风湿性疾病的自身抗体

1、风湿性疾病的自身抗体风湿性疾病的自身抗体 风湿性疾病=5D n 痛苦（痛苦（discomfort） n 残废（残废（disability） n 死亡（死亡（death） n 药物中毒药物中毒（drug toxity） n 经济损失经济损失（dollar lost） 风湿性疾病诊断方法风湿性疾病诊断方法 n自身抗体自身抗体 n影像学检查（影像学检查（CT,MRICT,MRI） nB B超超 n病理病理 自身抗体 抗核抗体抗核抗体（AutoantibodiesAutoantibodies to Nuclear antigento Nuclear antigen）为弥）为弥 漫性结缔组织病（漫性结缔

2、组织病（CTDCTD）诊断）诊断 提供了重要血清学依据提供了重要血清学依据 抗核抗体 n自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞 及其成分的抗体 nANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白 质和酶）的抗体。ANA存在一个谱 nANA新概念：抗核酸（Nucleic acid）和 核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称 n某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质 内更丰富 ANA检测的意义 n有助于疾病的诊断，如抗Sm是SLE标记抗 体；抗ScL-70 是SD的标记抗体，抗Jo-1 是PM/DM的标记抗体 n观察疾病活动度和治疗反应 n研究发病机理 ANAANA由来由来 中性粒细胞DNP(DNA-

3、Histone) + 抗DNP + 补体 均质体 LE细胞 LE细胞：并非SLE特有，PM、SD、RA、SS等结缔组织病，药物 过敏，慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测 + ANA的筛选：间接免疫荧光法 + + 抗原 抗体（血清） 抗原抗体第二抗体 ANAANA的筛选 的筛选： ：间接免疫荧光法 间接免疫荧光法 荧光显微镜下ANA的染色型别 n均质型：与抗组蛋白和抗均质型：与抗组蛋白和抗DNADNA有关有关 n斑点型：与抗斑点型：与抗ENAENA有关有关 n周边型：与抗周边型：与抗dsdsDNADNA有关有关 n核仁型：核仁型：4-64-6sRNAsRNA n着丝点型：在着丝点型：在

4、SDSD及及CRESTCREST中出现中出现 ANA分类 n抗抗DNADNA（dsDNA,ssDNAdsDNA,ssDNA) ) n抗组蛋白（抗组蛋白（HistoneHistone) ) n抗非组蛋白（抗非组蛋白（Non-Non- histonehistone,Extractable Nuclear ,Extractable Nuclear Antigen,ENAAntigen,ENA） n抗核仁（抗核仁（NucleolusNucleolus） 抗双链DNA抗体 （短膜虫免疫荧光法 1:5） 病例数病例数 阳性率（阳性率（%） 正常人正常人 110 0 系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮 64 活动

5、期活动期 31 93.6 缓解期缓解期 33 3.0 类风湿关节炎类风湿关节炎 60 1.8 硬皮病硬皮病 13 0 多发性肌炎多发性肌炎 8 0 干燥综合症干燥综合症 15 0 白塞病白塞病 5 0 非结缔组织病非结缔组织病 222 1.7 抗组蛋白抗体 （酶联免疫吸附法X2SD) n系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮 50% n其他结缔组织病其他结缔组织病23-30% n服异烟肼服异烟肼12月以上月以上53% n服苯妥因钠服苯妥因钠6月以上月以上18% n服他巴唑服他巴唑6个月个月0 n活动期活动期SLE 90.2%阳性阳性 抗抗H1 H2A H2B H2A-H2B H3 H4H1 H2A H2

6、B H2A-H2B H3 H4 系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮 + + + + + + + + + + + 长期服异烟肼长期服异烟肼 + + + + + + + + + + + 类风湿关节炎类风湿关节炎 + + + + + + + + + + + SLE以以IgG型抗组蛋白抗体为主，而长期服烟肼型抗组蛋白抗体为主，而长期服烟肼 及及RA病人以病人以IgM型为主型为主 抗组蛋白抗体 （免疫印迹法） 几种ENA的由来及同义词 nSm：病人名：病人名：Smith nRNP: u1RNP或或nRNP Nuclear Ribonucleoprotein nSSA: RO Sjogrens syndrome

7、 A nSSB: La, Ha, Sjogrens syndrome B nJo-1: 病人病人John nScL-70: Scleroderma 常见结缔组织病的抗核抗体的阳性率 ANA dsDNA Histone Sm n RNP SSA SSB ScL-70 Jo-1 着丝点着丝点 核仁核仁 SLE 90 （62） 50 （25）40 39 10 0 0 0 6 SS 50 15 30 0 14 （75）（）（59） 0 0 0 9 SD 75 5 27 0 12 19 5 30 0 （20）（）（39） PM/DM50 13 0 5 0 0 0 (20) 0 10 RA 23 10 2

