南医大药物第13章__莨菪烷类抗胆碱药物的2

1、药物分析药物分析 第十三章莨菪烷类抗胆碱药第十三章莨菪烷类抗胆碱药 物的分析物的分析 教学目的与要求教学目的与要求 v 掌握莨菪烷类抗胆碱药物的鉴别试验和含 量测定方法。 v 熟悉莨菪烷类抗胆碱药物的基本结构和主 要性质。 v 了解莨菪烷类抗胆碱药物的杂质检查。 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 结构结构 莨菪烷类莨菪烷类 抗胆碱药抗胆碱药 物物 莨菪烷衍莨菪烷衍 生的氨基生的氨基 醇醇 与各种不同与各种不同 有机酸缩合有机酸缩合 酯酯+生物碱生物碱 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 莨菪烷莨菪烷 N H3C 含氮的生物碱含氮的生物碱 (氨基氨基) 1 2 3

2、4 56 7 8 N 莨菪烷(Tropane) 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 莨菪醇莨菪醇 含氮的醇含氮的醇 (莨菪醇莨菪醇) N H3C OH 1 2 3 4 56 7 8 N OH H 莨菪醇(Tropine) 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 典型药物典型药物 硫酸硫酸 阿托品阿托品 H2SO4 O O HOH N H3C H 2 H2O 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 典型药物典型药物 硫酸硫酸 莨菪碱莨菪碱 H2SO4 N H3C H 2 2H2O OH O O H 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 H2SO4 N

3、 H3C H 2 2H2O OH O O H 结构区别结构区别 硫酸硫酸 莨菪碱莨菪碱 H2SO4 O O HOH N H3C H 2 H2O 硫酸硫酸 阿托品阿托品 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 H2SO4 N H3C H 2 2H2O OH O O H 性质区别性质区别 硫酸硫酸 莨菪碱莨菪碱 H2SO4 O O HOH N H3C H 2 H2O 硫酸硫酸 阿托品阿托品 熔点、溶解度、熔点、溶解度、 旋光度、分子旋光度、分子 量量 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 典型药物典型药物 氢溴酸氢溴酸后后 马托品马托品 HBr N H3C H O O OH

4、莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 典型药物典型药物 氢溴酸氢溴酸山山 莨菪碱莨菪碱 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 典型药物典型药物 氢溴酸氢溴酸东东 莨菪碱莨菪碱 3H2O HBr N H3C H O O H OH O 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 典型药物典型药物 甲溴酸甲溴酸东东 莨菪碱莨菪碱 Br N H3C H O O H OH O H3C 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 典型药物典型药物 丁溴酸丁溴酸东东 莨菪碱莨菪碱 Br N H3C H O O H OH O H3C 1.水解性（酯水解生成醇和酸） OH O

5、 O H N CH3 OH H N CH3 + HOOC OH 阿托品 莨菪醇 莨菪酸 2.碱性 与生物碱沉淀剂产生有色沉淀 阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子， 较强的碱性，易与酸成盐，如阿托品pKb1为4.35. 一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应) 原理：莨菪烷类生物碱结构中的酯键水解后生成莨菪酸， 经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化 钾的醇溶液和固体氢氧化钾作用脱羧，转化成具有共轭结 构的阴离子而显深紫色。 托烷生物碱类的特征反应，鉴别阿托品和莨菪碱类 一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应) HOOC OH +3HNO3 HOOC OH

6、 NO2 O2NNO2 +3H2O KOH C2H5OH HOOC OH NO2 O2NN OH O KOH H OH NO2 O2NN OK O 取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残 渣，放冷，加乙醇23滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。 莨菪酸莨菪酸 硝基化硝基化 脱羧化脱羧化 共轭结构共轭结构 深紫深紫 二、氧化反应二、氧化反应(与硫酸与硫酸-重铬酸钾的反应）重铬酸钾的反应） HOOC OH H2O H2SO4 HOOC CH2 2O2 CHO +2CO2H2O 三、沉淀反应三、沉淀反应 生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分 子

