第五章 单倍体细胞培养

1、5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 l5.1单倍体的起源和遗传行为单倍体的起源和遗传行为 5.1.1单倍体的起源单倍体的起源: 主要有主要有4种方法可以诱发植物产生单倍体：种方法可以诱发植物产生单倍体： l（1）种间和属间杂交：）种间和属间杂交：远缘花粉刺激 。远缘杂交中，异种植物虽然不能与 母本授粉，受精，由于远缘花粉的诱导作用，卵细胞在没有受精的情况下受 刺激而发育成胚。如马铃薯，大麦，小麦，玉米。 l（2）物理照射和化学诱变）物理照射和化学诱变：花粉用射线照射后失去了受精能力， 然后与母 株授粉，卵细胞在花粉的刺激作用下进行孤雌发育，从而产生单倍体。如烟 草，小麦，金鱼草。 方法：射线、二

2、甲基亚砜、萘乙酸、马来酰肼、秋水仙素。 l（3）双生苗的筛选）双生苗的筛选：有些植物可产生多胚种子，即两个或多个胚被共同的种 皮包裹着，这些种子可产生单倍体-单倍体，二倍体-二倍体和单倍体-二倍体 植株。在Capiscum中,双生苗的频率受母本基因型控制。通过筛选可以提高 双生苗的频率。 l（4）花药、花粉培养）花药、花粉培养：未授粉的子房、胚珠离体培养 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.1.2单倍体的遗传行单倍体的遗传行 为为 l一倍的单倍体只有一倍的单倍体只有 一个染色体基数一个染色体基数(X) ， 减数分裂时染色体减数分裂时染色体 不能配对，分离极不能配对，分离极 不正常，但具有一不

3、正常，但具有一 定同源关系的染色定同源关系的染色 体可以部分配对，体可以部分配对， 从而可以对染色体从而可以对染色体 的演化过程进行研的演化过程进行研 究。究。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.2单倍体的应用价值单倍体的应用价值 （1）在植物育种中使后代迅速纯合）在植物育种中使后代迅速纯合 母本母本 父本父本 F2 F1 品系比较试验品系比较试验 区域试验区域试验 品种品种 花药培养花药培养 花粉植株花粉植株 加倍加倍 选择鉴定选择鉴定 5-8代代 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 （2）提高选择效率）提高选择效率 AAbb(母本）母本）aaBB(父本）父本） Ab(雌配子）雌配子） a

4、B(雄配子）雄配子） AaBb(F1）常规杂交育种常规杂交育种 不同类型卵不同类型卵 ABAbaBab 精精 子子 AB Ab aB ab 单倍体育种单倍体育种 AABB AABb AaBB AaBb AABb AAbb AaBb Aabb AaBB AaBbaaBbaaBB AaBb Aabb aaBb aabb AABB AAbbAAbb aaBB aabb 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 l5.2单倍体的应用价值单倍体的应用价值 l（3）排除杂种优势对后代选择的干扰）排除杂种优势对后代选择的干扰 l（4）遗传研究的良好实验材料体系）遗传研究的良好实验材料体系 l（5）突变体的筛选）突变

5、体的筛选 l（6）消除致死基因）消除致死基因 l（7）选育新型自交系）选育新型自交系 l（8）遗传转化的受体材料）遗传转化的受体材料 l（9）基因表达研究的良好材料）基因表达研究的良好材料 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 l5.3离体培养条件下的小孢子发育离体培养条件下的小孢子发育 l5.3.1小孢子的正常发育小孢子的正常发育 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 l5.3离体培养条件下的小孢子发育离体培养条件下的小孢子发育 l5.3.1小孢子的正常发育小孢子的正常发育 l花粉的分裂增殖方式有四种类型花粉的分裂增殖方式有四种类型: l1)营养细胞发育途径营养细胞发育途径; l2)生殖细胞发育途径

6、生殖细胞发育途径 ; l3)营养细胞和生殖细胞并进发育途径营养细胞和生殖细胞并进发育途径 ; l4)花粉均等分裂途径花粉均等分裂途径 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.4花药培养花药培养 取材取材 预处理预处理 消毒消毒 接种接种 培养方式和培养条件培养方式和培养条件 花粉植株的诱导花粉植株的诱导 壮苗和移栽壮苗和移栽 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.4花药培养花药培养 5.4.1花药培养花药培养 操作技术操作技术 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.4.2 影响花药培养的因素影响花药培养的因素 供试植株的年龄供试植株的年龄：多数情况下幼年植株优于老年植株多数情况下幼年植株优于老年

