抗风湿类中成药中非法添加氨基比林的快速检测

1、抗风湿类中成药中非法添加氨基比林的快速检测 Rapid Detection of Aminopyrine illegally mixed into Anti-rheumatic Traditional Chinese medicine Peng Caiping 1,Wang Shiping1, Liu Qing2 ,Pan Yuhong1 (1. Yichun Institule for Drug Control, Yichun336000, China;2. Peoples Hospital of Yichun,Yichun336000, China ) Objective To estab

2、lish rapid detection method of Aminopyrine illegally added into anti-rheumatic traditional Chinese medicine. MethodsIdentification by chemical methods to rapid screen,and to further verify by the thin-layer chromatography. ResultsThe chemical identification and thin-layer chromatography can rapid de

3、tection of the anti-rheumatic traditional Chinese medicine illegally added ingredients Aminopyrine. ConclutionsThe method was simple,rapid,accurate and specific,It can be used in the rapid detection of Aminopyrine illegally mixed into Anti-rheumatic traditionalChinese medicine ，and it also can be eq

4、uipped with at the national application of the faster cars seized. Keywords Aminopyrine ； Chemical methods ； TLC 氨基比林为非甾体抗炎药，具有消炎镇痛的作用 1,2 。本 品能引起骨髓抑制以及能形成亚硝胺致癌物质， 常见不良反应主 要为胃肠道损害、 肝肾损害及引起中枢神经疾病， 对患者身体具 有相当大的危害。然而，一些不法企业为谋求暴利，擅自在中成 药及保健品中添加氨基比林， 给患者带来极大的安全隐患。 为打 击此类不法分子，确保临床用药安全，笔者查阅了相关文献 3-10 ,发现报道

5、的非法添加检测方法多为HPLC法而无化学鉴 别方法，不便于基层快速筛查。于是，笔者通过试验建立了抗风 湿类中成药非法添加化学成分氨基比林的快速检测方法， 现报道 如下。 1 仪器、试药与样品 BP211D Sartorius 电子天平（十万分之一）；FA1004电子 天平（万分之一）；SK250LHC型超声波清器；929型薄层铺板仪； CAMAG紫外观测箱（254nm/365nm）； 0.1mol/L盐酸甲醇溶液； 三氯化铁试液；氨基比林对照品（批号： 100503-200301 中国药 品生物制品检定所）；抗风湿类药品（市场抽验）：共计 20 批 次；阴性对照品 3 批（天麻胶囊，吉林银河制

6、药厂， 060901；风 湿定胶囊，深圳金活药业 XX公司，20061101 ;风湿关节炎片， 四川省三星堆制药 XX公司060601），均按标准检验符合规定。 硅胶GF254 （青岛海洋化工厂）；其他试剂均为分析纯。 2 化学鉴别 2.1 溶液的制备取供试品一次服用量 （固体制剂研细， 丸剂 可加少量的硅藻土），置 50ml 的具塞锥形瓶中（液体制剂萃取 取氯仿层），加氯仿10mL振摇5分钟，滤过，滤液作为供试 品溶液。取氨基比林对照品适量，加氯仿制成每1ml含1mg的溶 液，作为对照品溶液。取阴性对照品一次服用量，置具塞锥形瓶 中，加氯仿10ml，振摇5分钟，滤过，滤液作为阴性对照溶液。

7、取阴性对照品一次服用量，再称取氨基比林10mg置具塞锥形 瓶中，混匀，加氯仿10ml，振摇5分钟，滤过，滤液作为供试 品阳性对照溶液。 2.2 实验结果取供试品溶液、阴性对照溶液、阳性对照液、 及对照品溶液各2ml，分别置试管中，加O.1mol/L盐酸甲醇溶 液1ml，振摇,滴加三氯化铁试液12滴，再加水1ml，振摇。 对照品溶液、 阳性对照溶液上层显蓝紫色， 阴性对照液上层显淡 黄色，见图 1；供试品溶液上层均显淡黄色，图 2。 图1 氨基比林化学鉴别 1 阴性 2 阳性 3 对照品 图 2 上层供试品 1-10 阳性对照品 下层供试品 11-20 阳性对照品 2.3 专属性试验 （其它非甾

