乙型病毒性肝炎的发病机制

1、乙型病毒性肝炎的发病机制 HBV在正常免疫功能的感染者引起急性病变；在异常免疫功能者则发生慢性肝炎和慢性肝病。HBV不是致细胞病变 性（CytoPathogenic）病毒，HBV感染后须经宿主的免疫应答引起病变，并使疾病进展。 1 发病机制 （1）免疫因素：肝炎病毒感染时对病毒抗原的免疫应答与病毒消除和发病机制相尖0HBV 感染时，对外膜抗原的体液抗体应答利于清除血液中的病毒颗粒；对核壳和复制酶抗原的细胞免疫应答清除病毒， 也损害肝细胞。 病毒免疫清除和肝组织免疫损伤对在肝细胞表面 的病毒抗原所引起宿主的细胞免疫应答，一般认为是肝细胞损伤的决定因素。细胞免疫应答表现单个核细胞在肝组 织中的浸润

2、，继以不同程度的组织破坏；组织破坏也与体液免疫相尖， 可由于反应抗体、抗体和补体、或 免疫复合物的形成和在组织内的沉积。 肝炎病毒感染持续的原因是对病毒抗原的免疫应答低下，常由于病毒变异后的免疫逃逸新生儿免疫耐受在 HBV感染持续中起重要作用。 肝内T细胞：CHB （慢性乙型肝炎）病人的大量致敏淋巴细胞进入肝内，外周血仅能部分 反映发生在肝内的免疫过程，有复制的比无复制的病人，肝内CD4 /CD8细胞比率显著较 高，提示原位的辅助诱导性CD4 T细胞，可能经HBcAg激活，正调节CD8 CTL的细胞毒活性。活动性病 变中分离的Th细胞克隆，近70%是Th1细胞；而PBMC中的仅4%。肝内隔室的

3、CD4细胞群中的Thl密度 越大，所产生IFN 丫的水平越高，细胞毒活性也越强。肝内的炎症环境中的抗原刺激可能有利于这些细胞的扩增。 Th1细胞参与CHB的肝细胞损 伤机制。 抗原特异性识别：一种特异免疫反应的起始是T细胞受体复合体对靶抗原的识别。 T细 胞受体复合物（淋巴细胞膜上的TCR与CD3结合物）还包括抗原提呈细胞或靶细胞表面的抗原和MHC决定簇。 HBV核壳抗原的核壳蛋白表位只是经细胞内处理的、816个氨基酸的 一小段寡肽（表位肽）。CD4 T细胞的识别部位大致在HBc/eAg肽的AAI-25和AA61-85表位；CD8 CTL 识别的序列区未充分界定，不同种族、不同MHC型感染者的

4、不同亚群的T 细胞，在核壳抗原氨基酸序列上的识别表位有差别。IgG抗HBC可部分掩蔽HBCAg表达， 抗HBc抑制CTL对HBV靶抗原的识别，是使HBV感染持续的因素之一。抗HBc可抑制对肝细胞的细胞毒效 应，由母亲被动输入的抗HBC亦可发生同样的作用。 HLA （白细胞抗原）限制：由APC （抗原提呈细胞）提呈的抗原寡肽/HLA- n复合体可直接与CD4 T细胞 CD4/HLA- H分子的p2结构区相结合，从而限定效应与靶细胞之间相互作用的特异性。活动性肝病的病人的肝细胞 膜有较强的HLAI表达，可更有效的向T细胞提供核壳寡肽。 Th细胞用其表面 同样，APC中抗原肽与HLA fl结合形成复

