分光光度计的校正和检验

1、 made by 15340 721可见分光光度计可见分光光度计 使用方法使用方法 n721型分光光度计其波长范围360800nm，色散元件为 三角棱形. n1.检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，接通电源开 关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位，预 热20min后，再选择须用的单色光波长和相应的放大灵 敏度档，用调“0”电位器调整电表为T=0%。 n2.盖上样品室盖使光电管受光，推动试样架拉手，使参 比溶液池（溶液装入4/5高度，置第一格）置于光路上， 调节100%透射比调节器，使电表指针指T=100%。 n3.重复进行打开样品室盖，调0，盖上样品室盖，调透 射比为100%的操作至仪

2、器稳定。 n4.盖上样品室盖，推动试样架拉手，使样品溶液池置于 光路上，读出吸光度值。读数后应立即打开样品室盖。 n5.测量完毕，取出比色皿，洗净后倒置于滤纸上晾干。 各旋钮置于原来位置，电源开关置于“关”，拔下电 源插头。 n6.放大器各档的灵敏度为：“l” 1倍；“2”10倍； “3”20倍，灵敏度依次增大。由于单色光波长不同 时，光能量不同，需选不同的灵敏度档。选择原则是 在能使参比溶液调到T= 100%处时，尽量使用灵敏度较 低的档，以提高仪器的稳定性。改变灵敏度档后，应 重新调“0”和“100”。 n4.盖上样品室盖，推动试样架拉手，使样品溶液池置于 光路上，读出吸光度值。读数后应立

3、即打开样品室盖。 n5.测量完毕，取出比色皿，洗净后倒置于滤纸上晾干。 各旋钮置于原来位置，电源开关置于“关”，拔下电 源插头。 n6.放大器各档的灵敏度为：“l” 1倍；“2”10倍； “3”20倍，灵敏度依次增大。由于单色光波长不同 时，光能量不同，需选不同的灵敏度档。选择原则是 在能使参比溶液调到T= 100%处时，尽量使用灵敏度较 低的档，以提高仪器的稳定性。改变灵敏度档后，应 重新调“0”和“100”。 1.波长校正波长校正 n分光光度计常需要波长校正，检查仪器的波长刻度与 实际波长是否能较好的保持一致，以减小误差。 n稀土玻璃（镨钕玻璃，钬玻璃）在相当宽的波长范围 内特征吸收峰，如

4、通常采用镨钕玻璃在573nm和586nm 的双峰以及741nm和808nm等处的吸收峰来对分光光度 计的波长刻度进行校正。一般情况下，可见分光光度 计的波长误差允许在3nm范围内。利用某些本身有较 强特征谱线的光源也可对波长进行校正，如氘灯和汞 灯广泛用于紫外线分光光度计的校正。此外，苯蒸汽 在紫外区有很强的特征吸收峰，用它来校正波长也很 方便。 2.吸光度校正吸光度校正 n在实际工作中，有时需要对仪器的吸光 度标准进行检查和校正。校正的方法是 将0.0303g干燥衡重的K2Cr2O7 溶于 1L0.05mol.L-1 的H2SO4溶液中，用1cm吸 收池，在25C测定不同波长下的吸光度。 波

5、长波长/nm吸光度吸光度投射比投射比/(%)波长波长/nm吸光度吸光度投射比投射比/(%) 2200.44635.83400.31648.3 2300.17167.43500.55927.6 2400.29550.73600.83014.8 2500.49631.93700.98710.3 2600.66323.33800.93211.7 2700.74518.03900.69520.2 2800.71219.44000.39640.2 2900.42837.34200.12475.1 3000.14970.94400.05488.2 3100.04889.54600.01896.0 3200.06386.44800.00499.1 3300.14971.05000.000100 表3-6 重铬酸钾溶液吸光度 3.散杂光的检验散杂光的检验 n由于仪器光源表面对光的反射和散射， 单色光中有一定的杂散光。杂散光可影 响摩尔吸光系数与吸光度之间的直线关 系。在仪器的光路系统中，往往采用一 定的措施避免杂散光的影响。如在721型 分光光度计中就装有保护玻璃片，以减 少杂散光的影响。杂散光的检验是在较 短波长下，测定某选定溶液的透射比。 药典规定用一定浓度的NaI或NaNO3溶液 检查，其投射比应小于规定值。 4.稳定性的检验稳定性的检验 n稳定性通常检验如下：将仪器预热后， 精确调节投