7、酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀 生物碱沉淀试剂生物碱沉淀试剂反应条件及结果反应条件及结果 碘化铋钾试液碘化铋钾试液橙红或棕红色沉淀橙红或棕红色沉淀 碘化钾碘试液碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀棕色或棕褐色沉淀 碘化汞钾试液碘化汞钾试液在酸性或碱性溶剂中生成白在酸性或碱性溶剂中生成白 色或淡黄色沉淀色或淡黄色沉淀 三硝基苯酚试液三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点结晶性沉淀并有特定熔点 硅钨酸试液硅钨酸试液白色、淡黄色或黄棕色沉淀白色、淡黄色或黄棕色沉淀 磷钨酸试液磷钨酸试液酸性或中性溶液中，淡黄色酸性或中性溶液中，淡黄色 沉淀沉淀 三、沉淀反应三、沉淀反应 四四

8、、光谱鉴别法、光谱鉴别法 紫外光谱法紫外光谱法 一般通过比较药物的一般通过比较药物的 或吸收光谱的一致性或吸收光谱的一致性 来进行鉴别以及吸光系数来进行鉴别以及吸光系数 minmax 、 四、光谱鉴别法 红外光谱法红外光谱法 CHP收载的原料药一般都收载的原料药一般都 采用红外光谱法进行鉴别采用红外光谱法进行鉴别 五、色谱鉴别法 色谱法色谱法 一般用于已知生物碱的鉴一般用于已知生物碱的鉴 别，主要有别，主要有TLC、HPLC、 GC、PC等等 六、硫酸盐和溴化物的反应六、硫酸盐和溴化物的反应 药物大都以硫酸盐或药物大都以硫酸盐或 溴化物的形式存在溴化物的形式存在 通过加沉淀试剂如硝酸银通过加沉

9、淀试剂如硝酸银 等生成溴化银沉淀或加入等生成溴化银沉淀或加入 氯试剂生成溴溶于三氯甲氯试剂生成溴溶于三氯甲 烷而显色烷而显色 vChp氢溴酸东莨菪碱的鉴别： 六、硫酸盐和溴化物的反应六、硫酸盐和溴化物的反应 一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺 洋金花粗粉洋金花粗粉 乙醇乙醇/ /渗漉渗漉 渗漉液渗漉液 减压蒸馏减压蒸馏 浸膏浸膏 H H2 2SOSO4 4/ /提取提取 酸性提取液酸性提取液 NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /提取提取 总生物碱总生物碱 NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /分离分离 东莨菪碱东莨菪碱 HBr/HBr/成盐成盐 氢

10、溴酸东莨菪碱（粗品）氢溴酸东莨菪碱（粗品） 75% C75% C2 2H H5 5OH/OH/精制精制 成品成品 根据其制备工艺，本品可通根据其制备工艺，本品可通 过酸度、其它生物碱、和易过酸度、其它生物碱、和易 氧化物质检查进行控制氧化物质检查进行控制 一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查 酸度酸度 东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试 纸几乎不显碱性反应。纸几乎不显碱性反应。 如氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱如氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱 盐、通过其盐、通过其5%的水溶液的水溶液pH为为 4.05.5，可控制酸性杂质，可控制酸性杂质 一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查 易氧化物易氧化物 可能杂质为阿扑

11、东莨菪碱、及可能杂质为阿扑东莨菪碱、及 其它含有不饱和双键的有机物，其它含有不饱和双键的有机物， 他们的紫外吸收波长会红移、他们的紫外吸收波长会红移、 可使高锰酸钾溶液褪色可使高锰酸钾溶液褪色 N H3C H O O CH2 (杂质) N H3C H O O O CH2 (杂质) 一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查 易氧化物易氧化物 可能杂质为阿扑东莨菪碱、及可能杂质为阿扑东莨菪碱、及 其它含有不饱和双键的有机物，其它含有不饱和双键的有机物， 他们的紫外吸收波长会红移、他们的紫外吸收波长会红移、 可使高锰酸钾溶液褪色可使高锰酸钾溶液褪色 一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查 其它生物碱