7、植株,可甘蓝型油菜可甘蓝型油菜 却相反却相反. 花粉发育时期：花粉发育时期：因物种而异因物种而异.在烟草中在烟草中, 处于第一次有丝分裂期处于第一次有丝分裂期 的花粉效果最好的花粉效果最好,而在禾本科和芸苔属中而在禾本科和芸苔属中,单核早期最好单核早期最好. 花蕾和花药的预处理：花蕾和花药的预处理：对于有些物种对于有些物种,培养前对花药和花蕾进培养前对花药和花蕾进 行预处理行预处理,能显著提高培养效果能显著提高培养效果.如大麦花药如大麦花药,在在40C 处理处理28 天天,或或70C 处处 理理14 天天,能收到最好效果能收到最好效果. 除温度处理以外除温度处理以外,其它一些因素的预处理有时其

8、它一些因素的预处理有时 也能收效也能收效, 如用激素处理供体植株可以提高土豆花药单倍体的形成能力如用激素处理供体植株可以提高土豆花药单倍体的形成能力. 用用E MS,酒精酒精,射线射线,降低气压降低气压,高低渗处理进行预处理的也有报道高低渗处理进行预处理的也有报道. 供试植株的生长条件供试植株的生长条件：在烟草中,短光周期(8h)和高光强(16000lux)较 有利.而大麦,低温(120)和高光强(20000lux)较好.芸苔属的一些种(油菜) , 高光强和一定的温度变化较有利,对于甘蓝型冬油菜来讲,植株在150 下 生长比200 下好.对烟草植株进行氮饥饿处理可以提高花药培养效果. 5 单倍

9、体细胞培养单倍体细胞培养 5.4.2 影响花药培养的因素影响花药培养的因素 活性炭的作用活性炭的作用：培养基中加入活性炭可以使烟草雄核发育的花培养基中加入活性炭可以使烟草雄核发育的花 药数由药数由15%增加到增加到45%。 供体植株的基因型供体植株的基因型：小孢子能否进行胚胎发生受基因控制小孢子能否进行胚胎发生受基因控制,所以所以, 供体供体 植株的基因型对花药培养效果有重要影响植株的基因型对花药培养效果有重要影响. 培养基培养基:花药培养时往往需要一定的渗透压花药培养时往往需要一定的渗透压, 成熟花粉是二细胞结构成熟花粉是二细胞结构 的往往需低浓度糖的往往需低浓度糖,而成熟花粉为三细胞结构的

10、植物往往需高渗条件而成熟花粉为三细胞结构的植物往往需高渗条件,如如 油菜小孢子培养时油菜小孢子培养时,糖的浓度可用到糖的浓度可用到13-17%.培养基中激素的种类培养基中激素的种类,使用使用 量和配比量和配比,对诱发小孢子启动分裂对诱发小孢子启动分裂,生长和分化常常起决定作用生长和分化常常起决定作用,而其它成而其它成 分一般只起次要的辅助作用分一般只起次要的辅助作用.因此因此,在进行花药培养时在进行花药培养时,进行细致的激素方进行细致的激素方 面的实验是必要的面的实验是必要的.氮素的量和各种氮素的比例对培养效果有明显影响氮素的量和各种氮素的比例对培养效果有明显影响. 有机物质在花药培养中可能起

11、重要作用有机物质在花药培养中可能起重要作用.在大麦和小麦的花药培养中在大麦和小麦的花药培养中,谷谷 氨酰胺对小孢子胚形成具有明显的促进作用氨酰胺对小孢子胚形成具有明显的促进作用.有些作物的花药对培养基有些作物的花药对培养基 的的pH 值有一定要求值有一定要求 。 培养条件培养条件:多数植物在多数植物在250 下培养能诱导愈伤组织下培养能诱导愈伤组织, 可某些植物可某些植物, 尤其是芸苔属尤其是芸苔属,在高温在高温350 下处理几天下处理几天,然后进入然后进入250 培养能收到最培养能收到最 好培养效果好培养效果. 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.4花药培养花药培养 5.4.3逆境处理对小