5、合体，提呈于细胞表面。 的CD4分子去探测APC表面的HLA- 口,用其TCR去探测沟中的互补抗原肽这是CD4 Th细胞的识别过程。 TCR与肽/HLA复合体之间的结合不稳定，须CD4分子与HLA- 口的p2区段结合、CD8分子与HLA-I的a3 区段结合，形成立体结构才能保持。TCR与复合体之间必要的接触时间。此外，这些细胞都产生细胞黏附分子，细 胞间的粘连加强了细胞间的反应。 以MHC （主要组织相容性复合体）表达的免疫遗传学基础是限定HBV感染发展的重要因 素，可以解释对HBV易感的种族差异。HBV感染者中HLA定型与临床经过的相尖性已有不少报告，但尚无一致 的意见。与HBV感染病变慢性

6、活动正相尖的HLA定型有A3-B35、A29、A2、B8、B35、DR3、DR7，负相尖 的有 B5、B8、DQWI、DR2 和 DR5。 细胞因子：细胞因子在细胞间传递免疫信息，相互间形成一个免疫调节的细胞因子网络，通过这一网络进行 细胞免疫应答。急性肝炎时在感染局部有IFN诱生，感染肝细胞释放IFN至周围介质，造成相邻肝细胞的抗病 毒状态。慢性肝炎时由浸润的单个核细胞或其他非实质细胞原位释放的细胞因子，在免疫应答、细胞增殖和纤维化 中起作用。 IL-2 : Th产生IL-2和表达IL-2R，是调节细胞免疫和体液免疫的中心环节。在慢性肝炎和慢性肝病，IL2产 生减少，加入外源性IL-2亦不能

7、纠正，提示IL-2R的表达亦降低，对已减少的IL-2也不能充分利用，因而不能充 分激活T细胞增殖，在CHB和肝衰竭尤其显著。IL-2诱导产生淋巴因子激活的杀伤细胞 （LAK）功能也降低。 干扰素:急性肝炎时感染肝细胞释放IFN至周围介质，造成相邻肝细胞的抗病毒状态。 慢性HBV感染时产生IFN的能力降低，肝衰竭病人的最低，病人血清中存在诱生IFN的抑制因子。 肿瘤坏死因子a：主要由单核巨噬细胞产生，TNF-a可能增强多种黏附分子的表达，引 起炎症和细胞毒效应。TNF- a可能毒害细胞自身、尤其可能激活细胞毒性免疫细胞。 转化生长因子a：因能使正常的成纤维细胞的表型发生转化而命名，活化的T、B细

8、胞 可产生较大量的TGFp。一般而言，TGF卩对来自间质的细胞起刺激作用；而对上皮来源的细胞起抑制作用。 在CHB病人的PBMC （周围血单核细胞）中加入TGF-pl对HBCAg刺激产生的IFN-Y和抗HBC有明显 抑制作用；降低HBCAg朿9激的PBMC增殖。TGF卩对抗原特异或非特异、细胞或体液免疫，其抑制作用并无 明显区别；对T细胞、B细胞和单核细胞都能抑制；也能抑 制HLAI限制的CTL ,对HBV感染肝细胞的细胞毒活性。 TGF- pl激活肝脏贮脂细胞产生基质蛋白，诱导胶原和其他细胞外基质成分的合成。肝内细胞因子谱：Thl型 细胞因子包括IL-2 IFN-Y和TNF邛,主要涉及细胞免

9、疫；Th2型细胞因子如IL4和IL-5，主要调节体液免疫应 答。 CHB和CHC （慢性丙型肝炎）肝内浸润细胞中有不同的细胞因子类型，显示不同的抗病毒免疫应答行为。 在CHC以Th1应答占优势，抑制HCV （丙型肝炎病毒）复制，但不足以完全清除，故HCV感染总是处 于低负荷的病毒水平。在CHB较强的Th2和较弱的Th1应答，只能保持低效率的抗病毒效应故感染倾向于长 期持续。 如上所述，HBV感染的肝组织损害始于特异抗原-T细胞反应，继以非特异炎症细胞产生的细胞因子相互作 用。炎症的一个重要介质是TNF ,活动性CHB时IFN-Y刺激TNFa 产生增加，而在ASC时几乎无TNF-a产生。另外，C