12、其它生物碱 本品水溶液加入氨水试液不得本品水溶液加入氨水试液不得 发生混浊。当有其它生物碱存发生混浊。当有其它生物碱存 在时，则易产生混浊。在时，则易产生混浊。 v本品水溶液 一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查 v检查方法： 其他生物碱其他生物碱 ab 二、硫酸阿托品 硫酸阿托品为硫酸阿托品为消旋体消旋体，无旋光性，无旋光性， 而莨菪碱为左旋体，可以利用旋而莨菪碱为左旋体，可以利用旋 光性对莨菪碱杂质进行检查光性对莨菪碱杂质进行检查 CHP用用HPLC法检查其中有关物质，法检查其中有关物质， 通过峰面积的比值及保留时间来通过峰面积的比值及保留时间来 控制杂质限度控制杂质限度

13、莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较 强、临床使用剂量较少，因此测强、临床使用剂量较少，因此测 定方法要专属、灵敏定方法要专属、灵敏: 酸性染料酸性染料 比色法比色法 非水溶液非水溶液 滴定法滴定法 高效液相高效液相 色谱法色谱法 有机相 (BH+ In-) 水相 (BH+ In-) + HIn H+ In- + B H+ BH+ UV 酸性染料酸性染料 比色法比色法 在一定的在一定的pH条件下，某些生物碱条件下，某些生物碱 药物可与某些酸性染料结合而呈色，药物可与某些酸性染料结合而呈色， 进而可用分光光度法进行测量进而可用分光光度法进行测量 酸性染料酸性染料 如磺酸酞类指

14、示剂等，如如磺酸酞类指示剂等，如 溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、 溴甲酚紫、溴酚蓝等溴甲酚紫、溴酚蓝等 其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱 明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂 定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的 特征波长处的吸光度，即可进行含量测定特征波长处的吸光度，即可进行含量测定 酸性染料比色法酸性染料比色法 影响因素影响因素 u 水相最佳pH值：使得BH+和In-最多 影响因素影响因素 u 水相最佳pH值：使得BH+和In-最多 pH过低抑制酸性

15、染料的解离、使酸性阴离子浓过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓 度过低影响离子对的形成；度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物过高，有机药物 呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一 个最佳个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。其选值存在，使离子对生成最有利。其选 择方法一般根据药物与染料的择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有值及水相与有 机相的分配系数而定机相的分配系数而定 水相最佳水相最佳pHpH 影响因素影响因素 酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可 稍过量 一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大一般认为对测定结果影响不大，只

16、要量足够大 就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化 层，且不易于除去，往往影响测定结果。层，且不易于除去，往往影响测定结果。 影响因素影响因素 有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想 一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子 对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或 极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。 影响因素影响因素 水分的影响： 影响因素影响因素 酸性染料里面的有色杂质 影响结果，先用萃取溶剂萃取除去影响结果，先用萃取溶剂萃取除去

17、应用示例应用示例 氢溴酸东莨菪碱片的含量测定 精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精 密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液 4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫 外-可见分光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度， 计算，即得。 本法主要适用于紫外吸收弱、标示量低的有机 碱性药物（生物碱）制剂的含量或含量均匀度 的测定。 应用示例应用示例 硫酸阿托品片的含量测定硫酸阿托品片的含量测定 应用示例应用示例 硫酸阿托品片的含量测定硫酸阿托品片的含量测定 应用示例应用示例 硫酸阿托品片的含量测定硫酸阿托品片的含量测定 应用示例应用示例 硫酸阿托品片的含量

18、测定硫酸阿托品片的含量测定 二、非水溶液滴定法 二、非水溶液滴定法 二、非水溶液滴定法 三、高效液相色谱法 三、高效液相色谱法 三、高效液相色谱法 应用示例 应用示例 练习与思考 v1、莨菪烷类生物碱的特征反应是 vA、与三氯化铁反应 vB、与生物碱沉淀剂反应 vC、重氮化-偶合反应 vD、丙二酰脲反应 vE、Vitali反应 练习与思考 v 2、药物水解后，与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下，生成 苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味的药物是 v A、氢溴酸山莨菪碱 v B、异烟肼 v C、硫酸奎宁 v D、盐酸氯丙嗪 v E、地西泮 练习与思考 v3、影响酸性染料比色法的最主要因素是 vA、水相pH

