高效液相色谱法测定格列齐特缓释片中格列齐特的含量

1、高效液相色谱法测定格列齐特缓释片中格列齐特的含量 摘要目的：建立测定格列齐特缓释片含量的方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为hypersil ods2(4.6 mm250 mm，5 m)；流动相为甲醇-水(6040，冰醋酸调至ph 3.3)，检测波长为228 nm。结果：精密度及稳定性均良好；在0.66 g/ml浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系，相关系数为0.999 1，平均回收率为99.18%，rsd为1.27%。格列齐特与其他杂质峰的分离度均符合要求。结论：该方法简便，重现性好，可用于测定格列齐特缓释片中格列齐特的含量。 关键词格列齐特缓释片；高效液相色谱法；含量测定 中图分类

2、号r917 文献标识码a 文章编号1673-7210（2007）07（a）-141-02 格列齐特缓释片是由格列齐特和缓释基质、辅料，按一定配比及特定的制剂工艺制备而成。格列齐特为第二代磺脲类降血糖药，临床上用于单用饮食控制治疗不满意的轻、中度非胰岛素依赖型糖尿病。格列齐特缓释片的规格为30 mg，最大吸收波长为228 nm。因吸收波长较短，给测定带来一定困难。经参照文献1，2进行色谱条件优化，采用ods2柱成功测定了该制剂中格列齐特的含量。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 waters-alliance高效液相色谱仪，996二极管阵列检测器，as230自动进样器，at-330柱温箱，hw

3、2000色谱工作站，bp211d电子天平；甲醇为色谱纯，冰醋酸为分析纯；水为超纯水；格列齐特对照品(中国药品生物制品检定所批号100269-200402)；格列齐特缓释片（成都恒瑞制药有限公司批号050812，050816，050902）。 1.2 方法 1.2.1 色谱条件色谱柱hypersil ods2(4.6 mm250 mm，5 m)；流动相：甲醇-水(6040，冰醋酸调至ph3.3)；检测波长228 nm；流速1.0 ml/min；进样量20 l；柱温:25。理论塔板数按格列齐特峰计算不低于3 000。 1.3 供试品溶液与对照品溶液的制备 1.3.1 对照品溶液取格列齐特对照品适量

4、，精密称定，置100 ml容量瓶中，加ph7.2磷酸盐缓冲液80 ml，超声振荡5 min，使之溶解，用缓冲液稀释至刻度，摇匀，制成1ml含0.3 mg的溶液，作为对照品溶液。 1.3.2 供试品溶液取20片格列齐特缓释片，精密称定，研磨成粉，精密称取适量(相当于含格列齐特30 mg)，置于100 ml容量瓶中，加ph7.2磷酸盐缓冲液80 ml，超声振荡5 min，使之溶解，用缓冲液稀释至刻度，摇匀，用0.45 m滤膜过滤，弃去初滤液，精密吸取续滤液1 ml，置10 ml容量瓶中，用ph7.2磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即得供试品储备液。 1.4 测定方法 分别吸取对照品溶液和供试品溶液2

5、0 l进行分析，根据色谱峰面积，以外标法计算样品含量。 2 结果 2.1 线性实验 精密吸取格列齐特对照品溶液5 ml置50 ml容量瓶中，用缓冲液稀释定容制成0.03 mg/ml的标准贮备液(1)；吸取贮备液(1)10 ml，置50 ml容量瓶中，用缓冲液制成6 g/ml贮备液(2)。分别吸取贮备液(2)1.0，2.0，5.0，8.0，10.0 ml，置10 ml容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度，分别进样20 l，以浓度(x)为横坐标，峰面积(y)为纵坐标，进行回归，回归方程为:y=1.599104x+3.27102，（r=0.999 1，n=5)；线性范围: 0.66.0 g/ml；信噪比s/

6、n=3时，格列齐特样品的最小检测浓度为0.15 g/ml。 2.2 回收率实验 按处方配比，称取辅料适量，按高、中、低浓度分别添加一定的对照品溶液，按照供试品溶液项下方法操作，依法测定，结果见表1。 2.3 稳定性和精密度实验 取供试品溶液，分别在0，1，2，4，6，8 h进样20 l，测定峰面积，rsd为0.62%，结果表明样品溶液在8 h内稳定。供试品连续进样6次，其标示百分含量的rsd为0.53%，结果表明进样精密度好。 2.4 重复性实验 取同批号样品6份，按照“2.2，2.3”项下方法操作，即得6份同批号样品的供试品溶液，各吸取20 l进样，计算含量，rsd为0.83%，结果表明重现

7、性较好。 2.5 含量测定 按照“2.2，2.3”项下操作，测定样品批号为050812，050816，050902的格列齐特缓释片中格列齐特的含量。测定结果显示含量分别为101.8%，103.5%，102.1%。对照品及供试品的色谱图见图1(a，b)，样品中该成分的保留时间为8.9min，按处方比例制备的空白辅料样品，其色谱图在组分出峰位置没有干扰，见图1(c)，经酸破坏的分解产物色谱图见图1(d)。 3 讨论 本实验中参考有关文献1,2确定检测格列齐特缓释片的色谱条件。结果表明，格列齐特在228 nm波长处有较强吸收，主成分保留时间较好，且不受辅料及其他成分干扰，重现性好。曾比较不同品牌的色谱柱，结果表明，虽然ods柱均适于测定，但用hypersil ods2(4.6 mm250 mm，5 m)时，峰形较好，且能与格列齐特酸破坏分解产物良好分离(因无格列齐特水解产物标准品)。 参考文献 1孙建国，高凌，王广基，等. 格列齐特片的人体药动学及其相对生物利用度研究j.中国药科大学学报，1998，29(3):67-70.