医学微生物学：第四章 细菌感染的检查方法与防治原则（钟）

1、第四章第四章 细菌感染的实验室诊断细菌感染的实验室诊断 与防治原则与防治原则 病原菌病原菌检测检测 血清学血清学诊断诊断 第一节第一节 细菌感染的细菌感染的实验室诊断实验室诊断 标本采集与送检的原则标本采集与送检的原则 形态学检查形态学检查 细菌分离培养与鉴定细菌分离培养与鉴定 采取标本应无菌操作 不同情况（如病期、分布、排出部位等） 采取不同标本。并尽可能采集病变明显 部位的材料 采集标本应在使用抗生素之前 标本必须新鲜，尽快送检，注意冷藏（少 数应保暖） 一、标本采集与送检的原则一、标本采集与送检的原则 病原菌检测病原菌检测 二、形态学二、形态学检查检查 显微镜放大法显微镜放大法 染色法染

2、色法 普通光学显微镜普通光学显微镜 电子显微镜电子显微镜 复染色法：用复染色法：用2种种以上染料以上染料 革兰染色革兰染色 抗酸染色抗酸染色 负染色法：墨汁负染负染色法：墨汁负染 荧光显微镜荧光显微镜 （掌握实验课）（掌握实验课） 三、细菌分离培养与鉴定三、细菌分离培养与鉴定 Isolation and identification 病原菌检测病原菌检测 细菌的细菌的人工培养人工培养 细菌的细菌的鉴定鉴定 细菌抗原的细菌抗原的检测检测 细菌核酸的检测细菌核酸的检测 （一）细菌的（一）细菌的人工培养人工培养 p培养基培养基 p细菌在培养基中的细菌在培养基中的生长情况生长情况 培养基培养基 cul

3、true medium 用人工方法配制而成的，专供微生物生用人工方法配制而成的，专供微生物生 长繁殖使用的混合营养物制品。长繁殖使用的混合营养物制品。 1 1、按营养组成和、按营养组成和用途分用途分 厌氧培养基厌氧培养基 基础培养基基础培养基 营养培养基营养培养基 选择培养基选择培养基 鉴别培养基鉴别培养基 常用培养基种类常用培养基种类 常用培养基种类常用培养基种类 2、按物理性状分： 液体培养基液体培养基 + 1.5-2.5%+ 1.5-2.5%琼脂琼脂 固体培养基固体培养基 + 0.3-0.5%+ 0.3-0.5%琼脂琼脂 半固体培养基半固体培养基 固体培养基中细菌的生长情况固体培养基中细

4、菌的生长情况 菌落（菌落（S S型）型） 菌苔菌苔 菌落（菌落（R型型） 菌落（菌落（colony）：）： 单个细菌分裂繁单个细菌分裂繁 殖成一堆肉眼可见殖成一堆肉眼可见 的细菌集团。的细菌集团。 液体培养基中细菌的生长情况液体培养基中细菌的生长情况 混浊、沉淀、菌膜混浊、沉淀、菌膜 沉淀生长沉淀生长 混浊生长混浊生长 表面生长表面生长 半固体体培养基半固体体培养基 中中 云雾状生长云雾状生长沿穿刺线生长沿穿刺线生长 有鞭毛有鞭毛 细菌细菌 无鞭毛无鞭毛 细菌细菌 （二）细菌（二）细菌的的鉴定鉴定 1. 形态学形态学鉴定：显微镜下鉴定：显微镜下 2. 生化试验生化试验鉴定：检测代谢产物鉴定：检

5、测代谢产物 3. 血清学鉴定：已知抗体检测未知的纯培养菌血清学鉴定：已知抗体检测未知的纯培养菌 4. 药物敏感药物敏感试验试验 5. 动物试验：测定细菌毒力动物试验：测定细菌毒力 (半数致死量、半数感染量半数致死量、半数感染量) 病原菌检测病原菌检测 （三）细菌抗原的检测 RIA(放射免疫)，ELISA，免疫荧光法， Western blot，对流免疫电泳 （四）细菌核酸的检测 核酸杂交 PCR 基因芯片（gene chips） 病原菌检测病原菌检测 用用已知已知细菌或特异性细菌或特异性抗原抗原检测血清中的检测血清中的有无有无 相应特异性相应特异性抗体抗体及其及其动态学动态学变化变化。 适用于

6、抗原性较强的细菌或病程较长的感染适用于抗原性较强的细菌或病程较长的感染 性疾病的诊断。性疾病的诊断。 若恢复期血清抗体效价比早期升高若恢复期血清抗体效价比早期升高 4 4倍或倍或4 4倍以上倍以上，有诊断意义，有诊断意义 四、血清学诊断四、血清学诊断 第二节第二节 细菌感染的防治原则细菌感染的防治原则 一、人工主动免疫一、人工主动免疫：主要用于预防：主要用于预防 （一）疫苗（一）疫苗 死疫苗死疫苗，减毒活疫苗减毒活疫苗 亚单位疫苗亚单位疫苗、基因工程疫苗、基因工程疫苗 多肽多肽疫苗疫苗、DNADNA疫苗疫苗等等 （二）类毒素（二）类毒素 死疫苗与活疫苗的比较 种类种类活疫苗活疫苗死疫苗死疫苗

7、制备特点制备特点减毒或无毒减毒或无毒死菌，保持免疫原性死菌，保持免疫原性 制备方法制备方法非正常培养非正常培养理化方法理化方法 接种次数接种次数 1次，量小，可在体内增殖，次，量小，可在体内增殖， 类似轻型感染或隐性感染类似轻型感染或隐性感染 2-3次，量大，在体内不增殖，发次，量大，在体内不增殖，发 热或局部肿痛反应等热或局部肿痛反应等 免疫类型免疫类型体液免疫，细胞免疫体液免疫，细胞免疫体液免疫体液免疫 免疫效果免疫效果好好，维持时间长（，维持时间长（1-5年）年）较差，较差，维持时间短（维持时间短（0.5-1年）年） 安全性安全性 保存保存 可能毒力回复可能毒力回复 不易保存不易保存 好好 易保存易保存 人工主动免疫 免疫原性免疫原性 二、人工被动免疫：主要用于紧急预防和治疗 抗毒素（含抗体的血清） 免疫球蛋白（血清丙种球蛋白等） 细胞因子制剂：IL、IFN-、CSF 第二节第二节 细菌感染的防治原则细菌感染的防治原则 三、三、细菌感染的细菌感染的药物药物治疗治疗 （一）抗菌药物的种类 抗菌药物包括抗生素和化学合成抗菌药物 （二）抗菌药物的主要作用机制 影响细胞壁的合成: 青霉素 影响细胞膜的功能: 多粘菌素 影响蛋白质的合成: