临床免疫实验室质量控制

1、临床免疫实验室质量控制临床免疫实验室质量控制 黑龙江省临床检验中心黑龙江省临床检验中心 吴皓瑜吴皓瑜 n（一）定义（一）定义 n 1 质量控制质量控制(quality control,QC) n质量控制(简称：质控)是监视全过程，排除误差， 防止变化，维持标准化现状的一个管理过程。这一 过程是通过一个反馈环路进行的。 n具体内容如下： n、确定质控对象。 n、规定控制标准（预定期）。 n、选择和确定控制方法。 n 、依规定标准和方法测量实际数据。 、比较实际数据与预期值之间的差异， 并说明产生这一差异的原因。超出预定误 差范围，报警系统发出信号，反馈通道中 断。 采取行动，解决差异。恢复原状（

2、原 标准状态）的手段发挥作用。 n临床实验室的质量目标： n 使检验结果更好的符合病人 的实际情况；及时的发出检验报 告，并依据检验结果结合病人临 床情况主动为临床诊断提供咨询。 n实验室的工作人员把其描述为实验室的工作人员把其描述为：准 确、可靠、临床适用性好。 n医生将其定义为：医生将其定义为：实验时间短、临 床应用价值大、随时能得到实验室的 咨询意见。 n医院院长医院院长：成本-效益好，临床医生 满意。 n病人或被检查者将其定义为：病人或被检查者将其定义为：快速、 准确、便宜、有价值。 （二）室内质量控制（二）室内质量控制 （简称室内质控）（简称室内质控） n 是由实验室的工作人员采用一

3、系列的方 法，连续的评价本实验室的工作的可靠程度， 确立报能否发出。旨在检测、控制本室常规 工作的精密度，并检测其准确度的改变，提 高本室常规工作中的批间、批内标本检测的 一致性。 1 1、开展室内质量控制前的准备工作、开展室内质量控制前的准备工作 在开展室内质量控制前每个实验室工 作人员都应对质控的重要性、基础知识、 一般方法学有较充分的了解，并在质控的 实际工作中不断进行培训和提高，在实际 工作中培养一些质控工作的技术骨干。 1 1）、培训实验室工作人员）、培训实验室工作人员 n人员培训 实验是人操作的，因此检验人 员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方 面的技术知识： 检验项目的基本原理

4、（ELISA原理）； 临床意义； 熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及 难点； 熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成， 包被片段及其组成）； 熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数 据处理的能力和质量控制知识。 某些特殊项目的检测如抗HIV等需经有 关部门组织的专门培训班，考试合格后 持证上岗。 2 2）、建立标准操作规程）、建立标准操作规程 实施质控需要有一套完整的标准操 作规程做保障。例如仪器的使用、维护 操作规程，试剂、质控品、校准品等的 使用操作规程。所有临床实验室都应建 立一套完整的标准操作规程。 3 3）、仪器的检定校准）、仪器的检定校准 为使仪器保持最佳工作状态应建立维护 和校正仪器的标准操

5、作程序（SOP），所 要控制的仪器包括移液器（加样枪）， 水浴箱（温箱）,洗板机,酶标仪。 移液器移液器：ELISA加样量小（5-100l） ，其准确性直接影响实验结果，利用称 重法检查：吸取刻度指示量的水，万分 之一天平称重后计算吸量是否准确,一般 应在+-10%以内。 水浴箱水浴箱 经常检查水浴箱温度计所示的 温度和水中（或温箱内）实测温度是否一 致，允许有1的误差； 洗板机洗板机 每个厂家设置洗板后的残留液 有各自的规定一般不超过2ul ，人工扣板时， 垫纸不湿，定期检查管孔是否堵塞； 酶标仪酶标仪 经常维护其光学部分，防止滤 光片霉变，定期检测校正，使其保持良好 的工作性能。 2、质控

6、物定值的选择 n室内质控质控点的选择，以需要设置质控 的点，设置质控物进行质控为原则。 n病毒性肝炎酶免检验中，有高值、中值、 低值、及阴性值的质控物，我们认为其中 以低值的质控物为最重要，设置临界于 cut-off值（CO值）的低值弱阳性质控物是 室内质控的关键。重点抓住低值弱阳性 临界值血清的室内质控监测，是室内质控 精密度观测的最敏感的窗口，也是提示试 验成功与否的最重要的标志。 1）质控血清的作用 n1、灵敏度控制； n 用临界值血清，检测试剂盒灵敏度是否达到要 求。 n2、精密度控制 n3、是试验是否成功的重要标志 。 3 3室内质控的步骤室内质控的步骤 1 1）、计算平均值、标准差