8、3 0 0 20 5 0 0 0 15+ +有指端硬化 ANA 1:40（+），抗dsDNA30%(或1：5）（+） 几种核抗原分子特性几种核抗原分子特性 Native DNA(dsDNA) Histone H1,H2A,H2B,H3,H4 Sm u1 u2 u4 u5 u6 Sn RNA 复合物三种主要核蛋白复合物三种主要核蛋白 带带:B(29), B(28); 三 种 主 要 核 蛋 白 带三 种 主 要 核 蛋 白 带 :B(29), B(28); D(16);E(13)Kd;与信使与信使 RNA 前体拼接有前体拼接有 关关. RNP(u1RNP) u1SnRNA 复 合 物复 合 物

9、二 种 主 要 核蛋 白带二 种 主 要 核蛋 白带 ： 70kd 22kd(c)及及 33kd(A). SSA/RO Y1-Y5RNA 复合物复合物，60kd 和和 52kd 核蛋白。核蛋白。 SSB/La,Ha 多聚酶转录中的多聚酶转录中的磷酸蛋白质（主要为磷酸蛋白质（主要为 48kd）. 几种核抗原分子特性几种核抗原分子特性 Ku 70kd 和和 80kd 与与 DNA 结合的蛋白质结合的蛋白质 rRNP 与胞浆中核糖体有关，与胞浆中核糖体有关，15kd,16kd,38kd 磷磷 酸蛋白酸蛋白 PCNA DNA 多聚酶， （多聚酶， （36kd） ScL-70 DNA 拓扑异构酶，拓扑异

10、构酶，100kd 天然蛋白，天然蛋白，70kd 变性蛋白变性蛋白 Jo-1 50kd/60kd 组氨酸组氨酸-tRNA 合成酶合成酶 PM-ScL(PM-1) 11 种蛋白质复合物，分子量在种蛋白质复合物，分子量在 110kd-20kd Centromere 17kd,80kd,140kd 三种染色体蛋白， 亦称着三种染色体蛋白， 亦称着 丝点蛋白丝点蛋白 小小 结结 nANA是是诊断诊断弥漫性结缔组织病的重要依弥漫性结缔组织病的重要依 据。各种抗原在其分子量、结构、功能据。各种抗原在其分子量、结构、功能 上有所不同。抗原同上有所不同。抗原同DNA的转录、拼接、的转录、拼接、 复制、翻译等作用

11、有关。研究复制、翻译等作用有关。研究ANA有利有利 于对结缔组织病发病机理的了解于对结缔组织病发病机理的了解 nANA滴度滴度不一定不一定与疾病活动性相平行，与疾病活动性相平行， 正常人、尤其老年人可有低滴度正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。 感染性疾病、肿瘤也可阳性感染性疾病、肿瘤也可阳性 小小 结结 n抗双链抗双链DNA对诊断对诊断SLE高度特异高度特异，并，并 与疾病活动有关。与疾病活动有关。DNA-抗抗DNA免疫免疫 复合物在狼疮肾炎中起重要作用复合物在狼疮肾炎中起重要作用 n抗抗Sm:是是SLE标记抗体标记抗体，帮助前瞻性，帮助前瞻性 和回顾性诊断，常与和回顾性诊断，常与nRNP抗

12、体共存抗体共存 小小 结结 n抗抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高在多种结缔组织病中存在，高 滴度有利于滴度有利于MCTD的诊断。的诊断。nRNP抗原抗原 与与rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖不同，前者是含尿嘧啶的核糖 核蛋白，主要在核内，核蛋白，主要在核内，而而rRNP是主要是主要 在胞浆内的磷酸蛋白，抗在胞浆内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与抗体与 SLE 有关，尤其有精神神经症状的有关，尤其有精神神经症状的SLE 阳性率较高阳性率较高 小小 结结 抗抗SSA和抗和抗SSB与与Sjogrens Syndrome相关相关, 并可造成并可造成新生儿新生儿狼疮和先天性心脏传导阻狼疮和先天性心脏传