19、 vB、酸性染料的种类 vC、有机溶剂的种类 vD、酸性染料的浓度 vE、水分的影响 练习与思考 v 4、采用酸性染料比色法测定药物含量，如果溶液pH过低 对测定造成的影响是 v A、使In-浓度太低，而影响离子对的形成 v B、有机碱药物呈游离状态 v C、使In-浓度太高 v D、没有影响 v E、有利于离子对的形成 练习与思考 v 5、离子对HPLC要在流动相中加入与呈解离状态的待测 组分离子电荷相反的离子对试剂，分析碱性物质时常用的 离子对试剂有 v A、戊烷磺酸钠 v B、庚烷磺酸钠 v C、十二烷基磺酸钠 v D、四丁基溴化铵 v E、四丁基氢氧化铵 练习与思考 v 6、离子对HP

20、LC要在流动相中加入与呈解离状态的待测 组分离子电荷相反的离子对试剂，分析酸性物质时常用的 离子对试剂有 v A、戊烷磺酸钠 v B、庚烷磺酸钠 v C、十二烷基磺酸钠 v D、四丁基溴化铵 v E、四丁基氢氧化铵 练习与思考 v 7、氢溴酸东莨菪碱中其他生物碱的检查方法是 v A、水溶液加入氨试液产生浑浊 v B、水溶液加入氨试液不得发生浑浊 v C、加入氢氧化钾试液则有浑浊 v D、加氢氧化钾试液无浑浊 v E、加氢氧化钾试液数滴，只发生瞬即消失的类白色浑浊 练习与思考 v 8、ChP2010硫酸阿托品含量测定：取本品约0.5g，精 密称定，加冰醋酸与醋酐各10mL溶解后，加结晶紫指示 液

21、1-2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定至溶液显纯 蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。 v 已知：取样量为0.5009g，高氯酸滴定液浓度 C=0.1028mol/L，V空=0.04mL；V样=7.05mL； v (C17H23NO3)2H2SO4H2O 分子量 694.83 思考题 v简述酸性染料比色法的原理和影响因素。 习题习题 1药品临床试验管理规范的英文缩写是（ ） A.GAP B.GCP C.GLP D.GMP E.GSP 习题习题 2关于中国药典最恰当的说法是（ ） A.关于药物分析的书 B.收载我国生产的所有药物的书 C.关于药物的词典 D.国家监督管理药品质量的法定技术

22、标准 E关于中草药和中成药的技术规范 习题习题 3. 药品质量的全面控制是( ) A. 药品研究、生产、供应、临床使用和有关 技术的管理规范、条例的制度与实施 B. 药品生产和供应的质量控制 C. 真正做到把准确、可靠的药品检验数据作 为产品质量评价、科研成果鉴定的基础和依据 D. 帮助药品检验机构提高工作质量和信誉 E. 树立全国自上而下的药品检验机构的技术 权威性和合法地位 习题习题 6日本药局方的英文缩写是（日本药局方的英文缩写是（ ） A.BP B.JP C.USP D.CHP E.以上都不是以上都不是 习题习题 7GLP的中文全称是（的中文全称是（ ） A.药品非临床研究质量管理规范

23、药品非临床研究质量管理规范 B.药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范 C.药品经营质量管理规范药品经营质量管理规范 D.药品临床试验管理规范药品临床试验管理规范 E.分析质量管理规范分析质量管理规范 习题习题 8中国药典中既对药品具有鉴别意义，又能反映中国药典中既对药品具有鉴别意义，又能反映 药品的纯杂程度的项目是（药品的纯杂程度的项目是（ ） A.外观形状外观形状 B.物理常数物理常数 C.鉴别鉴别 D.检查检查 E.含量测定含量测定 习题习题 9中国药典（中国药典（2010年版）规定的年版）规定的“溶解溶解”系系 指指1g或或1ml溶质能溶解在（溶质能溶解在（ ） A.1ml溶液中溶液中 B.110ml溶液中溶液中 C 1030ml溶液中溶液中 D.30100ml溶液中溶液中 E.1001000ml溶液中溶液中 习题习题 11中国药典（中国