7、、变异系数）、计算平均值、标准差、变异系数 在开展室内质控时，首先对同一批质控血 清连续进行测定20-30次，将测得的结果计算 获得一组数据，求出平均值、标准差、变异 系数。 n2 2）、质控限的设定：质控限通常是以标准差）、质控限的设定：质控限通常是以标准差 的倍数表示。的倍数表示。 HBsAgELISA检验数据计算示例 表1 质控血清 阴性对照 cot-off值 s/co值 次数 A值 A值 阴性A值2.1 1 0.180 0.050 0.105 1.71 2 0.190 0.050 0.105 1.81 3 0.200 0.050 0.105 1.90 4 0.288 0.060 0.1

8、26 1.81 5 0.137 0.060 0.126 2.29 6 0.221 0.050 0.105 2.10 7 0.150 0.050 0.105 1.43 8 0.170 0.050 0.105 1.62 9 0.180 0.040 0.084 2.14 10 0.150 0.050 0.105 1.43 11 0.200 0.050 0.105 1.90 计算20个质控血清S/CO值的均值,标准 差和变异系数。 =1.72 S=0.29 CV=16.9% +3s +2s +1s X1.72 -1s -2s -3s LeveYJennings质控图 图1 4 4、室内质控图的绘制室内

9、质控图的绘制 n目前，临床免疫学检验多采用Levey- Jennings质控图。以20份质控品的检测结 果，计算平均值（x）和标准差（S），定 出质控限。一般以2S为警告限，以3S为 失控限，作质控框架图。每次（或每天） 随病人样本测定的质控品值，将原始质控 结果记录标记在质控图表上。保留打印原 始质控记录 5 5、质控规则的应用、质控规则的应用 n 将设计的质控规则应用于质控数据， 判断分析批每一次检测是在控的还是失控 的。一般以 2S 为警告限，以3S为失 控限，分析质控图中每天检测质控品结果 的分布，判断当天检测的样本是否在控制 限之内。若当天质控物检测结果失控，则 当天病人样本的测定结

10、果报告不能发出。 当以3S为失控限时， 每100次约有一次判为失控（99%的合格 率）。显然，这个标准太低，使许多失控状 态判为合格。当以2S为失控限时，每20次 约有一次失控（95%的合格率），这个标准 可以接受。当我们以1.5S为失控限时，就 将2/10的结果设定为失控（即约80%的合格 率），显然提高了质控的难度，使操作者需 要更用心操作，否则易处失控状态。我们建我们建 议临床实验室采用议临床实验室采用2 2 S S 为失控限。血站为失控限。血站 1.5S为失控限。 6 6、WestgardWestgard多规则多规则 n质控方法在质控图中单纯依据质控 点超出2S为警告，超出3S为失控，

11、在 临床检验中以显不够。Wesegard将 常用的判断失控的规则总结出许多 条规则. 12S:一个质控测定值超过均值2S质控限， 违背次规则，提示警告。 13S :一个质控测定值超过均值3S ,违背 此 规则，提示存在随机误差。 22S :2个连续的质控测定值同时超均值+2S或 均值-2S质控限。违背此规则，提示存在系统 误差。 R4S : 在同一 批内高值质控测定值与低值 质控测定值两个质控结果之差超过4S，违 背此规则，提示存在随机误差。 31S : 3个连续的质控测定值同时超过+1S 或-1S质控限。违背次规则，提示存在系 统误差。 41S : 连续4个质控点落在同一侧1S之 外。违背此

12、规则，提示存在系统误差。 7 /：连续7个质控点呈连续上升或下 降；或周期性波动变化。 10X :是个连续的质控结果在平均数一侧， 违背此规则，提示存在系统误差。 +3s +2s +1s X -1s -2s 21s违背 规则 -3s 31s违背 规则 +3s +2s +1s X -1s -2s -3s 22s违 背 规则 R4s 我们利用WestgardWestgard规则规则, ,引入免疫学检验 中,建议以下几种情况判为失控. 1 12s 1质控测定值超过2S之外. 2 R4S 连续2个质控点相差超过4S范围. 3 41S 连续4个质控点落在同一侧1S之外 4 7X 连续7个质控点落在同一侧

