HPLC测定片剂中富马酸福莫特罗共4资料

1、HPLC测定片剂中富马酸福莫特罗富马酸福莫特罗是一种长效 B2-受体激动剂，临床上用于缓解由支气 管哮喘、急性支气管炎、喘息性支气管炎或肺气肿等气道阻塞性疾病引起 的呼吸困难等症状。目前，片剂中富马酸福莫特罗的检测方法以采用紫外 检测器或二极管阵列检测器的液相色谱法为主 1-4 。本文将反相 -高效液 相色谱-电化学法检测(RP-HPLC-ECD用于片剂中富马酸福莫特罗测定的 研究。1 仪器与试剂安科TCL-16C离心机；HP1100高效液相色谱仪，包括四元梯度泵，二 极管阵列检测器和电化学检测器，色谱数据通过HP工作站采集获得；DL-180型超声清洗器；IX-501型pH计；WG-2003台

2、式干燥箱；Milli-QG 超纯水制备仪。富马酸福莫特罗购自美国 Sigma公司，纯度均99%甲醇为色谱纯； 冰醋酸为分析纯；所用水为超纯水；盼得欣药片由天津力生制药股份有限 公司生产。2 溶液制备2.1 对照品溶液的制备准确称取富马酸福莫特罗对照品适量，置于25mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并定容，振荡均匀后得富马酸福莫特罗(1.00 X 102口 g?mL -1 )单 一对照品储备液。其它不同浓度的各对照品溶液由单一储备液混合稀释得 到。2.2 供试品溶液的制备称取适量散装盼得欣药片，研细，取其粉末 0.0400g ，精密称定，置 于50mL锥形瓶中。然后，准确加入甲醇 25.00mL,称定其

3、重量。用频率为 35土 5%KH，功率为180W超声仪超声10min，取出，放冷后，再称定重量， 然后用甲醇补足减失的重量，振荡均匀。取出3mL溶液于5mL离心管中，3000r?min-1离心5min，吸取上清液并用0.45艸微孔滤膜滤过，即得供 试品溶液。盼得欣供试品溶液的制备同上。3 色谱条件采用长度为150mm外径为4.6mm和内径为5.0?m的ZorbaxSB-C18色 谱柱；流动相包括（A）甲醇、（B）水-冰醋酸（pH=3.00）。采用梯度洗脱， 其洗脱程序如下：0min时A-B （10: 90），10min时A-B （40: 60），流速 为1.0mL?min-1 ; ECD的工作

4、电位为1.0V，柱温为30C。按上述条件获得 的对照品（A）和样品（B）的色谱图见图1。富马酸福莫特罗的保留时间 为 10.98min 。4 实验与结果4.1 线性关系考察准确移取“2 溶液制备”中“ 2.1 ”项下所配制的一定体积的富马酸 福莫特罗对照品储备液于 10mL量瓶中，用甲醇定容，配制富马酸福莫特 罗浓度分别为 3.12 X 10-1，6.25 X 10-1，3.12，6.25，1.25 X 10， 5.00 X 10卩g?mL-1的系列混合对照品溶液，用0.45 m的微孔滤膜滤过。取此对照品溶液10.0卩L,按“3”项所述色谱条件进样，平行测定3次，以平均峰面积积分值 Y对浓度C

5、 （卩g?mL-1 ）进行线性回归，获得富马酸 福莫特罗的回归方程。其相关参数、相关系数、线性范围见表 1。结果表 明：富马酸福莫特罗在 3.1 X 10-15.0 X 10卩g?mL-1范围内，线性关系 良好。表 1 两种化合物的回归方程相关参数和线性范围（n=3）4.2 加样回收率实验准确称取已知含量的盼得欣粉末9份，每份30mg将其分别置于25mL量瓶中，每 3 份为 1 组。往三组盼得欣样品中，分别准确加入浓度为1.0 X 102口 g?mL-1的富马酸福莫特罗对照品溶液1.6mL, 0.6mL和0.1mL。按照“2溶液制备”中“ 2 .2 ”项所述方法制备溶液后， 按照本实验中所描述

6、的色谱条件进样，进样量 10.0卩L,重复进样3次，采用外标法计算加 入对照品后供试品溶液中富马酸福莫特罗的含量，三种不同浓度的加样回 收率及相对标准偏差（表 2）。4.3 精密度、重复性和稳定性实验精密量取“2 溶液制备”中“ 2.1 ”项下所配制的一定体积的富马酸福莫特罗对照品储备液于 10mL量瓶中，用甲醇定容，配制成相应的对照 品溶液，用0.45 ym的微孔滤膜滤过。按照本实验中所描述的对照品溶液 的制备方法和所选择的色谱条件进样，连续测定6次，每次10.0 y L,计算富马酸福莫特罗的含量的RSD分别为4.1%。准确称取盼得欣片剂粉末（0.0300g ）各5份，按照“2溶液制备”中“

7、2.2”项所述方法制备溶液后，按“ 3”项所述色谱条件下进行分析，计 算富马酸福莫特罗的含量的RSD分别为1.6%。对供试品溶液在8h之内每隔1h进样10.0 y L，记录色谱峰面积，测得富马酸福莫特罗的含量的RSD分别为1.2%和 1.8% ;对供试品溶液在8d内每隔24h进样10.0卩L,记录色谱峰面积，测得富马酸福莫特罗的峰面 积积分值的RSD分别为4.3%。4.4 样品分析分别称取不同批号的药片三份， 按“2溶液制备”中“ 2 .2 ”项所述方法制备供试品溶液，移取10.0 u L,按“3”项所述色谱条件测定硫酸沙丁 胺醇富马酸福莫特罗的峰面积， 采用标准曲线法计算其含量， 结果见表 35 结论建立了市售片剂中硫酸沙丁胺醇和富马酸福莫特罗的高效液相色谱 - 电化学测定新方法。与文献报道 2-3 的方法相比，本法具有线性范围宽 的优点。希望