10、LD中IL-1产生增加与肝活检纤维化的量明显相尖。干扰素 治疗完全应答的病人，在治疗开始后的810周炎症激活，常同时 PBMC产生TNF- a和IL-1增加;对治疗无应答的病人这些因子不增加。在此，T淋巴细胞通 过淋巴因子IFN- Y单核Mo通过单核因子TNF- a和IL1将两个系统连接起来。 抗病毒免疫和病毒持 续感染：参与免疫防护的主要是病毒的外膜抗原。外膜抗体应答：抗HBs易在病毒清除后的恢复期检出，而不在 慢性感染中出现，故是中和性抗体；并可能防 止病毒附着而侵入敏感细胞。然而，抗HBs通过形成抗原抗体复合物，也参与一些与HBV感染有尖的肝外综 合征的发生机制。 免疫耐受性：免疫耐受是

11、免疫系统在接触某种抗原后产生的、只对该种抗原呈特异的免疫无应答状态。对 HBV的免疫耐受在感染小儿中发生较普遍。是形成AsC的免疫基础。 免疫耐受可能的机制：A.免疫细胞有大量不同特异性的细胞克隆，新生儿期与HBSAg 相应的细胞克隆接触HBSAg上的决定簇，不是发生免疫应答，而是被清除或抑制；B.因CD8 TS功能增强缺乏抗 HBS应答;C.母亲的HBeAg对新生儿HBV感染起免疫耐受作用；D.血清中高浓度的抗原使特异克隆的B细胞耗 竭，产生的少量抗体可被大量抗原耗费；或者抗病毒的CTL被高负荷的病毒所耗竭。 持续感染：A.病毒变异：由于变异而免疫逃逸；B.感染在免疫特赦部位保留：病毒感染

12、的某些肝外组织淋巴细胞难以到达，或某些类型的细胞不表达HLA分子，病毒如能在这些 部位复制，就可能逃避免疫清除，而成为肝脏持续感染的来源；C.免疫耐受：慢性HBV感染 病人大都有不同程度的免疫耐受性。 （2）肝细胞凋亡病毒清除和组织损伤主要由CTL经穿孔素途径的细胞坏死或经CD 95L 的细胞凋亡；也可由单核巨噬细胞经TNF-a途径的细胞凋亡或坏死。两者有独立的机制，不同的发生背景。凋亡 是细胞死亡的主动形式，而坏死是被动形式，凋亡是在许多形态和生化方面不同于细胞坏死的特定的细胞死亡形 式，但两者有一些共同的作用路段，分开两者的界线并不清楚。 细胞表面分子：CD95L和CD 95或称FasL和

13、Fas，是许多细胞的细胞表面分子，CD95L是配体， 而CD95是其受体。CTL表达的CD95L结合靶细胞表达的CD95，可引起靶细胞的凋亡。 TNF- a和TNR-卩：TNF- a主要由Mo产生，是多向性或多效性的细胞因子在炎症和感染性休克中起重要作 细胞毒效应：CD95L :CTL上的CD95L与靶细胞上的CD95结合，从而激活靶细胞内部的自杀程序。 经CD 95的信号导致凋亡，激发这一途径须CD95与其抗体或与其配体交联。CD95激发的死亡途径不依赖 细胞外Ca2 ，也不必有大分子的合成。 CTL的细胞毒效应是IL-2依赖的，因而，L2可抑制凋亡的发生。 凋亡细胞的胞膜完整，碎裂成凋亡小

14、体被Mo或相邻肝细胞吞噬，病毒和其他内容物不 外泄是一种自卫机制。DNA病毒拮抗细胞凋亡，转染HBV的肝癌细胞系Hep G2 2 15 细胞，比未转染的Hep G2细胞耐受凋亡因子的刺激。 病毒性肝炎的肝细胞、HB相尖HCC的肝癌细胞也表达CD95L肝细胞的“自杀”和“同胞相杀”是一种非 免疫攻击的清除病毒方式，可能是对HBV拮抗凋亡的补偿机制。 TNF- *主要由Mo产生，其介导的细胞毒活性取决于靶细胞的敏感性。当转译抑制剂 放线菌酮致敏细胞后，TNF- a引起凋亡，有典型的凋亡特征。 病毒性肝炎时的肝细胞也产生TNF- a, HBx可转化激活TNF- a启动子；TNF- a杀伤取决 于HB