13、。 5 7 / 连续7个质控点呈连续上升或下降； 或周期性波动变化。 7 7、统计学计算方法、统计学计算方法“即刻法即刻法”质质 控控 n ELISA有其特殊性，最合适的质控方 法尚待研究建立。有些实验室不是每天 进行ELISA项目的检验，而ELISA试剂盒 效期短，用同一批号试剂盒连续常规测 次，难度较大。采用“即刻法”质 控统计方法，只需连续测次，即可对 第次检验结果进行质控。 （）先将测定值从小到大排列：X 1、X2、 X3、Xn （X1为最小值，Xn为最大值）。 （）计算x和S。 (）计算SI上限值和SI下限值， SI上限 X最大值x 均 SI下限 x 均最小值 （）将SI上限、SI下

14、限与SI值表（表2）中的数 字比较。 SI值表 表2 n n3s n2s n n3s n2 3 1.15 1.15 12 2.55 2.29 4 1.49 1.46 13 2.61 2.33 5 1.75 1.67 14 2.66 2.37 6 1.94 1.82 15 2.71 2.41 7 2.10 1.94 16 2.75 2.44 8 2.22 2.03 17 2.79 2.47 9 2.32 2.11 18 2.82 2.50 10 2.41 2.18 19 2.85 2.53 11 2.48 2.23 20 2.88 2.56 当SI上限值和SI下限值n3s值 时，说明该值已在3s

15、范围之外，属“失控”。 数值处于“告警”和“失控”状态应舍去， 重新测定该项质控血清和病人样本。舍去的 只是失控的这次数值，其它次测定值仍可继 续使用。 20次质控血清检测S/CO值 次数 s/co 次数 s/co 1 1.71 12 1.35 2 1.81 13 2.00 3 1.90 14 1.52 4 1.81 15 1.71 5 1.09 16 1.81 6 2.10 17 1.52 7 1.43 18 2.10 8 1.62 19 2.00 9 2.14 20 1.43 10 1.43 21 1.52 11 1.90 在第3次测后，按“即刻法”计算公式 n= 3, S/CO值从小到大

16、排列为： 1.71 1.81 1.90 SI上限=X最大值-X均值/S SI下限 =X均值-X最小值/S x均= 1.81， S = 0.10 计算： SI上限= 1.90 1.81 / 0.1 = 0.9 SI下限= 1.81 1.71 / 0.1 = 1.0 查SI值表：n = 3时，n2s= 1.15，n3s= 1.15 ,SI上限、 SI下限均小于 n2s、n3s，因此该三次检验数据在控制范围内。 在第4次测定后，按上法计算： n=4 1.71 1.81 1.81 1.90 x均= 1.81 S = 0.08 SI上限= 1.901.81 / 0.08 = 1.13 SI下限= 1.8

17、11.71 / 0.08 = 1.25 查SI值表 ：n = 4时， n2s= 1 .46， n3s= 1.49。 SI上限、SI下限均小于n2、n3s ,数据在控制范围内。 在第5次测定后，按上法计算： n = 5 1.09 1.71 1.81 1.81 1.90 x均= 1.66 ， S = 0.33 SI上限= 1.901.66 / 0.33 = 0.73 SI下限= 1.661.09 / 0.33 = 1.73 查SI值表；n = 5时，n2s= 1.67，n3s= 1.75 n2s（1.67）SI下限（1.73）n3s（1.75）。SI下限值 在n2s和n3s之间, 说明该值在2s3

18、s范围，同时表 示该资料是在下限（-2s）之外，处于“告警” 状态，本次数据弃去。 第6次检测，n仍为5进行计算： n=5， 1.71 1.81 1.81 1.90 2.1 x均= 1.87 S = 0.15 SI上限= 2.101.87 / 0.15 = 1.53 SI下限= 1.871.71 / 0.15 = 1.07 查SI值表：n2s = 1.67，n3s = 1.75 。 SI上限、 SI下限均小于n2s、n3s ,数据在控制范围内，继续检 测并计算。 当测定达到21次时，因舍去一个数据（第5个）， n=20，排序如下： 1.35 1.43 1.43 1.43 1.52 1.52 1

