属结构或胚外结构 囊胚 有丝分裂 变小 全能性幼体 囊胚期 三胚层 发育全能性 胚胎干 未分化 囊胚内部 胚胎工程第7课时 胚胎工程1 操作技术。 (1)含义：通常指各种 动物，特别是哺乳动物。 (2)研究对象：主要限定于 、胚胎干细胞培 、胚胎移植、 (3)研究的重点内容：体外受精、 养等。 体外受精2 中受精。 ，使其在 和雄性动物的 (1)含义：采集雌性动物的 过程(2)状 从 中取出成熟的精子，放入培养液中培养，使其达到精子的采集及获能： 态。 处理后，用 卵细胞的采集：最常用的方法是卵巢经 。 取出，然后在体外进行人工培养，促其 (吸取卵泡液连同卵母细胞) 在体外合适的环境下共同培养一段时间，便可受 的精子和成熟后的受精： 精。 胚胎体外培养3 进行体外培养。 (1)含义：指应用人工创造的环境，对获取的 的培养液，用于培养不同发育时期的胚胎。 (2)条件：必须配制一系列含有 获能 试管 附睾 胚胎体外培养 胚胎分割 卵细胞 精子 高等脊椎动物胚胎操作 不同成分 卵细胞 早期胚胎 穿刺针 成熟 获能 超数排卵 二、胚胎移植和胚胎分割 胚胎移植1 处理， (1)含义：指将经济价值较高、遗传性状优良的母畜、经过 的代孕母的子宫 后受精，然后将发育的早期胚胎分别移植到 使其