15、V表达的水平，在高表达的细胞系TNF-a才引起细胞凋亡。 肝炎与肝细胞凋亡： A. 急性和急性重型肝炎：病毒引起的肝 细胞死亡的病理生理中，凋亡和坏死常同时发生。 阐明急性重型肝炎的发展过程有一小鼠模型可供参考。HBsAg转基因小鼠注射HBsAg 特异的CTL，病变依次按阶段性发展：4h内CTL与肝细胞间直接相互作用，激发少数HBsAg阳性肝细胞发生凋 亡，出现广泛散在的凋亡小体；412h中凋亡肝细胞继续增加，并出现许 多炎症病灶，掺杂大量非抗原特异的淋巴细胞和中性粒细胞，扩大CTL的局部致细胞病变 效应；注射后2472h，多数肝细胞气球样变性，坏死广泛分布于整个小叶，同时有许多凋亡细胞。CT

16、L经抗原刺激 分泌IFN-Y激活非特异的炎性细胞，包括肝内的MQ，扩大CTL 致细胞病变效应而发生大块肝细胞坏死。因而，急性重型肝炎是HBsAg特异、MHC-I限制 的CTL在识别抗原、分泌IFN- 丫,激活Mo后发生的。 TNF- a可经坏死或凋亡（取决于实验系统）杀死不同的肿瘤细胞系，肝损害有2个时相， 即以细胞凋亡为特征的初始期和凋亡和广泛的细胞坏死为特征的较后期。 B. 慢性肝炎和慢性肝病：多 数慢性肝炎病人肝内浸润的淋巴细胞可检出CD95L ,可能 表达CD95L的淋巴细胞对启动肝细胞凋亡是主要的效应细胞。CD95L和CD95表达、DNA 损伤和凋亡都以界面性炎症区最显著，符合病毒在

17、肝内的传染过程；局部大量浸润的CTL表 达CD95L ，经CD95介导肝细胞凋亡是病毒性肝炎区别于其他肝损害的特征。病毒性肝炎时肝细胞也同时表达 CD95和CD95L ，在凋亡发生过程中不仅是靶细胞也是效应细胞。 肝细胞中CD95L和CD95表达的程度与炎症病变的活动性一致。正常肝组织阴性。轻型CH（慢性肝炎）可 无或弱表达，仅在界面性炎症区有少数阳性细胞；中、重型CH常为中、 强度表达，在界面性炎症区有多数阳性细胞，肝小叶中也有散在、甚至弥漫性分布。 CH合并早期LC和活动性LC常有较重炎症，CD95L和CD95也常是中、强度表达；而HCC表达较 弱，凋亡降低正是肿瘤发生的机制。 （3）病毒

18、变异：人体感染变异病毒或感染野生病毒后，所引起的免疫应答不同。变异病毒的生物学意义可有： 逃避自然发生的或疫苗产生的免疫、对药物引起抗性、改变发病机制，甚至改变种属和组织的嗜性。因而，病毒变 异可能是病毒传播、致病和转归的重要因素。 HBV的前c/c基因区变异：前C区形成一个发夹结构（包装信号w干襟结构），是包 裹前基因组RNA所必需，可能解释密码子28的TAG变异的极高流行率。G1 896与T1 858即是上述干襟 结构的不稳定碱基对，ntl 896的G变异为A使干襟结构较为稳定。故前 C/A83变异可能是HBV感染自然史的较普遍现象，多发生在HBe血清转换过程中，常预示病变缓解。 HBV的C基因区