植物胚培养PPT学习教案

1、会计学1 植物胚培养植物胚培养 第1页/共55页 第2页/共55页 玉米成熟胚的培养玉米成熟胚的培养 霍山石斛的胚 第3页/共55页 剥离的胚胎培养剥离的胚胎培养 受精后的胚珠培养受精后的胚珠培养 受精后的子房培养受精后的子房培养 包括包括 也可以对未受精的胚珠也可以对未受精的胚珠 或子房进行培养，获得单倍体或子房进行培养，获得单倍体 第4页/共55页 山楂：自然条件山楂：自然条件9个月萌发，个月萌发， 胚培养胚培养48小时萌发。小时萌发。 第5页/共55页 定生活力。定生活力。 魔芋胚状体魔芋胚状体 柑橘：珠心组织柑橘：珠心组织 发生多个不定胚。发生多个不定胚。 第6页/共55页 合子胚合子

2、胚胚状体胚状体 质量质量萌发率高，质量好萌发率高，质量好萌发率低，质量差萌发率低，质量差 来源来源受精卵受精卵胚胚体细胞体细胞 胚柄胚柄有，明显有，明显即使有也不明显即使有也不明显 形态形态固定，体积相对较小固定，体积相对较小复杂，常有两个以上的子复杂，常有两个以上的子 叶，体积较大叶，体积较大 变异率变异率低低高高 ； 胚状体可以制成人工种子，便于运输和保存胚状体可以制成人工种子，便于运输和保存! 人工种子视频人工种子视频 第7页/共55页 成熟胚培养方法成熟胚培养方法 幼胚培养方法幼胚培养方法 子房培养方法子房培养方法 胚珠培养方法胚珠培养方法 胚乳培养方法胚乳培养方法 第8页/共55页

3、胚的发育胚的发育 第9页/共55页 18世纪世纪,胚种植在土壤中胚种植在土壤中,萌发萌发. 1890年营养液研究离体胚培养年营养液研究离体胚培养 1904年年Hanning进行萝卜进行萝卜 和辣根菜成熟胚培养和辣根菜成熟胚培养 第10页/共55页 第11页/共55页 第12页/共55页 第13页/共55页 牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖 Mature embryo culture and rapid propagation of tree peony 第14页/共55页 MSIAA1.0mg/L 。 第15页/共55页 1933年年Tukey进行桃、梨进行桃、梨

4、幼胚培养获得成功幼胚培养获得成功 第16页/共55页 第17页/共55页 植物胚胎发生过程：植物胚胎发生过程： 原胚球形胚心型胚鱼雷胚子叶胚原胚球形胚心型胚鱼雷胚子叶胚 胚发育视频胚发育视频 第18页/共55页 球形胚前期球形胚前期 心心 型型 胚胚 前前 期期 鱼雷胚鱼雷胚 球形胚球形胚 胚的发育程度与胚的萌发胚的发育程度与胚的萌发 成活率呈正相关成活率呈正相关 胚的剥离以受精后胚的剥离以受精后 35天左右为宜天左右为宜. 心型胚、鱼雷胚较好心型胚、鱼雷胚较好 第19页/共55页 （1）培养基）培养基 A、无机盐：、无机盐： a 幼胚培养有幼胚培养有MS、B5等培养基，等培养基， 可使可使K

5、+、Ca2+水平稍高。水平稍高。 2、影响胚培养的因素、影响胚培养的因素 第20页/共55页 糖的作用：糖的作用： 调节渗透压；碳源；防止幼胚早萌。调节渗透压；碳源；防止幼胚早萌。 渗透压的保持对于幼胚培养相当重要渗透压的保持对于幼胚培养相当重要 。最适蔗糖浓度随着胚的发育时期而。最适蔗糖浓度随着胚的发育时期而 降低。降低。 B、碳水化合物：、碳水化合物： 第21页/共55页 成熟胚一般不需要外源激素即可萌发。但成熟胚一般不需要外源激素即可萌发。但 激素能促进休眠胚的萌发。激素能促进休眠胚的萌发。 幼胚需要外源激素，应保持外源激素与内幼胚需要外源激素，应保持外源激素与内 源激素的平衡。过低则不

6、能促进生长，过源激素的平衡。过低则不能促进生长，过 高则易导致幼胚脱分化形成愈伤。高则易导致幼胚脱分化形成愈伤。 C、植物激素的作用：、植物激素的作用： 第22页/共55页 银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用（银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用（ 19341934）；曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能很）；曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能很 好的促进幼胚的发育好的促进幼胚的发育(200-500um(200-500um的幼胚的幼胚) ) （19411941 ）。）。 此外，大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物此外，大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物 、水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。、水解酪蛋白等都

7、能促进幼胚的发育。 第23页/共55页 A、温度：、温度： 多数为多数为25-30，因植物种类有所差别，因植物种类有所差别 。 B、光照：、光照： 一般认为黑暗或弱光条件较为合适。一般认为黑暗或弱光条件较为合适。 （2）环境条件）环境条件 第24页/共55页 第25页/共55页 第26页/共55页 黄瓜杂种幼胎黄瓜杂种幼胎 黄瓜杂种幼胎培养黄瓜杂种幼胎培养 第27页/共55页 黄瓜杂种幼胎培养苗黄瓜杂种幼胎培养苗 第28页/共55页 胚乳培养胚乳培养是指将胚乳从母体上是指将胚乳从母体上 分离出来，在无菌的环境条件分离出来，在无菌的环境条件 下培养，使其生长发育形成幼下培养，使其生长发育形成幼

