兔实验技术操作

1、一、兔的抓取及保定1. 准备的物品、器械：固定器2. 简要：（1）徒手抓取（2）保定3. 解说操作：3.1徒手抓取用一只手将颈部的被毛和皮肤一起抓住提起，另一只手托住臀部。（如图1）。也可一手抓住兔肩胛部的皮肤，另一手托住其臀部并将兔的头部放置于臂弯中，再用前 臂支撑兔体。3.2保定3.2.1将兔放在操作台上，用一只手抓住颈背部皮肤（包括兔耳），另一只手压住腰 部（或后肢）加以保定，可用于肌肉注射、灌胃等操作。3.2.2将兔放在操作台上，用左手抓住颈背部皮肤，使兔下半身固定在操作者左臂下 方，用右手环抱兔前肢，适用于孕兔灌胃等操作。如图2。3.2.3盒式保定法：将兔放入兔保定盒内，盖上盖，使兔

2、头露在盒外，便可进行采血 或注射给药等操作。3.2.4保定板保定：将兔仰卧或俯卧在保定板上，用布带保定，四肢和头部也用布带 保定，即可进行心电图检查、注射给药、采血等操作。4. 注意事项4.1盖兔盒时必须要轻，不能用力压，否则兔脊椎骨很容易骨折，造成下肢瘫 痪。4.2将家兔放回兔笼时，先将臀部及后肢放入笼内。4.3抓取时禁止抓提兔耳。4.4抓取要稳、准、柔、快，不可过分用力抓捏腰腹部。二、兔的采血方法1. 准备的物品、器械：注射器、采血管、止血带、酒精棉球、干棉球、保定架 等2. 简要：耳静脉米血、耳动脉米血、后肢静脉米血、心脏米血3. 解说操作3.1耳缘静脉或耳动脉采血3.1.1将兔保定于保

3、定器内，用酒精棉球擦拭消毒。3.1.2助手固定兔耳，并压迫耳缘静脉根部，使血管充盈；操作者手持注射器， 针头沿耳缘静脉平行刺入血管，慢慢抽取血液。3.1.3助手固定兔耳，操作者手持注射器，在耳中央动脉末端，使针头沿血管 平行方向刺入动脉，血液即可流入注射器内。3.1.4采血完毕后立即用消毒干棉球压迫止血。3.2后肢静脉采血3.2.1兔固定于兔保定架上，剪去胫部被毛，股部扎上止血带，使胫外侧皮下静脉充盈。3.2.2固定静脉，用左手两指固定好静脉，右手取带有针头的注射器内皮下静 脉平行方向刺入血管，抽一下针栓，如血进入注射器，表示针头已刺入血管， 即可取血。取血后要长时间压迫止血，一般取血量为25

4、mL3.2.3取完后必须用棉球压迫取血部位止血，时间要略长些，因此处不易止血。 如止血不妥，可造成皮下血肿，影响连续多次取血。3.3心脏采血331将兔仰卧保定在保定台上，胸左侧心脏部位剪毛、酒精棉球或碘伏消毒。3.3.2在第3、4肋间胸骨左缘3 mm处穿刺，针头刺入心脏后，持针手可感 觉到兔心脏有节律的跳动，血液会自然进入注射器。3.3.3此时如果抽不到血，可以前后进退调节针头位置，切不可使针头在胸腔 内乱探，以防刺伤兔的心、肺，可以拔出重新穿刺。3.3.4采血完毕后立即用干棉球按压止血。4. 注意事项4.1采血前应充分扩张血管，可使用酒精棉球反复擦拭或使用温水扩张或用手指 轻弹扩张血管。4.

5、2采血时应先从远心端开始进针，然后逐渐朝近心端推进，进针角度一般 045。4.3采血时应注意血液流出是否顺畅，若不顺畅可用棉球沿血管轻擦，以扩张血 管。4.4采血结束后应用干棉球按压进针部位进行止血。三、兔给药方法1. 准备的物品、器械：剃毛器、玻璃纸、纱布、胶布或弹性绷带、酒精棉球、干 棉球、生理盐水、注射器等2. 简要：皮肤给药、皮下给药、肌肉给药、灌胃、静脉给药等3. 解说操作3.1皮肤给药3.1.1给药前准备相关物品，包括剃毛器、玻璃纸、纱布、胶布或弹性绷带、注 射器等。3.1.2核对动物编号及组别，抓取和保定动物。3.1.3给药部位：一般选择脊柱两侧背部皮肤，试验有特别要求除外。给药

6、前去除背部约3cmx 3cm大小的被毛，注意不要损伤皮肤。3.1.4取相应剂量的受试物均匀涂抹在去毛处约 2.5cmx 2.5cm大小的皮肤上， 先用一层玻璃纸覆盖给药部位，再用纱布覆盖，然后用无刺激性胶布或弹性绷带 固定。给药时胶布的固定的松紧程度应合理，应确保能将药物固定于兔皮肤而又 不导致动物窒息。3.1.5固定数小时后，除去受试物，并用温水或无刺激性溶剂清洁给药部位皮肤。 4.6如果实验需要破损皮肤，则在给药前，用消毒针在敷药部位皮肤划一 “井” 字，或用砂纸在敷药部位皮肤摩擦，以皮肤表层损伤为限。4.7记录操作时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时 间。4.8如果