13、导阻 滞滞 抗抗ScL-70: SD的的标记抗体标记抗体 抗抗Centromere与雷诺现象和与雷诺现象和CREST (Calcinosis, Raynauds phenomena, Esophageal dysmotility, Sclerodactyly, Telangiectasia)有关，但有关，但并非标记抗体并非标记抗体，在，在 干燥综合征，某些慢性肝病中亦可阳性干燥综合征，某些慢性肝病中亦可阳性 小小 结结 n抗抗Jo-1是是PM/DM的的标记抗体标记抗体，抗，抗 Jo-1阳性的肌炎患者，伴关节炎、阳性的肌炎患者，伴关节炎、 “技工手技工手”、雷诺症、肺间质变等、雷诺症、肺间质变等

14、 称合成酶抗体综合征。称合成酶抗体综合征。 n抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有 关，有助于关，有助于药物性狼疮药物性狼疮的诊断的诊断 n抗核仁型抗体常与抗核仁型抗体常与SD有关有关 抗磷脂抗体综合征 抗磷脂抗体综合征抗磷脂抗体综合征(Anti-phosholipid(Anti-phosholipid syndrome,APS)syndrome,APS)：抗磷脂抗体（：抗磷脂抗体（ACLACL）阳）阳 性，反复血管内栓塞，血小板减少，习性，反复血管内栓塞，血小板减少，习 惯性流产或胎死宫内。临床上可有肺动惯性流产或胎死宫内。临床上可有肺动 脉高压，脑病，高凝状态等脉高

15、压，脑病，高凝状态等 磷脂抗体 （Phospholipid antibody） 多见于多见于SLESLE（70%70%），），SSSS、白塞病、自身、白塞病、自身 免疫性血小板减少、真性红细胞增多、免疫性血小板减少、真性红细胞增多、 免疫性血管炎、习惯性流产、恶性肿瘤、免疫性血管炎、习惯性流产、恶性肿瘤、 多发性硬化、传染性疾病、肾上腺出血多发性硬化、传染性疾病、肾上腺出血 和和AddisonAddison病均可阳性病均可阳性 抗磷脂抗体检测 n包括：狼疮抗凝物；抗心脂抗体，包括：狼疮抗凝物；抗心脂抗体， 梅毒血清试验假阳性。梅毒血清试验假阳性。 n抗磷脂抗体还有抗磷脂氨酸（抗磷脂抗体还有抗磷

16、脂氨酸（Anti-Anti- phosphotidyl phosphotidyl serineserine）和抗磷脂）和抗磷脂 酸（酸（Anti-phosphtidilAnti-phosphtidil acid acid）抗）抗 体等。体等。 抗磷脂抗体检测 n磷脂基因中具有抗原性：心磷脂、磷脂磷脂基因中具有抗原性：心磷脂、磷脂 碱、酰丝氨酸、酰肌醇脂和酰乙醇脂等碱、酰丝氨酸、酰肌醇脂和酰乙醇脂等 n2 2GP1GP1（载脂蛋白）与磷脂结合，使其（载脂蛋白）与磷脂结合，使其 改变表面结构，暴露中被识别的抗原决改变表面结构，暴露中被识别的抗原决 定簇，而呈现磷脂抗体特性定簇，而呈现磷脂抗体特性。

17、2 2GP1GP1是是 必需的辅助因子必需的辅助因子，测，测2 2GP1GP1可能比测可能比测ACLACL 更有意义。更有意义。 抗磷脂抗体栓塞机理 n与血管内皮细胞的磷脂结合与血管内皮细胞的磷脂结合, ,使前列使前列 腺素合成减少腺素合成减少, ,血管收缩血管收缩 n与血小板膜磷脂作用与血小板膜磷脂作用, ,血小板聚集形血小板聚集形 成血栓成血栓 n直接损伤内皮细胞直接损伤内皮细胞, ,抑制纤溶酶原激抑制纤溶酶原激 活物释放而促进血栓形成活物释放而促进血栓形成 n中和中和2 2GP1GP1的抗凝的抗凝作用作用 抗磷脂抗体导致出血机理 与血小板膜或红细胞膜丝氨酸磷脂与血小板膜或红细胞膜丝氨酸磷

18、脂 结合发生聚集，和结合发生聚集，和/ /或被网状内皮系或被网状内皮系 统吞噬或破坏，使之血小板和红细统吞噬或破坏，使之血小板和红细 胞破坏，减少造成出血性紫癜，或胞破坏，减少造成出血性紫癜，或 溶血溶血 APSAPS诊断诊断 n主要临床表现：反复流产，静脉血栓，主要临床表现：反复流产，静脉血栓， 动脉闭塞，下肢溃疡，网状青斑，溶动脉闭塞，下肢溃疡，网状青斑，溶 贫，血小板减少贫，血小板减少 n高水平抗磷脂抗体加一项表现，或低高水平抗磷脂抗体加一项表现，或低 水平抗磷脂抗体加水平抗磷脂抗体加2 2项或项或2 2项以上表现项以上表现 则疑似则疑似APSAPS n合并合并SLESLE，SSSS，C