8、体类抗炎药的干扰试验） 分别取 相当于 1/3 次服用量的氨基比林、 美洛昔康、吡罗昔康、 保泰松、 吲哚美辛、芬布芬、尼美舒利、布洛芬、双氯芬酸钠、及萘普生 对照品，照 2. 2 项下方法试验，结果氨基比林反应上层呈蓝紫 色，其他成分除吡罗昔康上层呈红棕色， 其他成分上层均显淡黄 色。表明本文选定的方法专属性强。见图 3。 图 3 氨基比林专属试验 1氨基比林210其它非甾体类抗炎药成分 3 TLC 法 3.1 溶液的制备取供试品一次服用量 （固体制剂研细， 丸剂 可加少量的硅藻土，液体制剂蒸干），置 50ml 的具塞锥形瓶中， 加丙酮-乙醇（9: 1）混合液10ml，振摇5分钟，滤过，取滤

9、液， 作为供试品溶液。精密称取氨基比林对照品适量，加丙酮 -乙醇 （9： 1）混合液制成每1ml含氨基比林1mg的溶液，作为对照品 溶液；另精密称取氨基比林对照品与上述其他非甾体类抗炎药成 分对照品适量，加丙酮-乙醇（9： 1）混合液制成每1ml各含1mg 的混合溶液，作为混合对照品溶液。 取阴性对照品一次服用量，再称取氨基比林10mg置具塞 锥形瓶中，混匀，加丙酮-乙醇（9： 1）混合液10ml，振摇5分 钟，滤过，滤液作为阳性对照溶液。 3.2 方法与结果取供试品溶液、 对照品溶液、 混合对照品溶 液、阴性对照溶液及阳性对照液各 2卩L,分别点于同一以0.5% 羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶

10、 GF254薄层板上，以氯仿-乙醚- 甲醇-氨水（ 10： 3： 1： 0.05）为展开剂，展开，取出，晾干， 在紫外光灯（254nn）检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，不得显相同颜色的斑点。对照品溶液，阳性对照溶 液检出氨基比林，阴性对照液，未检出氨基比林，见图 4；其他 非甾体成分对氨基比林无干扰见图 5。 图 4 TLC 图(方法学) 1 23 4 5 6 7 1阴性 2，6 氨基比林 4，5 阳性对照 7 阴性 图 5TLC 图(其他非甾体成分干扰实验) 1 2 3 4 56 7 1 双氯芬酸钠 2 布洛芬 3 混合对照品 4 氨基比林 5吲哚美辛 6 ，7 供试品 3

11、.3 灵敏度试验精密称取氨基比林对照品， 配制成一系列不 同浓度的对照品溶液， 按 3 方法实验， 氨基比林的检出灵敏度分 别为0.2卩g。 4 讨论 4.1 本实验检出一批药品中含有氨基比林， 并且随机自制的 5 批阳性也全部检出，结果准确、快速。 4.2 为简化提取过程，便于基层、快件车等开展快检工作， 本试验研究中对比了超声和振摇两种方法不同提取时间。超声 3 分钟及 3分钟以上与振摇 5分钟及 5 分钟以上，结果表明效果基 本一致。故本试验将采用振摇 5 分钟，减少仪器的配备。 4.3本文摸索了 A、氯仿-无水乙醇-乙醚-丙酮(5: 3: 2: 1) 9、B、三氯甲烷-甲醇-丙酮-氨水(9: 2: 1: 0.05 ) 10、 C、三氯甲烷-甲醇-丙酮-氨水(18: 2: 1 : 0.05 )、D三氯甲 烷-甲醇-丙酮-氨水(15: 1.5 : 1: 0.1 )、E、三氯甲烷-甲醇- 丙酮-氨水(15: 1.5 : 1: 0.05)F、三氯甲烷-乙醚-丙酮-氨水 (9: 2: 1: 0.05 )、G三氯甲烷-乙醚-丙酮-氨水(10: 3: 1 : 0.05 )、H三氯甲烷-乙醚-甲醇-氨水(10: 3: 1: 0.05 )、I、 正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸(15: 5: 1) GF254与GF254含4.68% 的 NaH2PO4、J、二氯甲烷-石油醚(30-60C)( 4: