【最新word论文】液基薄片技术在胸腹水诊断中的应用【医学专业论文】

1、液基薄片技术在胸腹水诊断中的应用作者：韩旭东柳杨王西霞陈晓艳【摘要】目的：研究液基薄片技术应用于胸腹水细胞学诊断的价值。方法：同一标本应用传统制片（cp）和液基薄片技术制作涂片，常规染色，并在显微镜下做比较。结果：诊断结果薄片阳性率、阴性率均高于传统制片，可疑、不满意涂片均低于传统制片，但只有不满意标本薄片与cp存在显著性差异；cp和薄片形态特征对比，薄片各方面质量均好于cp，且阅片时间明显缩短。结论：薄片和cp在检出率没有明显的区别，应用薄片技术制片质量提高，利于提高诊断的准确性。应用薄片技术阅片时间减少，提高工作效率，减轻了劳动强度，且可以重复制片，作特殊染色及免疫细胞化学等工作。其特点：

2、成本较高，制片劳动强度稍大，时间较长。【关键词】液基薄片技术细胞学诊断恶性肿瘤胸腹水是许多癌症患者的常见并发症，其细胞学检查对疾病的诊断有重要的意义。多年来，查找癌细胞主要应用传统制片方法，该方法存在着一些不利因素可能影响诊断，如背景不清晰、大量红细胞、炎性、渗出物及粘液，细胞涂片厚、面积过大、敏感性低等1。薄层细胞检测（thin-layercytologytest）即液基薄片技术，是20世纪90年代发展起来的一项制片新技术，最初用于妇科宫颈细胞学，与传统涂片（cp）诊断相比，制出的玻片细胞结核清晰，背景明朗，不仅具有高度一致性，而且提高了上皮内病变的检出率25，其成果是显著的。但这项技术在非

3、妇科方面（包括胸腹水细胞学诊断）的应用，在国内报道较少。我们在本院胸腹水细胞学诊断应用液基薄片技术，并与cp做一比较，探讨其应用价值。1材料与方法1.1材料我院病理科2006年11月至2007年4月收集的胸腹水标本141份，每份均制备传统和薄片两种涂片，其中包括胸水78份，腹水63份。1.2方法每份标本取液体40ml，平均分成2份离15min，2400r/min，弃去上清液。其中1份用来做cp两张，将另1份应用lpt方法制备薄片。lpt方法制片方法如下：分别加入34ml保存液，振荡器混匀倒入15ml离心管，振荡器充分混匀，离15min，2400r/min，弃去上清液，倒置试管吸干水分，加入细胞

4、团2倍的细胞基液（如无细胞团加基液50l），振荡器充分混匀，取50l涂片、烘干，每例制薄片1张，必要时可重复。两种涂片均在95%乙醇固定15min后he染色，显微镜下观察，细胞分恶性组、可疑肿瘤组和良性组，恶性组包括腺癌细胞、鳞腺癌细胞、癌细胞及各种肿瘤细胞；可疑肿瘤组包括可疑癌细胞、又非典型的细胞。良性组包括不典型细胞、间皮细胞以及鳞状细胞。另有1组不满意标本即仅见红细胞或未见细胞。1.3统计学处理采用spss10.0统计软件进行统计学分析，组间差异采用卡方检验，以p0.05为有显著性差异，p0.01为高度显著性差异。2结果2.1cp和薄片诊断结果比较2.1.1在cp诊断结果中，恶性组31例

5、（22.0%），可疑肿瘤组21例（14.9%），良性组80例（56.7%），不满意标本9例（6.4%）。2.1.2在薄片诊断结果中，恶性组39例（27.7%），可疑肿瘤组15例（10.6%），良性组86例（61.0%），不满意标本1例（0.7%）。2.1.3恶性组中薄片比cp多8例，可疑肿瘤组中薄片比cp少6例，良性组中薄片比cp多6例，不满意标本薄片比cp少8例。经统计学处理，不满意标本薄片与cp存在显著性差异，其余结果无显著性差异。2.2cp和薄片形态特征对比2.2.1薄层涂片背景中红细胞、炎细胞和细胞碎片较少，细胞分布均匀，重叠现象较少，细胞形态保存完好，且片段也保存完好，不满意标本涂片