7、受试物为固体/粉剂，敷药前先用适量水或其它赋形剂调成糊状，以保 证药物与皮肤充分接触。4.9经皮给药前须将动物给药部位的毛发去除干净，根据实验的要求可使用剃毛 器或脱毛药品进行除毛。3.2皮下给药3.2.1注射前准备相关物品，包括剃毛器、注射器、注射针头、酒精棉球、干棉 球等。3.2.2核对动物编号及组别，抓取和保定动物。3.2.3根据实验要求，可选择肩胛间的颈背部或腹部等部位皮肤注射。注射前除 去被毛，再用酒精棉球消毒注射部位皮肤。3.2.4抽取相应量的药液，排尽针管内的空气；操作者一手提起家兔的注射部位 皮肤，使其皱折成三角体，另一手持注射器自皱折下方刺入皮下，平行进针一段距离，刺入后针头

8、可左右摆动，表示已进入皮下，便可缓慢推注，根据试验需要 进行下一只动物的给药操作。3.2.5注射给药完毕，及时记录给药时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物 给药开始时间和结束时间。3.2.6当针头刺入皮下时应回抽注射器，避免注射入皮下血管内。注射完毕后为 避免药物流出，可用干棉球按压注射部位数秒。3.2.7给药量：每个注射点常用给药体积为1.0 mL/kg，每个注射点最大给药体积 为 2.0mL/kg。3.3肌肉给药331注射前准备相关物品，包括剃毛器、注射器、注射针头、酒精棉球、干棉 球等。3.3.2核对动物编号及组别，抓取和保定动物。由助手一手固定兔两前 肢，另一手固定两后肢。或用固定器

9、固定。3.3.3剪去注射部位被毛，用酒精棉球消毒皮肤。3.3.4抽取相应量的药液，排尽针管内的空气，一次一侧注入量w1 mL/只。3.3.5股四头肌注射给药：操作者一手固定给药部位，另一手持注射器垂直刺入 肌肉内，回抽无血，即可进行注射，如果有回血，应拔出针头，更换部位后重新 进针，避免误将药物注射入血液中。3.3.6臀部肌肉注射给药：操作者一手绷紧注射部位附近皮肤，另一手持注射器 与皮肤表面成约60。角刺入肌肉，针头刺入深度约1cm，如果回抽无血，即可 缓慢进行注射；如果有回血，应拔出针头，更换部位后重新进针。3.3.7注射完毕，迅速拔出针头，用干棉球按住注射部位片刻，以防止药液漏出。3.3

10、.8记录注射时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束 时间。3.3.9多次肌肉注射给药时，除试验特殊要求外，应在左右两侧后肢肌肉轮流注 射。应注意避免伤及坐骨神经。3.3.10如果进行局部刺激性试验，注射部位应相对固定3.4灌胃3.4.1灌胃前准备相关物品，包括注射器、导管、药液、开口器及装有清水的烧 杯等。3.4.2核对动物编号及组别，按SOP-T-Ad-02抓取和保定动物，使食道伸直。3.4.3抽取相应量的药液，排尽针管内的空气。3.4.4操作者将开口器由兔嘴角插入，由前向后旋转，横放在兔子上下颌之间，固定在舌面上；将导管经开口器中央的小孔插入，慢慢沿上腭壁插入食道约15c

11、m18 cm达胃内；插入过程要随时观察兔的反应，防止导管插入气管或盘旋于 咽部；导管通过咽部时，兔会有轻微吞咽动作，但不会剧烈挣扎。345将导管外口端放入清水中片刻，如水中无气泡逸出，即可套上注射器，开 始缓慢注入药液，观察兔若无挣扎，可以迅速注入余下药液；如清水中有气泡逸 出，表明可能插入气管内，应拔出重新插入。346注完药液后，捏住导管外口，拔下注射器，抽3 mL5 mL纯净水，然后重新套入导管，注入纯净水，将导管内残留的药液全部冲入胃内。347药液注完后，先迅速拔出导管，然后取出开口器。348记录给药相关内容，根据试验需要进行下一只动物的给药。349 次给药量：最大给药体积15 mL/

12、kg。3.4.10给药先从溶媒对照组开始，再从低剂量至高剂量，最后再进行市售品/阳性对照组。3.5静脉给药3.5.1注射前准备相关物品，包括保定器、注射器、注射针头或头皮针、酒精棉 球、干棉球等。3.5.2核对动物编号及组别，抓取和保定动物。3.5.3抽取相应量的药液，排尽针管内的空气。3.5.4后肢小隐静脉给药：用酒精棉球消毒注射部位皮肤，左手压迫后肢注射部 位上方近心端血管，使血管充盈；右手持注射器，将针头插入静脉，回抽若有回 血，左手即放松，缓慢推注药液。3.5.5耳缘静脉给药：用酒精棉球轻轻擦拭耳缘静脉注射部位，使静脉清晰可见； 一手固定耳廓边缘部位，另一手持头皮针或注射器，针头斜面朝上，将针头由耳 尖部刺入静脉，见回血后缓慢注入药液。3.5.6注射进针应尽可能从耳缘静脉远心端开始，如果推注困难、滴注不畅或注 射部位发白或局部组织肿胀时，表明注射失败