磁共振监测的肝癌载药纳米粒研和临床应用课件

1、磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用1 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发 和临床应用和临床应用 苏州市立医院 朱忻 吴锦昌 （该课题作为横向合作课题，部分内容已获卫生部基金资助）（该课题作为横向合作课题，部分内容已获卫生部基金资助） (项目号项目号WKJ2009-2-35) 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用2 肝癌的发病情况 n近年来，全球肝癌发病率明显升高，每年全世界近年来，全球肝癌发病率明显升高，每年全世界 新增病例超过新增病例超过100100万人。万人。 n肝癌的死亡率仅次于胃癌、食道癌而居于第三位。肝癌的死亡率仅次于胃癌、食道癌而居于第三位。 n

2、由于乙肝病毒感染仍没有得到有效控制，肝癌发由于乙肝病毒感染仍没有得到有效控制，肝癌发 病率仍呈上升势头，我国年发病率高于病率仍呈上升势头，我国年发病率高于10/1010/10万，万， 每年死于肝癌约每年死于肝癌约1111万人，占全世界肝癌死亡人数万人，占全世界肝癌死亡人数 的的4545。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用3 肝癌的治疗情况 n肝癌治疗首选手术，但肝癌初诊时约肝癌治疗首选手术，但肝癌初诊时约80%失去失去 手术机会，治疗理念是综合治疗。手术机会，治疗理念是综合治疗。 n肝癌的非手术治疗在延长肝癌患者生命，改善肝癌的非手术治疗在延长肝癌患者生命，改善 生活质量方面起了非常重

3、要的作用。如微波、生活质量方面起了非常重要的作用。如微波、 氩氦刀、射频消融、无水酒精注射氩氦刀、射频消融、无水酒精注射(PEIT) 以及以及 经导管肝动脉化疗栓塞术（经导管肝动脉化疗栓塞术（TACE）。）。 nTACE被国内外多数学者列为非手术治疗的首被国内外多数学者列为非手术治疗的首 选。（选。（5 year OS 5-15% ） 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用4 现有TACE存在的不足 n大多数肿瘤不能完全坏死大多数肿瘤不能完全坏死,需多次治疗。需多次治疗。 n不可避免会对正常的肝实质带来损害不可避免会对正常的肝实质带来损害,加重肝功能损加重肝功能损 伤伤,促进肝硬化促进肝硬化

4、,影响患者的生活质量及生存期。影响患者的生活质量及生存期。 n另外，现代肿瘤治疗存在的问题还有：另外，现代肿瘤治疗存在的问题还有： n化疗选择性小化疗选择性小, 体内代谢快、有效期短、对增殖快体内代谢快、有效期短、对增殖快 的正常组织也有毒性：心脏毒性、骨髓抑制等。的正常组织也有毒性：心脏毒性、骨髓抑制等。 1.基因及肿瘤疫苗治疗缺乏有效导入载体，缺乏监基因及肿瘤疫苗治疗缺乏有效导入载体，缺乏监 测效能的方法。测效能的方法。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用5 载药纳米粒生物技术 n定义：运用某种具有特殊亲和力的载体（纳定义：运用某种具有特殊亲和力的载体（纳 米粒）将药物定向输送到靶器

5、官来发挥作用。米粒）将药物定向输送到靶器官来发挥作用。 n特点：特点： n特异靶向性。特异靶向性。 n毒副作用小。毒副作用小。 1.疗效高：纳米粒尺度下降疗效高：纳米粒尺度下降3个数量级，其表面积个数量级，其表面积 提高提高6个数量级个数量级(100万倍万倍)，即疗效提高，即疗效提高100万倍万倍。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用6 聚乳酸纳米粒 (polylactic acid,PLA) n聚乳酸纳米粒：直径聚乳酸纳米粒：直径10500 nm的固态胶体的固态胶体 粒子粒子, 无毒、可生物降解无毒、可生物降解, 并有适当的粒形与并有适当的粒形与 粒径粒径, 以及有较长的体内循环时间和

6、具有较高以及有较长的体内循环时间和具有较高 的载药量及药物包封率等优点。的载药量及药物包封率等优点。 n150nm的颗粒可躲避肝的颗粒可躲避肝kufou细胞的吞噬，细胞的吞噬， 通过其靶向性杀伤癌细胞。通过其靶向性杀伤癌细胞。 1.而较大颗粒通过肝动脉被肝而较大颗粒通过肝动脉被肝kufou细胞吞噬，细胞吞噬， 并聚集于肿瘤中持续释放药物。并聚集于肿瘤中持续释放药物。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用7 载药纳米粒 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用8 研究目的及意义 n1.初步探讨阿霉素纳米制剂对肝癌细胞的杀伤初步探讨阿霉素纳米制剂对肝癌细胞的杀伤 作用，从而寻求提高治疗肝癌的新