6、数量少。在细胞形态上，与cp涂片相比：细胞小且无退变现象。良性细胞呈一致性，细胞核呈圆形、椭圆形，核膜清晰且光滑，染色质匀细，着色浅，可见细小的核仁。恶性细胞，细胞大小不一，核质比增大，细胞核形态多样，其核膜凹凸不平，核膜厚，染色质粗，集结呈粗粒状团块状，并见明显的核仁。细胞质在两种涂片未见明显区别。2.2.2两者均应用he染色，液基薄片比cp涂片易着色。2.2.3阅片时间上，因为cp每例均涂两张涂片，1例阴性涂片阅完约需45min，1例阳性涂片阅完约需57min。液基薄片因为细胞被集中在2cm大小的范围内，1例阴性涂片约需12min，1例阳性涂片约需35min。3讨论薄层细胞检测是90年代发

7、展起来的一项制片新技术，已成功地应用于妇科细胞学，在非妇科方面的应用国内报道较少。我们在应用这一技术于本院胸腹水细胞学诊断，并与cp做了比较。在检出率方面恶性组中薄片比cp高5.7%，可疑肿瘤组中薄片比cp低4.3%，良性组中薄片比cp低4.7%，但无统计学意义。故可以认为薄片和cp在检出率没有明显的区别，对恶性肿瘤的检出率提高没有显著的作用，在确诊率的提高方面没有显著作用，这与文献报道相符。1而在不满意标本薄片与cp比较减少8例（5.7%），经统计学处理，不满意标本薄片与cp存在显著性差异。这说明，应用薄片技术制片不满意标本明显减少，制片质量明显提高，这些都有利于提高诊断的准确性，对细胞学诊

8、断有积极意义。薄层涂片背景干净，细胞分布均匀，结构清晰，形态保存完好，重叠现象较少，各种干扰明显少于cp（尤其是对肿瘤细胞干扰及挤压），阅片时对细胞特别是肿瘤细胞的识别更加准确，更加易于阅片。6这些是因为lpt保存液、清洁液具有使粘液与细胞分离，避免阳性细胞堆积和丢失，同时可去除有诊断价值以外的组织碎片、粘液、红细胞、杂质，轻松处理大量粘液、红细胞标本，能够保留全部有诊断价值的细胞成份及其完好的细胞形态。lpt的细胞基液能够将细胞完美黏附包裹，完全保持细胞的鲜活性，并使细胞均匀悬浮，保证标本的随机性和代表性。制片时，靠细胞的表面张力自由打开，形成一张细胞均匀分布、背景清晰的单层涂片。高质量的涂

9、片是高质量诊断的良好基础。薄层涂片应用于体腔积液，使原来cp需涂在几张涂片的细胞，集中在一个直径2cm大小没有红细胞背景的范围内，涂片背景干净，细胞分布均匀，结构清晰，阳性涂片阅片时间由原来的57min减少到35min，阴性涂片由原来的45min减少到12min，提高工作效率，减轻了劳动强度。同时，由于薄片将标本储存于保存液中，还可以用来重复制片，也可作特殊染色，如免疫细胞化学等7。因其背景干净，减少了非特异性着色，该技术也可用作dna倍体图象分析，荧光原位杂交等，使得细胞学工作深入到分子水平，便于各项实验取材1。薄片技术也有它的缺点：制片时标本需充分振荡并需离心15min除去红细胞等成分，再

10、加入细胞基液振荡器充分混匀，手工制片，所以制片时间比cp相对延长，制片的劳动强度稍大。另外，薄片技术成本较高，不是所有患者都能接受的。故薄片技术的应用时应有一定的选择性。【参考文献】1张智慧，孙耘田薄片技术在体腔积液诊断中的应用j中华病理学杂志，2002，31：3603612awenc,hadlways,eddyw,etal.efficacyofthihperppreparationofcervicalsmears:a1000-caseinvestigator-sponsoredstudy.diagncytopathol,1994,11:3336.3hutchinsonml,cassincm,

11、ballhg3rd.theefficacyofanautomatedpreparationdeviceforcervicalcytology.amjclinpathol,1991,96:300305.4hutchinsonmiagarwalp,denaultt,etal.anewlookatcervicalcytology.thinprepmulticentertrialresults.actacytol,1992,36:499504.5wilburdc,cibases,merritts,etal.thinprepprocessor.clinicaltrialsdemonstrateanincreaseddetectionrateofabnormalcervicalcytologicspecim