细菌病一搬诊断程序剖析教学课件

1、 2 2、营养培养基、营养培养基 于基础培养基中加入于基础培养基中加入高营养物质如葡萄高营养物质如葡萄 糖、血液、血清、腹水、生长因子糖、血液、血清、腹水、生长因子等，以等，以 满足营养要求较高的细菌生长需要。有的满足营养要求较高的细菌生长需要。有的 细菌还需加入特殊物质，如结核杆菌需加细菌还需加入特殊物质，如结核杆菌需加 入鸡蛋清、马铃薯、甘油等才能良好生长。入鸡蛋清、马铃薯、甘油等才能良好生长。 3、选择培养基、选择培养基 在培养基中加入某些化学物质，而选在培养基中加入某些化学物质，而选 择性地择性地让欲分离的细菌旺盛生长的培养基，让欲分离的细菌旺盛生长的培养基， 使用后可以达到选择分离的

2、目的。如胆盐使用后可以达到选择分离的目的。如胆盐 和蔷薇色酸可以选择性地抑制和蔷薇色酸可以选择性地抑制G+G+菌的生长，菌的生长， 而不影响而不影响GG菌的生长。在培养基中加入菌的生长。在培养基中加入 二药后可选择性地分离出肠道杆菌。二药后可选择性地分离出肠道杆菌。 利用细菌分解底物及其代谢产物的利用细菌分解底物及其代谢产物的 不同，可不同，可在培养基中加入某种物质和指在培养基中加入某种物质和指 示剂示剂，即制为鉴别培养基，目的是使得，即制为鉴别培养基，目的是使得 混合在一起的多种细菌在同一种培养基混合在一起的多种细菌在同一种培养基 上生长时，表现出不同的、肉眼可鉴别上生长时，表现出不同的、肉

3、眼可鉴别 的变化，从而达到鉴别细菌的目的。的变化，从而达到鉴别细菌的目的。 4 4、鉴别培养基、鉴别培养基 5.5.厌氧培养基厌氧培养基 厌氧菌不能在有氧环境中生长。厌氧菌不能在有氧环境中生长。将培养基与空将培养基与空 气隔绝，或向培养基中加入一些物质，使培养气隔绝，或向培养基中加入一些物质，使培养 基中的氧气耗尽基中的氧气耗尽，则可用于培养厌氧菌。如肝则可用于培养厌氧菌。如肝 片肉汤培养基，应用时于液体表面加盖液体石片肉汤培养基，应用时于液体表面加盖液体石 蜡以隔绝空气。蜡以隔绝空气。 区分选择培养基和鉴别培养基区分选择培养基和鉴别培养基 选择培养基上的菌类，有选择培养基上的菌类，有2种或两

4、种以上种或两种以上 时，时，只有适应环境（选择培养基的基底）只有适应环境（选择培养基的基底） 的菌种才能存活的菌种才能存活。 鉴别培养基上的菌类，有两种或两种以鉴别培养基上的菌类，有两种或两种以 上时，在培养基中加入某种试剂或化学上时，在培养基中加入某种试剂或化学 药品，使培养后会发生某种变化，从而药品，使培养后会发生某种变化，从而 区别不同类型的微生物（但区别不同类型的微生物（但培养基上的培养基上的 各个菌种均不死亡各个菌种均不死亡）。）。 三、制备培养基的基本程序三、制备培养基的基本程序 配料配料溶化溶化测定及矫正测定及矫正pHpH过滤过滤 分装分装灭菌灭菌无菌检验无菌检验备用备用 培养基

5、的基本要求培养基的基本要求 1.含有丰富的营养物质，不含任何抑菌物质。 2.具有适当的pH值和水分。 3.均匀透明，易于观察。 4.经过灭菌和无菌检验。 1 1、细菌在固体培养基上的生长现象：、细菌在固体培养基上的生长现象： 观察细菌在平板上的菌落特征：观察细菌在平板上的菌落特征： 菌落：细菌接种在固体培养基上，经过一菌落：细菌接种在固体培养基上，经过一 定时间的培养后，表面可出现肉眼可见的单个定时间的培养后，表面可出现肉眼可见的单个 细菌集团，称为菌落。细菌集团，称为菌落。 四、细菌在培养基上的生长情况四、细菌在培养基上的生长情况 形态、大小、边缘、表面构造（湿润度和光滑形态、大小、边缘、表

6、面构造（湿润度和光滑 度）、隆起度、透明度、颜色等，及在血平板度）、隆起度、透明度、颜色等，及在血平板 上的溶血现象（上的溶血现象（溶血、溶血、溶血）。溶血）。 2、细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛的细菌，沿有鞭毛的细菌，沿 穿剌线呈模糊穿剌线呈模糊羽毛羽毛 状状生长。生长。 无鞭毛的细菌，沿无鞭毛的细菌，沿 穿剌线呈穿剌线呈清晰清晰的线的线 状生长状生长。 3、细菌在液体培养基中的生长现象 观察肉汤培养物的观察肉汤培养物的 混浊度、管底沉淀、混浊度、管底沉淀、 肉汤表面菌膜或菌肉汤表面菌膜或菌 环，以及有无汽泡环，以及有无汽泡 等。等。 临床标本 预处理增 菌 接种培养基，分离单个菌落

7、 各种鉴定试验 涂片染色 快速诊 断试验 生化试验血清学实验涂片染色药敏试验动物试验 初步诊 断报告 最终诊断报告 第四节第四节 细菌病的一般诊断程序细菌病的一般诊断程序 一、病料的采集、保存及运送一、病料的采集、保存及运送 二、细菌的形态检查二、细菌的形态检查 1.1.单染色法单染色法 2.2.复染色法复染色法 革兰氏（革兰氏（G）染色法染色法 革兰氏阳性菌（革兰氏阳性菌（G G+ +菌）蓝紫色菌）蓝紫色 革兰氏阴性菌（革兰氏阴性菌（G G- -菌菌）红色红色 细菌的接种培养方法 1.倾注平皿接种法 2.平板划线分离法 3.斜面接种法 4.穿刺接种法 5.液体培养基接种法 三、细菌的分离培养三、细菌的分离培养 必须用纯培养物鉴定必须用纯培养物鉴定选用单个菌落选用单个菌落 四、细菌的生化试验四、细菌的生化试验 1.1.糖分解试验糖分解试验 2.2.维维- -培试验培试验 3.3.甲基红试验甲基红试验 4.4.枸橼酸盐利用试验枸橼酸盐利用试验 5.5.吲哚试验吲哚试验 6.6.硫化氢试验硫化氢试验 7.7.触媒试验触媒试验 8.8.氧化酶试验氧化酶试验 9.9.脲酶试验脲酶试验 五、