19、.62 1.71 1.71 1.81 1.81 1.81 1.90 1.90 1.90 2.00 2.00 2.10 2.10 2.14 x均= 1.76 S = 0.25 SI上限= 2.14 1.76 / 0.25 = 1.5 SI下限=1.76 1.35 /0.25 = 1.64 查SI值表：n 2s= 2.56 ,n3s= 2.88.SI上限、 SI下限均小于n2s、n3s 数据在控制范围内.用20 次数据的均值和S值（x均= 1.76 S = 0.25） 做质控框架图。以后的检测数据不再计算， 转入质控图。 从以上实例可看出，通过“即刻法”统计 计算的均值和S值与前面介绍的测20次获

20、得均 值和S是十分接近的。即刻法质控的统计方法， 适于免疫学测定的质控。 当检测的数值超20次以后，不必再使用 “即刻法”质控统计计算，可以转入常规的 质控图的质控，将前20次的数值求出的均值 和S值作质控框架图，第21次的数值，依次点 入即可。 ( (三三) ) ELISAELISA检验中各种变异的控制检验中各种变异的控制 n1 1、孔间差变异的控制孔间差变异的控制 nELISA检验孔与孔间的差异的调查，可以在同一块 板上，获取同一份质控血清至少十孔平行试验的 S/CO值的均值和标准差。 质控血清HBsAg lng/ml做孔间变异A值检测,结 果如下:0.125，0.103 1.103,0.

21、098，0.092, 0.099，0.098 ,0.106 ，0.098，0.092 x均=0.101 S = 0.01 CV = 9.3 % 通过孔间的变异调查，可以了解不同试剂、不 同批号、不同操作者的差异，以便于选择、改进。 了解孔间的变异，就可以了解每个样品测定值 的可能变动范围，对于判定处于CO值上下的样品的 结果是十分有用的。 2 2、批内变异（板间差异）与批间变异的控制、批内变异（板间差异）与批间变异的控制 有的实验室每天需测试数百人的血清样品，使 用数块微孔板，或数拾块微孔板。在这里就存在 同一天检测数块板之间的变异（批内变异），和 不同天检测之间的变异（批间变异）的问题。有

22、的单位将每天检测的每一块板的质控数值，连续 在质控图中描记出来，不考虑不同天之间变异的 影响。这种作法，只有当证实该实验室批内变异 十分小，且批内变异与批间变异十分接近的前题 条件下，才可以这么做。 有的实验室，不考虑批内变异，只将每天检测的 “第一块”板的质控数值描记在质控图中，这样使该 室质检图可以做得十分漂亮，但细查一下每块板的质 检结果，就会发现差异变化极大。这样的质控，不能 对每块板进行质控（批内变异）,失去意义。 如何进行免疫实验室室内质控的批内、批间变异 的控制，我们借用某一实验室开展室内质控初始的实 际数据计算一下。该室室内质控初始阶段资料变异很 大，6个月后才趋于稳定水平。从

23、这也说明实验室开 展室内质控的必要性。该实验室室内质控资料见表4 某实验室室内质控资料表（S/CO值） 质控血清：HBsAg lng/ml 日期序号 S/CO 1 2.24 1.32 1.39 2 3.39 1.52 2.01 3.95 3.08 8.00 1.71 2.97 1.58 3 3.25 3.95 3.02 2.23 4 2.07 3.04 2.13 2.13 1.98 3.16 2.51 5 2.50 3.00 2.20 4.01 1.94 9.83 6 2.70 3.46 2.38 2.42 2.71 7 3.37 3.79 4.26 2.74 2.91 2.58 8 3.06

24、 3.97 8.62 9.22 4.06 3.45 9 4.65 4.96 8.91 6.40 8.62 10 7.30 4.13 7.68 3.02 11 2.38 3.20 2.65 3.57 12 1.90 1.72 3.38 3.61 2.88 2.66 3.02 13 2.63 2.63 3.19 8.91 14 12.86 4.4 5.20 9.73 6.68 6.78 15 4.85 4.88 4.51 4.95 2.18 2.64 16 10.50 6.90 6.10 8.59 取表4中连续20天的每天最大值（X大）和最小值 （X小）列表，并计算其值差（X差），求20天值差的均