8、苗的过程。苗的过程。 第29页/共55页 1、胚乳培养过程、胚乳培养过程 第30页/共55页 胚乳培养过程胚乳培养过程 胚乳胚乳 胚状体发育成苗胚状体发育成苗 不定芽苗不定芽苗 愈伤组织愈伤组织形态发生形态发生 第31页/共55页 培养基培养基 培养条件培养条件 第32页/共55页 第33页/共55页 （1）胚乳培养胚乳培养可得到三倍体植株，产生可得到三倍体植株，产生 无籽果实。或加倍形成六倍体植株进行育无籽果实。或加倍形成六倍体植株进行育 种。种。 （2）胚乳培养胚乳培养可得到倍性不同的愈伤组可得到倍性不同的愈伤组 织，可分离和筛选各种类型的非整倍体植织，可分离和筛选各种类型的非整倍体植 株

9、。株。 第34页/共55页 倒生胚珠倒生胚珠 第35页/共55页 （1）、受精胚珠的培养）、受精胚珠的培养 （2）、未受精胚珠的培养）、未受精胚珠的培养 示胚珠的位置示胚珠的位置 第36页/共55页 3、胚珠培养的基本过程：、胚珠培养的基本过程： （2）胚珠的发育：）胚珠的发育： A 受精胚珠：一是形成种子；二受精胚珠：一是形成种子；二 是形成愈伤组织是形成愈伤组织 B 未受精胚珠：形成单倍体植株未受精胚珠：形成单倍体植株 。 （1）培养基：）培养基：White,Nitsch,MS培养基培养基 第37页/共55页 （1 1）受精胚珠培养目的受精胚珠培养目的： 一是打破种子的休眠；一是打破种子的

10、休眠； 二是挽救胚的发育，以获得杂交种。二是挽救胚的发育，以获得杂交种。 （2 2） 未受精胚珠培养目的未受精胚珠培养目的： 获得单倍体植株。获得单倍体植株。 第38页/共55页 类型类型 授粉子房的培授粉子房的培 养养 未授粉子房的培养未授粉子房的培养 第39页/共55页 （3）培养基）培养基:N6,MS培养基培养基 第40页/共55页 单核胚囊单核胚囊 3个反足细胞（合点端个反足细胞（合点端N） 8核胚囊核胚囊 1个中央细胞（中央个中央细胞（中央2X1N） (7细胞胚囊细胞胚囊) 2个助细胞（珠孔端个助细胞（珠孔端N） 1个卵细胞（珠孔端个卵细胞（珠孔端N） 三次有丝分三次有丝分 裂裂 胚

11、囊发育过程胚囊发育过程 ： 第41页/共55页 3、子房培养的发育：、子房培养的发育： 第42页/共55页 第43页/共55页 玉米玉米 红豆杉红豆杉 番茄番茄 苹果苹果 第44页/共55页 玉米成熟胚的培养玉米成熟胚的培养 第45页/共55页 2、红豆杉成熟胚培养、红豆杉成熟胚培养 第46页/共55页 红豆杉成熟胚培养红豆杉成熟胚培养 （1）南方红豆杉Taxus chinensis var.mairei 成熟胚为外植体, 第47页/共55页 红豆杉成熟胚培养红豆杉成熟胚培养 （2）木本植物培养 基（WPM） 为胚培养的最适基本 培养基。 （3）细胞激动素（KT）0.1mgL-1和玉米素 （Z

12、T）1.0mgL-1最有效于不定芽的诱导,不 定芽为丛生芽。 第48页/共55页 （4）芽长成嫩枝后的转 移到含或 和 的 培 养基上分化出根，形成 再 生小植株 第49页/共55页 红豆杉成熟胚培养红豆杉成熟胚培养 （5）再生植株的 移栽容易成活。 第50页/共55页 (1)(1)、外植体制备、外植体制备：授粉后：授粉后30-40d30-40d收获果皮完整的果实，收获果皮完整的果实， 果实放入果实放入95%95%乙醇中表面消毒，浸在乙醇中表面消毒，浸在5%NaCI5%NaCI中中5min5min， 用无菌蒸馏水充分淋洗。果实放在无菌吸水纸上，除去用无菌蒸馏水充分淋洗。果实放在无菌吸水纸上，除去 种子上的胶状复被。种子上的胶状复被。 (2)(2)、培养基、培养基：启动：启动：MS+MS+硫胺素硫胺素0.3mg/L+2,4-D2mg/L+0.3mg/L+2,4-D2mg/L+ 椰乳椰乳100ml/L100ml/L，pH6.0pH6.0；继代：；继代： MS+ 2,4-D2mg/LMS+ 2,4-D2mg/L；分化；分化 ：MS+BA1.5mg/LMS+BA1.5mg/L；生根：；生根：MS+NAA2mg/LMS+NAA2mg/L。 (3