12、孢子胚胎发生的诱导作用逆境处理对小孢子胚胎发生的诱导作用 热激、热激、射线、秋水仙素处理对孤雄生殖均有诱导作用。射线、秋水仙素处理对孤雄生殖均有诱导作用。 如热激处理在甘蓝型油菜中应用最普遍，如热激处理在甘蓝型油菜中应用最普遍，32处理处理8h8h以上诱导孤雄生殖。以上诱导孤雄生殖。 射线射线对小孢子胚胎发生具有刺激作用，尤其与高温热激处理相结合。如对小孢子胚胎发生具有刺激作用，尤其与高温热激处理相结合。如 5rad/min的低照射率，可有效刺激小孢子胚胎发生。的低照射率，可有效刺激小孢子胚胎发生。 低温处理（冷激处理）：低温处理（冷激处理）：花粉花粉/花药在低温（花药在低温（4-13）处理一

13、段时间，）处理一段时间， 再转移到再转移到25培养，能促进孤雄生殖。最适处理时间的长短随温度、花粉发培养，能促进孤雄生殖。最适处理时间的长短随温度、花粉发 育时期和基因型而变化。育时期和基因型而变化。 营养饥饿处理：营养饥饿处理：在在25条件下对烟草小孢子饥饿处理，或有糖存在情况条件下对烟草小孢子饥饿处理，或有糖存在情况 下下33-37的热激均能使小孢子实现胚胎发生。的热激均能使小孢子实现胚胎发生。 重金属胁迫：重金属胁迫：能促进小孢子胚胎发生，如硝酸银可提高油菜花药的培养能促进小孢子胚胎发生，如硝酸银可提高油菜花药的培养 效果。效果。 上述多因子的结合上述多因子的结合 其机理是改变细胞分裂周

14、期，改变细胞发育途径等。其机理是改变细胞分裂周期，改变细胞发育途径等。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.4花药培养花药培养 5.4.4单倍体植株再生单倍体植株再生 花药培养可以通过小孢子分裂直接产生胚，从而产生单倍 体植株，也可以先形成胚结构或愈伤组织额，再通过胚胎 发生或器官发生形成植株。胚萌发成苗的培养基一般与诱 导培养基不同，大量的胚形成后可以转移到不同的培养条 件下，寻找最合适的促进胚萌发成苗的培养条件。如适当 的水分胁迫可以提高籼稻花培绿苗的分化率。当pH6.0-6.2 时，培养基硬度变大，有利于愈伤组织生理状态的改善， 提高绿苗分化率。琼脂浓度6.5-7.0g/L也能促进绿苗

15、分化。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.4花药培养花药培养 5.4.5单倍体植株的加倍处理单倍体植株的加倍处理 单倍体植株通常情况下表现为植株矮小，生长瘦弱，由于染色体在减数 分裂时不能正常配对，所以表现为高度不育。对单倍体进行加倍处理， 使其成为双单倍体，是稳定其遗传行为和为育种服务的必要措施。 方法如(1)自然加倍、(2)秋水仙素诱导。具体方法是：把幼小的花粉植 株浸入过滤灭菌的秋水仙素溶液中96小时,然后转移到培养基上使其进 一步生长。秋水仙素处理也可通过羊毛脂进行，即把含有秋水仙素的羊 毛脂涂于上部叶片的腋芽上，然后将主茎的顶芽去掉，以刺激侧芽长成 二倍体的可育枝条。为了加倍颠茄

16、的单倍体细胞，Rashid & Street(1974)在悬浮培养基中加入1g/L 秋水仙素，处理24 小时之后， 再把细胞转移到不含秋水仙素的培养基中，结果可使70%的细胞二倍化。 (3) 氟乐灵，是一种植物特异性微管形成抑制剂,也可使染色体加倍。 5.4.6 孤雌生殖诱导的分子机制孤雌生殖诱导的分子机制 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.4花药培养花药培养 5.4.6 孤雌生殖诱导的分子机制孤雌生殖诱导的分子机制 1986年有些花粉特异性基因的下调与孤雄生殖的诱导有关，封阻花粉 花粉特异性基因的转录对烟草孤雄生殖的启动有帮助作用。 1994年在油菜中得到的与孤雄生殖有关的分子标记是na