19、TDCTD，肿瘤，药物，肿瘤，药物， 感染等称为继发感染等称为继发性性APSAPS n诊断诊断APSAPS应排除血流阻滞，血凝等其应排除血流阻滞，血凝等其 他因素，排除肾病，糖尿病，高血他因素，排除肾病，糖尿病，高血 脂，肿瘤及血管炎；流产原因可为脂，肿瘤及血管炎；流产原因可为 染色体异常，内分泌，药物，感染染色体异常，内分泌，药物，感染 等因素等因素 抗中性粒细胞胞浆抗体 (ANCA) 靶抗原：中性蛋白酶靶抗原：中性蛋白酶3 3（PR3PR3），髓过），髓过 氧化物酶（氧化物酶（MPOMPO），杀菌），杀菌/ /通透性增高通透性增高 蛋白（蛋白（BPIBPI），丝氨酸蛋白酶，人白细），丝氨酸

20、蛋白酶，人白细 胞弹性蛋白酶（胞弹性蛋白酶（HLEHLE），乳铁蛋白），乳铁蛋白 （LFLF），组织蛋白酶），组织蛋白酶G G，葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸 酶，溶菌酶酶，溶菌酶 抗中性粒细胞胞浆抗体 （Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibody,ANCA） cANCAcANCA(PR3(PR3蛋白酶蛋白酶) )中性粒细胞胞浆内荧中性粒细胞胞浆内荧 光染色，其抗原是中性粒细胞颗粒内的光染色，其抗原是中性粒细胞颗粒内的 和单核细胞溶酶体的丝氨酸蛋白酶，此和单核细胞溶酶体的丝氨酸蛋白酶，此 种抗体主要种抗体主要与与WegenerWegenerss肉芽肿相关，肉芽肿相关， 且与

21、疾病活动性相平行，结节性多动脉且与疾病活动性相平行，结节性多动脉 炎也可阳性。炎也可阳性。 抗中性粒细胞胞浆抗体 （Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibody,ANCA） pANCApANCA（MPOMPO）指核周染色，并非周边型）指核周染色，并非周边型 核抗体。其抗原是胞浆内髓过氧化物酶，核抗体。其抗原是胞浆内髓过氧化物酶， 弹力蛋白酶及某些成分，此种抗体与特弹力蛋白酶及某些成分，此种抗体与特 发性新月体肾小球肾炎相关，且与疾病发性新月体肾小球肾炎相关，且与疾病 活动度相平行。显微镜下多动脉炎，结活动度相平行。显微镜下多动脉炎，结 节性多动脉炎也与之有关节性多动

22、脉炎也与之有关 类风湿因子 （Rheumatoid Factor） n抗人或动物抗人或动物的的IgGIgG的的FCFC片段抗体。其本身片段抗体。其本身 是免疫球蛋白，因此是免疫球蛋白，因此，RFRF有有IgGIgG、IgMIgM、 IgAIgA型等。型等。RFRF无种族和种属特异性无种族和种属特异性 n与与DNPDNP及半抗原（二硝基苯）有交叉反应。及半抗原（二硝基苯）有交叉反应。 7 7S IgM(IgGS IgM(IgG)-RF)-RF主要参与关节外症状的免主要参与关节外症状的免 疫复合物形成，且与疾病活动性有关疫复合物形成，且与疾病活动性有关 如何评价类风湿因子 n是诊断是诊断RARA的

23、标准之一，不是唯一标准，并非的标准之一，不是唯一标准，并非 RARA特有特有 n作为血清阴性脊柱关节病区分标准作为血清阴性脊柱关节病区分标准 n正常人正常人2%2%阳性，老年人可达阳性，老年人可达5%5%阳性阳性 nRFRF与其他蛋白、半抗原有交叉反应与其他蛋白、半抗原有交叉反应 n多种结缔组织病（多种结缔组织病（SLESLE，SDSD，SSSS，PM/DMPM/DM）感）感 染疾病（染疾病（SBESBE，TBTB，hepatitishepatitis）, ,肝硬化，肝硬化， 弥漫性肺纤维化，结节病等均可阳性弥漫性肺纤维化，结节病等均可阳性 n病后半年才产生，有关节外表现者，滴度高。病后半年才产生，有关节外表现者，滴度高。 持续高滴度持续高滴度RFRF预示疾病严重，预后差预示疾病严重，预后差 类