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文档简介

1、姓名：徐秀倩 学号：3160481 导师： 吴小芹 实验原理实验原理 琼脂糖为链状多糖 绳状琼脂糖束大网孔型 凝胶 分离、鉴定、纯化DNA 影响DNA迁移率的因素：DNA分子的大小、构 象，凝胶浓度，电压，电泳缓冲液的组成 缓冲液pHDNA Pi，DNA带负电荷，迁移率与 分子量对数成反比 DNA分子构象影响迁移率：共价闭环DNA线 状DNA开环DNA 溴化乙锭（EB）DNA：紫外光下 红色荧光 电泳仪电泳仪 电泳槽电泳槽 缓冲液缓冲液 琼脂糖琼脂糖 凝胶槽凝胶槽梳子梳子 取液器取液器 溴酚蓝溴酚蓝 琼脂糖凝胶的制备：溶化，冷却，EB 凝胶板的制备：加梳子，倒胶 样品的制备：样品+1/5体积溴

2、酚蓝 加样：加样端为负极（黑） 电泳：5V/cm 观察：紫外灯下观察，照相 相 关 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 分 离 材 基 因 组 D N A ， 按 常 规 提 取， 置 - 2 0 保 存 备 用。 A g a r o s e 、 限 制 性 内 切 酶 E c o R 为 上 海 生 工 生 物 工 程 有 限 公 司 产 品。 从 凝 胶 中 小 量 回 收 D N A 片 段 的 试 剂 盒 为 上 海 华 舜 生 物 工 程 有 限 公 司 产 品， 1 k b D N A L a d d e r 为 M B I 产 品。 方 配 制 0. 8 % 琼 脂 糖 凝 胶， 电 泳 缓 冲 液 为 1 T A E， 电 压 为 5 V / c m ， 电 泳 1 h ， 用 溴 化 乙 锭 或 L I G H T B L U E D y e 显 色。 2 和 3 ( 分 别 约 为 1 0 、 7、 4. 5 k b) 之 后 有 很 多 的 较 小 片 段 ( 从 大 约 3. 5 k b 到 1 0 0 b p 不 等) 。 在 日 光 下 ( 用 L I G H T B L U E D y e 显 色) 分 别 切 取 含 有 单 一 目 的 片 段 1、 2、 3 的 胶 条 用 试 剂 盒 回 收 D N A 分 子，

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