17、pin基因的表 达孤雄生殖过程的一致性。 1997年从小麦中分离到一种类似于金属硫蛋白的蛋白，证明是胚特异 性的，受ABA调节。在烟草中分离到一个基因，在孤雄生殖过程中上 升调控。 单倍体的诱导受基因控制，并可以杂交转育，同一种基因型的个体间， 花药培养特性也存在差异，通过选择可提高花药培养的反应能力。 关于花粉单倍体及其植株形成的分子机制仍欠缺，但至少已认识到一 些基因的 上升或下降调控、新基因的表达等与这一过程有关。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.5花粉（小孢子）培养花粉（小孢子）培养 5.5.1 花粉培养与花药培养的比较花粉培养与花药培养的比较 花粉培养花粉培养是指把花粉从花药中

18、分离出来，以单个花粉粒作 为外植体进行离体培养的技术。 花药培养属于器官培养的范畴，而花粉培养与单细胞培养 相似。 花药和花粉培养实质：花药和花粉培养实质：把发育到一定阶段的花药（或花粉） 接种在人工培养基上，改变花粉的发育途径，使其不形成 配子，而像体细胞一样进行分裂、分化，最终发育成完整 植株的过程。 广义的花粉培养，孤雄生殖。 培养类型：花药-器官培养 培养类型：花粉-单细胞培养 两者目的一致：诱导花粉细胞发育成单倍体植株。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.5花粉（小孢子）培养花粉（小孢子）培养 5.5.1 花粉培养与花药培养的比较花粉培养与花药培养的比较 花粉培养在某些方面比花药

19、培养有一定优势：花粉培养在某些方面比花药培养有一定优势：花药培养有 时会由于花药中的有害物质而不能诱导小孢子启动第一次 分裂。 小孢子培养存在的问题：小孢子培养存在的问题：花粉已是单倍体细胞，诱发后经 愈伤组织或胚状体发育成的小植株都是单倍体植株或双倍 体，不含有因药壁、花丝、花隔等体细胞组织的干扰而形 成的体细胞植株；由于起始材料是小孢子，获得的材料总 是纯合的；小孢子培养可观察到由单细胞开始雄核发育的 全过程；是很好的遗传与发育研究的材料体系；由于花粉 能均匀的接触化学的和物理的诱变因素，花粉是研究吸收、 转化和诱变的理想材料。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.5花粉（小孢子）培养花

20、粉（小孢子）培养 5.5.1 花粉培养与花药培养的比较花粉培养与花药培养的比较 花药和花粉培养实质：花药和花粉培养实质：把发育到一定阶段的花药（或花粉） 接种在人工培养基上，改变花粉的发育途径，使其不形成 配子，而像体细胞一样进行分裂、分化，最终发育成完整 植株的过程。 广义的花粉培养，孤雄生殖。 培养类型：花药-器官培养 培养类型：花粉-单细胞培养 两者目的一致：两者目的一致：诱导花粉细胞发育成单倍体植株。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.5花粉（小孢子）培养花粉（小孢子）培养 5.5.2 分离花粉的方法分离花粉的方法 1）花粉漂浮自然释放法）花粉漂浮自然释放法:将花药接种于液体培养中

21、，使花 粉自然释放。 2）研磨过滤收集法：）研磨过滤收集法：将花蕾消毒后，放入含培养基或分 离液的无菌研磨器中研磨，使花粉（小孢子）释放出来， 然后再通过一定孔径的网筛过滤，离心收集花粉并用培养 基或分离液洗涤，然后用培养基将花粉调整到理想的培养 密度，移入培养皿中培养。 3）剖裂释放法）剖裂释放法:借助一定工具剖裂药壁使花粉释放出来。 4）磁拌法：）磁拌法：将花药接种与盛有培养液的无菌器皿中，再 放入一根磁棒，置于磁力搅拌器上，低速旋转，使花药张 的小孢子释放出来。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.5花粉（小孢子）培养花粉（小孢子）培养 5.5.2 花粉（小孢子）培养方法花粉（小孢子）

