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文档简介
1、o生物组织中某些化合物能与相应化学试剂 产生特定的颜色反应。 o还原糖斐林试剂 砖红色沉淀 o脂肪 o蛋白质双缩脲试剂紫色 o1还原糖的鉴定 o(注:斐林试剂的甲液和乙液混合 均匀后立即使用) o结论:还原糖与斐林试剂在加热 煮沸的过程中生成砖红色沉淀。 o2脂肪的鉴定 o取材;花生种子(浸泡34 h)将子叶削成 薄片 o制片 o观察:在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗 粒, 然后用高倍镜观察 o结论:脂肪能被苏丹染液染成橘黄色 o3蛋白质的鉴定 o选材与制备组织样液:卵清或黄豆(浸泡 12 d) o结论:生物组织中含有蛋白质 o1斐林试剂与双缩脲试剂的比较 斐林试剂双缩脲试剂 甲液乙液A液B液
2、 成分 0.1 g/mL NaOH溶液 0.05 g/mL CuSO4溶液 0.1 g/mL NaOH溶 液 0.01 g/mL CuSO4溶液 鉴定物质还原糖蛋白质 添加 顺序 甲乙两液等量混匀后立即 使用 先加入A液1 mL,摇匀,再 加入B液4滴,摇匀 反应条件水浴加热不需加热,摇匀即可 反应现象样液变砖红色样液变紫色 o2.在鉴定还原性糖的实验中,对试 管中的溶液进行加热时,试管底部不 要触及烧杯底部,另外,试管口不要 朝向实验者,以免沸腾的溶液冲出试 管,造成烫伤。 o3虽然本实验是验证性实验,但 也要注意对照,在鉴定还原糖和蛋白 质时留出一部分样液,以便与鉴定后 的样液的颜色变化作
3、对照,这样可以 增强说服力。 o4因斐林试剂很不稳定,容易生成 蓝色Cu(OH)2沉淀所以应将甲液与乙 液分别配制储存,使用时再临时配制。 o若先加入NaOH,还原糖中的半缩 醛羟基易被氧化而失去还原性,再加 入CuSO4后不能产生砖红色的Cu2O 沉淀,只有将其先配制成Cu(OH)2溶 液,才能产生砖红色的沉淀。 o5使用双缩脲试剂时要先加入双缩 脲试剂A,造成碱性环境,而只有在 碱性环境中,蛋白质才容易与Cu2 发生颜色反应。若加入过量的双缩脲 试剂B,CuSO4在碱性溶液中生成大 量的蓝色Cu(OH)2沉淀,会遮蔽实验 中所产生的紫色,影响观察结果。 o6在蛋白质的鉴定实验中,若用 蛋白清作实验材料,必须稀释,以免 实验后粘住试管,不易洗刷。 o(注:斐林试剂
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