25、 值和标准差，此为批内变异（以x均 内S 内表示 );以取 每天数值的均值,求20天均值的均值和标准差，此为 批间变异(以x均 间S 间表示 ）,见表5 某实验室室内质控批内、批间数值表（S/CO值） 质控血清：HBsAg lng/ml 表5 第n天 最小值 最大值 值差 均差 第n天 最小值 最大值 值差 均差 （X小） （X大） (X差) X （X小） （X大） (X差) X 1 1.32 2.24 0.92 1.65 11 2.38 3.57 1.19 2.95 2 1.52 8.00 6.48 3.02 12 1.72 3.81 2.09 2.77 3 2.33 3.95 1.72 3

26、.11 13 2.63 6.91 4.28 4.34 4 1.98 3.16 1.18 2.43 14 4.40 12.86 8.46 7.61 5 1.94 9.83 7.89 3.91 15 2.18 4.95 2.77 4.00 6 2.42 3.46 1.04 2.73 16 6.10 10.85 4.40 8.02 7 2.58 4.26 1.68 3.28 17 2.89 8.80 5.97 6.33 8 3.06 9.22 6.16 5.40 18 3.27 9.67 6.30 6.17 9 4.65 8.91 4.26 6.17 19 3.70 6.20 2.50 5.13 1

27、0 3.02 7.68 4.66 5.53 20 2.80 9.40 6.60 5.36 通过表5，计算值差项得出： 均值 内=4.11 S 内=2.52 计算均值项得出：均值间=4.52 S 间=1.83 表5中均值 内4.11 和S 内2.52为批内变异，均值间4.52和 S 间1.83为批间变异。从该数据反映出该室批内变异S内 2.52，大于批间变异1.83。依人们固有思想，一般认 为批间变异往往大于批内变异，而事实往往不一定。 因此提示人们应重视精密度检测水平。 利用表5中X内和S内做室内批内变异质控框架图， 将X大和X小描记上，并连成线段，观察批内变异十分 直观。实际应将第21次以后

28、的X大和X小线段描记上， 在这里，仅利用表5的数据进行范列描记，见图9。 图9 某实验室批内变异质控图 从图9中可以看到，线段长短不等。线段越 长，反映精密度越差；线段长的越多，反映这 一阶段精密度总体情况不好。线段上上下下不 平衡地分布在X轴线的上下两侧，反映出批内变 异的偏离也很大。 利用表5中X间和S间做室内批间变异质控框架图， 并将第21次以后的均值依次描记上。在这里，仅利 用表5中的均值数据X进行范例描记。见图10 图10 某实验室批间变异质控图 从图10中可以看到，前7次数值偏于X轴的 下方。 第21次到29次，数值呈明显上升趋势， 反映出这一段检测处于系统误差之中，应查 找原因。

29、 ( (四四) ) 失控情况处理及原因分析失控情况处理及原因分析 n1 1 、失控情况处理、失控情况处理 n 操作者如发现质控数据违背了控制规则， 应填写失控报告单，上交专业主管（组长）， 由专业主管（组长），作出是否发出标本检 验报告单。 n 2 2、失控原因分析、失控原因分析 n 失控信号的出现受多种因素的影响，这 些因素操作上的失误、试剂、质控品的失效， 仪器维护不良以及采用的质控规则、控制限 范围、一次测定的标本数等等 。 失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相 关的那批病人标本报告可能作废。此时，首 先要尽量查明导致失控的原因，如果为假失 控常规测定报告可按原先测定结果发出，如 果为

30、真失控，应在纠正失控原因后，全部标 本重做，质控品测定合格后再签字发出报告。 当出现失控信号时，可采用下述步骤寻找原 因： 1）、重新测定同一质控品，用以查明是 否有人为误差或偶然误差，如重侧的结果 在允许范围内（在控）即为偶然误差。如 重侧的结果仍不在允许范围，应进行下步 操作。 2）、新开一瓶质控品，重测定失控项目 。如果结果正常，说明原来那瓶质控血清 可能变质，如果仍然不在允许范围，则进 行下一步。 4）、进行仪器维护，重侧失控项目。检查 光源是否需更换，滤光片是否在正常位置。如 果仍然不在允许范围，则进行下一步。 3）、检查试剂，此时可更换试剂以查明原 因，如不是试剂的问题，则进行下一