22、培养方法 1.液体浅层培养：液体浅层培养：分离的小孢子经洗涤纯化后，调整到需要 的浓度，根据培养皿的大小，适量加入培养皿培养。 2.平板培养：平板培养：直接取新鲜花药的花粉粒在平板培养基上进行 培养的方法。 3.看护培养：看护培养：将花药水平放于固体培养基上，在其上覆盖小 圆形滤纸，在滤纸滴加0.5ml含10个花粉粒的悬浮液滴的培养 方法。 4. 微室悬滴培养：微室悬滴培养：将一滴含50-80粒的花粉悬液滴在盖玻片 上，在翻过来放在凹穴载玻片上，盖玻片四周用石蜡密封。 5.条件培养法：条件培养法：在合成培养基中加入失活的花药提取物，再 接入花粉进行培养。由于失活花药的提取物中含有促进花粉 发育

23、的物质，有利于花粉培养成功。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.5花粉（小孢子）培养花粉（小孢子）培养 5.5.4 影响花粉（小孢子）培养的因素影响花粉（小孢子）培养的因素 1. 选择合适的基因型分离小孢子是培养成功的关键因素，不选择合适的基因型分离小孢子是培养成功的关键因素，不 同植物、不同基因型获得最佳培养效果的花蕾大小也不一样。同植物、不同基因型获得最佳培养效果的花蕾大小也不一样。 2. 一定条件下预培养后的花药分离出的花粉再进行培养容易一定条件下预培养后的花药分离出的花粉再进行培养容易 收到良好的效果，如低温预处理、饥饿、高渗处理等。收到良好的效果

24、，如低温预处理、饥饿、高渗处理等。 3.培养基的成分影响花粉的培养效果，但需要设置不同处理培养基的成分影响花粉的培养效果，但需要设置不同处理 进行试验，不断探索和完善。进行试验，不断探索和完善。 4. 培养基的物理状态与培养效果有关。培养基的物理状态与培养效果有关。 5.良好的培养与再生效果需要多种因素综合改进使用，如在良好的培养与再生效果需要多种因素综合改进使用，如在 芝麻菜（芝麻菜（rocket）的小孢子培养中，活性炭与高温处理对小）的小孢子培养中，活性炭与高温处理对小 孢子很重要，并能够建立一个高效的培养体系，可获得大量孢子很重要，并能够建立一个高效的培养体系，可获得大量 的小孢子胚，有

25、效促进胚萌发而发育成植株。的小孢子胚，有效促进胚萌发而发育成植株。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.6 禾本科植物花药培养中的白化苗现禾本科植物花药培养中的白化苗现 象象 禾谷类植物花粉单倍体生产中存在的一个严重问题是出现大量白化苗。水稻白化苗禾谷类植物花粉单倍体生产中存在的一个严重问题是出现大量白化苗。水稻白化苗 的产生与基因型和培养温度有密切关系，小麦白化苗产生的频率随温度增加而增加的产生与基因型和培养温度有密切关系，小麦白化苗产生的频率随温度增加而增加 （25-35）。）。 白化苗的产生与很多因素有关，包括内部因素和外部因素。内因：基因型和花粉发白化苗的产生与很多因素有关，包括内部

26、因素和外部因素。内因：基因型和花粉发 育时期的影响最明显；外因：高温、高浓度育时期的影响最明显；外因：高温、高浓度2,4-D、延迟分化培养时间等。、延迟分化培养时间等。 白化苗产生的机制可能是由于质体基因组的变异造成的，或来自染色体畸变的花粉，白化苗产生的机制可能是由于质体基因组的变异造成的，或来自染色体畸变的花粉， 也可能是花粉有丝分裂过程中，质体不能分化并降解。也可能是花粉有丝分裂过程中，质体不能分化并降解。 可通过适当的调整措施降低白化苗的频率，如大麦控制白化苗的产生的措施：可通过适当的调整措施降低白化苗的频率，如大麦控制白化苗的产生的措施： 1）采用同高绿苗分化率的品种杂交，再对）采用

