冰冻切片注意事项

1、遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 冰冻切片的注意事项冰冻切片的注意事项 20152015年年1111月月 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 温度：冷冻组织中水分起填充作用，使组温度：冷冻组织中水分起填充作用，使组 织迅速变硬，由于各种组织所含水分多少织迅速变硬，由于各种组织所含水分多少 不同，因此所要求的适宜温度不同。含水不同，因此所要求的适宜温度不同。含水 分较多的疏松组织易冻结，而含脂肪较多分较多的疏松组织易冻结，而含脂肪较多 的组织难冻结。的组织难冻结。 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 样品头温度样品头温度 冷冻箱温度冷冻箱温度 肝 -15 -

2、20 脾 -10 -20 肠 -20 -20 卵巢 -15/-20 -20 肾脏 -15 -20 甲状腺 -15 -20 乳腺 -20 -20 带脂肪的皮肤 -40 -30 脂肪 -50 -30 脑 -10 -20 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 如组织块温度太低，组织片容易卷曲和碎 裂，此时可把大拇指置于组织块上几秒钟 ，升高组织块温度。 如组织块温度太高，组织片易皱褶，可将 速冻台置于组织面上几秒钟以快速降温。 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 脂肪组织：因脂肪不会

3、结冰，因此脂肪组 织在制作冰冻切片时尤为困难。 解决办法：只有将温度降低，让脂肪变硬 。如果是脂肪组织与非脂肪组织混合存在 ，温度可降至-25；如果是纯脂肪组织， 则降至-50. 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 切片上有条纹：垂直于刀片上的细条纹， 考虑是刀片缺口所致，可能是由于钙化组 织、缝线引起；如出现宽条纹或组织缺损 ，则可能是由于刀片下粘附有组织残渣。 波浪线样的皱褶：可能是由于切片机内某 个零件松动所致。检查支撑刀片的刀架， 冷冻头等有无松动。 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 切片卷缩：常见原因 1:放卷

4、板位置不正确/放卷板较脏/放卷板有缺 口 2:切片刀温度不够低 3:切片刀钝/粘附有组织残屑 4:组织硬度不够 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 解决对策： 1:调整放卷板位置，使其切片可以顺畅通过 2:盖上冷冻室盖，让刀片温度降低 3:及时清洁刀片，更换刀口 4:降低组织块温度，使其硬度适当 5:用OCT/胶水包埋组织，有利于防止切片卷 缩 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 切片脱落：常见原因 1:组织内坏死组织多 2:固定液温度低 3:载玻片不干净/温度低 4:切片太厚 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 解决对策： 1:取材时：尽量避免坏死组织，如

5、必需取材， 则可用酒精灯/电吹风将切片吹干防脱 2:定期更换固定液，将固定液瓶盖盖好，防止 固定液挥发而使其浓度降低 3:保持载玻片干净，置于室温 4:切片不应太厚（5um），脂肪可厚些 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 切片过程中的注意事项： 防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干 净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸 张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一 次。因为这个地方是切片通过和附贴的地方， 如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏 甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。 多例多块组织同时需做冰冻切片时，可各自 放于不同的支承器上，于冷冻台上冻起来，然 后依据不同的编

6、号，依序切片，这样做既不费 时也不会乱。 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势 来放置，所谓“砍柴看柴势”，切片也是如 此，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果 。 组织块不须经各种固定液固定，尤其是含 水的固定液，在未达到固定前，更不能使用 。临床快速冰冻切片，不须要预先固定，一 是为了争取时间，二是固定了的组织，反而 增加了切片的难度。 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 如果使用未完全固定的组织做冰冻切片，就 会出现冰晶。这是因为含水的固定液在组织 未经固定前，其中的水份也可渗入到组织中 去，当冰冻发生时，这些水份就存留于组织 中，形成了冰晶。 当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰 冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片 刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大 拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切 片。另者，调高冰冻点。 遵义市第一人民医院 遵从行医之道 恪守济世之义 用于附贴切片的载玻片，不能存放于冷冻 处，于室温存放即可。因为当附贴切片时， 从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有 一种温度差，当温度较高的载玻片附贴上温 度较低的切片时，由于两种物质间温度的差 别，