31、步。 （六）免疫实验室室内质控重点（六）免疫实验室室内质控重点 n 免疫学检验的特点是灵敏度高，其检 测的灵敏度高与生化检测的106倍。因此， 微小的检测数值的变异，会造成很大的S 和CV值的变异。国际上尚未有对免疫学 检验室内质控给出明确规定、标准和方 法，均处于借鉴生化的原则、方法开展 免疫学检验室内质控阶段。 1、试验首先应成立，满足试剂盒要求。 阴、阳对照结果符合要求，cut-off值判定 公式满足试剂盒要求。该试验结果可以发出 报告。 2、每一批次操作时，应含有一个阳性和 阴性质控品，用已知靶值物质作为质控品。 3、质控品必须按患者标本那样进行检测 。 4、只有观察到预先设立的质控品

32、反应模 式时，实验室才能发出检验结果。 试剂盒的质量评价 n （一）质量评价要点（一）质量评价要点 n从临床应用角度考核检验试剂的可 靠性，是以其能否区分健康与疾病 的能力作为依据的。判断检验结果 的正确性和可靠性主要依赖于对标 准品的测定，并对测定结果进行统 计计算评估的。 1灵敏度灵敏度: 1)为试剂检出被检物质的最低量 的能力;2)为试剂对人群或大量样品中阳性检 出的能力（假阴性越少越好），取决于包被 物的全面性。 2特异性特异性:指试剂正确检定不存在的被检物质 的能力（无假阳性），取决于包被抗原（体） 及标记抗原（体）的纯度及特异性。 4 4稳定性稳定性：试剂在规定条件下能储存的时间，

33、 一般采用破坏性试验即将试剂存放于37保 存，定期测定其灵敏度，特异性和精密度等 指标，直到其质量指标开始下降为止，通常 认为37每稳定一天相当于4-10保存一个 半月。 3 3精密度精密度：ELISA试剂一般指其批内CV， 其值应小于15%；定量试剂应同时考察线 性范围 5参考室间质评评价报告中对试剂的评价结参考室间质评评价报告中对试剂的评价结 果果:这比较客观公正，因为统计数字均来自 各参评医院，反映了试剂在某一地区的使用 情况； 6根据权威部门发布的试剂评价结果 ，了解 市场上试剂的质量优劣 。 评价试剂的各项性能指标按以下公式计算评价试剂的各项性能指标按以下公式计算 灵敏度（%）= 真

34、阳性 100% 特异性（%）= 真阴性 100 % 符合率（%）= 真阳性 +真阴性 真阳性+假阴性 假阳性+真阴性 真阳性+假阳性+ 真阴性+假阴性 100% 1、灵敏度就是患者真阳性结果的百灵敏度就是患者真阳性结果的百 分率分率。 理想的检验结果应当是假阴性为零，敏 感性为100%。敏感性与假阴性是互补的， 敏感性好，假阴性就少，相反敏感性差， 假阴性就高。 假阴性率在临床检验中通常称为漏诊率。 一般要求临床检验尽量减少假阴性，在血 站对献血员的筛查，就要求漏诊率为零。 2、特异性就是患者真阴性结果的特异性就是患者真阴性结果的 百分率。百分率。 理想的检验结果应当是假阳性为零，特 异性为1

35、00%。特异性与假阳性是互补的， 特异性好，假阳性就少，相反特异性差， 假阳性就高。 假阳性率在临床检验中通常称为误诊率。 符合率是综合灵敏度和特异性的指标 n在临床上漏诊率和误诊率可评价检 验试剂是否有诊断价值，而检验试 剂的灵敏度和特异性是重要指标。 微孔板封闭 n以生理盐水代替血清标本严格按照试剂 盒操作要求分别进行。 干扰试验: n以类风湿因子阳性血清及抗大肠杆菌阳 性血清(经确证均不含乙肝标志物)为混合 待检标本,观察有无非特异性反应. 本底检测: n取混合阴性血清标本(经确证均不含乙 肝标志物) HbeAb,HBcAb检测试剂交叉反应 n以20%小牛血清为检测标本,以酶标记抗 HBc-HRP代替抗Hbe-HRP,其它条件