27、同高绿苗分化率的品种杂交，再对F1进行花培，可改善和提高绿苗分化率。进行花培，可改善和提高绿苗分化率。 2）田间用）田间用10-20mg/L BA处理大麦花粉。处理大麦花粉。 3）取花粉发育时期处于单核早、中期的大麦穗子。）取花粉发育时期处于单核早、中期的大麦穗子。 4）用约）用约4 低温预处理。低温预处理。 5）脱分化培养基使用）脱分化培养基使用2,4-D配以少量配以少量2,4,5-T和和BA，将碳源改为麦芽糖。，将碳源改为麦芽糖。 6）提早进行花粉脱分化的转分化培养。）提早进行花粉脱分化的转分化培养。 7）诱导花粉细胞走胚胎发生途径，可根本克服花粉白化苗的产生。）诱导花粉细胞走胚胎发生途径

28、，可根本克服花粉白化苗的产生。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.7 从雌配子体诱导单倍体植株从雌配子体诱导单倍体植株 通过未受精子房、胚珠等培养可以诱导获得单倍体。成熟胚囊含有通过未受精子房、胚珠等培养可以诱导获得单倍体。成熟胚囊含有8个单个单 倍体核，通过培养，倍体核，通过培养，8个核都有发育成单倍体的潜力，但对于向日葵来说，个核都有发育成单倍体的潜力，但对于向日葵来说， 多数情况下单倍体从卵细胞发育而来。水稻子房培养的单倍体从助细胞发多数情况下单倍体从卵细胞发育而来。水稻子房培养的单倍体从助细胞发 育而来。育而来。 很多因素影响单倍体雌配子体胚胎发生的诱导。供体植株的生长环境、植很多

29、因素影响单倍体雌配子体胚胎发生的诱导。供体植株的生长环境、植 株生长季节、预处理情况等。株生长季节、预处理情况等。 从遗传因素讲，基因型对培养效果有重要影响。从遗传因素讲，基因型对培养效果有重要影响。 如甜菜如甜菜1300个基因型个基因型 50%的基因型能产生单倍体植株，单倍体获得的频率平均为的基因型能产生单倍体植株，单倍体获得的频率平均为1%。 同小孢子体细胞培养一样，培养基对胚珠同小孢子体细胞培养一样，培养基对胚珠/子房培养的单倍体胚胎发生有明子房培养的单倍体胚胎发生有明 显影响。显影响。 当培养基中当培养基中BA的含量为的含量为0-2.0mg/L时，甜菜的单倍体产量可增加时，甜菜的单倍体

30、产量可增加1.5-7.5%。 5 单倍体细胞培养单倍体细胞培养 5.8 单倍体细胞培养与植物育种单倍体细胞培养与植物育种 我国花培育种技术走在世界前列，育成各种农作物新品种几十个，有的已推广很大我国花培育种技术走在世界前列，育成各种农作物新品种几十个，有的已推广很大 面积，在生产上发挥着重要作用。面积，在生产上发挥着重要作用。 如水稻花培育种最突出的成就是李梅芳等育成的如水稻花培育种最突出的成就是李梅芳等育成的“中花中花8 号号” ,“中花中花9 号号”,“中花中花 10 号号”,“中花中花11 号号”粳稻花培新品种粳稻花培新品种,丰产丰产,品质好。其它花培水稻品种还有品质好。其它花培水稻品种

31、还有“ 朝朝 花矮花矮”,“宁糯宁糯1 号号”,“宁糯宁糯6 号号”,“ 单单209”,“浙粳浙粳66”,“京花京花101”,“京花京花103”,“中花中花 12”,“花汕优花汕优63”,“花花8504”等品种等品种,累计推广面积累计推广面积1360 多万亩多万亩,社会和经济效益显著。社会和经济效益显著。 油菜小孢子培养已经成为油菜育种的重要辅助手段，由于小孢子培养群体大油菜小孢子培养已经成为油菜育种的重要辅助手段，由于小孢子培养群体大, 便于便于 选择，可以有效地缩短育种周期。华中农业大学利用小孢子培养与常规育种相结合，选择，可以有效地缩短育种周期。华中农业大学利用小孢子培养与常规育种相结合， 培育出培育出“华双华双3 号号”双低油菜品种，累计推广面积达双低油菜品种，累计推广面积达3000 万亩。万亩。 花药花药/小孢子培养是缩短育种周期、提高选择效率、获得遗传材料和有用突变体的小孢子培养是缩短育种周期、提