7、药。作用，从而寻求提高治疗肝癌的新药。 n2.为其他抗肿瘤药物、基因及其他生物治疗的为其他抗肿瘤药物、基因及其他生物治疗的 活体活体MRI监测奠定基础。监测奠定基础。 n3.为以纳米粒为载体的新一代化疗药物及基因为以纳米粒为载体的新一代化疗药物及基因 治疗载体的开发提供实验依据。治疗载体的开发提供实验依据。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用9 研究内容和研究试验方法 1.纳米粒的制备和鉴定纳米粒的制备和鉴定 。 2.制备兔肝癌模型制备兔肝癌模型 及及MRI成像成像 。 3.介入法注射载药微粒入肿瘤内实验。介入法注射载药微粒入肿瘤内实验。 4.载药微粒成像实验及药物动力学实验载药微粒成像

8、实验及药物动力学实验 。 5.病理组织学分析与图像分析比较病理组织学分析与图像分析比较 。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用10 纳米粒的制备和鉴定 n以乳滴聚结法合成小于以乳滴聚结法合成小于500nm的的PLA-Gd- ADM-NP，并对其表面进行修饰，并对其表面进行修饰 。 n体外测定体外测定PLA-Gd-ADM-NP的纳米颗粒大小、的纳米颗粒大小、 所包裹的所包裹的Gd-DTPA浓度和阿霉素药量和包封浓度和阿霉素药量和包封 率及释放规律率及释放规律 。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用11 制备兔肝癌模型 及MRI成像 n制备：制备：CT引导下经皮穿刺建立改良兔引导下经皮

9、穿刺建立改良兔VX2 肝肝 癌模型癌模型 。 n成像：动物线圈实验兔肝癌模型成像：动物线圈实验兔肝癌模型MRI成像，记成像，记 录肿瘤内部信号、大小情况等。录肿瘤内部信号、大小情况等。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用12 介入法注射载药微粒入肿瘤内实验 n采用经肝动脉插管法将采用经肝动脉插管法将PLA-Gd-ADM-NP混悬混悬 液、液、Gd-DTPA、阿霉素溶液、生理盐水等四、阿霉素溶液、生理盐水等四 种成分，注射入随机分组的兔肝癌内。种成分，注射入随机分组的兔肝癌内。 n采用同法将采用同法将PLA-Gd-ADM-NP混悬液注射到正混悬液注射到正 常兔肝动脉内。常兔肝动脉内。 n每

10、组各每组各15只，途中若有以外死亡，则给以增补。只，途中若有以外死亡，则给以增补。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用13 载药微粒成像实验及药物动力学实验 nA 常组、注射常组、注射PLA-Gd-ADM-NP混悬液肝癌组、注射混悬液肝癌组、注射 阿霉素肝癌组分别在注射术后外周静脉采血阿霉素肝癌组分别在注射术后外周静脉采血1ml,通过通过 反相高效液相色谱检测药物浓度，监测药代动力学。反相高效液相色谱检测药物浓度，监测药代动力学。 nB 常组、注射常组、注射PLA-Gd-ADM-NP混悬液肝癌组每组选混悬液肝癌组每组选 取取510只以只以MRI分别在术后分别在术后1d、3d、5d、7d、

11、14d、 21d观察记录溶液在肿瘤内分布、信号变化情况，重观察记录溶液在肿瘤内分布、信号变化情况，重 点观察肝癌内和正常肝组织的分布。点观察肝癌内和正常肝组织的分布。 nC 每组各每组各510只分别于术后只分别于术后1d、3d、5d、7d、14d、 21d行行MRI检查观察肿块的坏死情况。检查观察肿块的坏死情况。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用14 病理组织学分析与图像分析比较 n在成像之后，将在成像之后，将5组各随机各分组各随机各分3小组，每小组小组，每小组 各各5只，分别在治疗后的只，分别在治疗后的1、2、3周再次行周再次行MRI 成像后记录肿瘤内信号、大小变化情况，随即成像后记录肿瘤内信号、大小变化情况，随即 处死动物，取肿瘤标本进行病理组织学分析，处死动物，取肿瘤标本进行病理组织学分析， 分析肿块大小、细胞坏死情况，对比分析分析肿块大小、细胞坏死情况，对比分析MRI 监测纳米粒在肿瘤代谢规律及作用情况，评价监测纳米粒在肿瘤代谢规律及作用情况，评价 MR成像的效果和价值及治疗情况。成像的效果和价值及治疗情况。 n采用免疫组化检测肿瘤残存细胞，检测采用免疫组化检测肿瘤残存细胞，检测VEGF、 PCNA等指标。等指标。 磁共振监测的肝癌载药纳米粒研发和临床应用15 项目的特色和创新之处 n本研究利用聚乳酸接枝聚乳酸共聚物本研究利用聚乳酸接枝聚乳酸共聚物,制备负载阿制备