第04章药物定量分析与分析方法验证-2013年

1、 汤南汤南1 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点2 药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证3 样品的前处理方法样品的前处理方法第一节第一节 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点化学分析法化学分析法光谱分析光谱分析法法色谱分析法色谱分析法重量分析法重量分析法容量分析法容量分析法紫外分析法紫外分析法UVUV荧光分析法荧光分析法FIAFIA高效液相色谱高效液相色谱HPLCHPLC气相色谱气相色谱GCGC一、容量分析法（滴定）一、容量分析法（滴定）容量分析：将容量分析：将已知浓度的滴定液已知浓度的滴定液由滴定由滴定管滴加到待测药物的溶液中，直到所滴管滴加到待测药物的

2、溶液中，直到所滴加滴定液与被测药物按加滴定液与被测药物按化学计量化学计量反应完反应完全为止，然后根据全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗滴定液的浓度和消耗的体积的体积，计算出被测药物的含量。，计算出被测药物的含量。v特点：特点：灵敏度低，准确，专属性差，通灵敏度低，准确，专属性差，通常用于常用于原料药的含量测定原料药的含量测定。v滴定方式滴定方式 直接滴定法直接滴定法 生成物生成物滴定法滴定法 剩余量剩余量滴定法滴定法 v计算计算l滴定度滴定度：1mL1mL某物质的量浓度的某物质的量浓度的滴定滴定液液相当于相当于被测药物的重量被测药物的重量，中国药典，中国药典用用mgmg表示表示。量纲。量纲mg

3、/mlmg/ml。l滴定度的计算滴定度的计算：MbaCTT T滴定度滴定度(mg/ml) (mg/ml) c c滴定液浓度滴定液浓度(mol/L)(mol/L)MM被测物质分子量被测物质分子量 IIVitCH去去氢氢抗抗坏坏血血酸酸2l)8.806(mg/m11176.13050.MCTba以以I2（0.05mol/L）计，反应摩尔比计，反应摩尔比 1 1例例l百分含量百分含量 1.直接滴定法直接滴定法 含量含量%=%100WTV校正系数（校正系数（F）规定实际CCF规定实际CTCT%100WTV含量含量%=例例精密称取苯巴比妥钠精密称取苯巴比妥钠0.2071g，依法用硝酸，依法用硝酸银滴定液

4、银滴定液(0.1001mol/L)滴定。消耗滴定。消耗8.02mL，每每1mL硝酸银滴定液硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于相当于25.75mg的苯巴比妥钠。计算含量。的苯巴比妥钠。计算含量。2.剩余滴定法剩余滴定法含量含量%=%100)(WTFVFVBBAA%100)(0WFTVVB含量含量%= 司可巴比妥钠（司可巴比妥钠（Ch.P） 取本品取本品约约0.1g，精密称定精密称定，置，置250ml碘瓶中，碘瓶中，加水加水l0ml，振摇使溶解，振摇使溶解，精密精密加溴滴定液加溴滴定液(0.05mol/L)25m1，再加盐酸，再加盐酸5m1，立即密塞并，立即密塞并振摇振摇1min，在暗处静置，

5、在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液加碘化钾试液l0ml，立即密塞，摇匀后用硫代硫，立即密塞，摇匀后用硫代硫酸钠滴定液酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，滴定，至近终点时至近终点时，加淀，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每果用空白试验校正。每lml溴滴定液溴滴定液(0.05mol/L)相当于相当于13.01mg的的C12H17N2NaO3。例例1.1.原理原理 Br2 ( (定量过量定量过量) )1C12H17N2NaO31Br2二、光谱分析法二、光谱分析法通过测定被测物质在通过测定被测物质在

6、光谱的特定波长光谱的特定波长处或一定波长范围处或一定波长范围内的内的吸光度或发光吸光度或发光强度强度，对该物质进行定性或定量分析，对该物质进行定性或定量分析的方法。的方法。紫外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法荧光分光光度法荧光分光光度法定量分析基本原理定量分析基本原理 朗伯朗伯- -比尔定律比尔定律 A=ECL紫外光区：紫外光区：200400nm可见光区：可见光区：400760nml紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法特点：特点： 仪器便宜；易操作仪器便宜；易操作。 灵敏度高灵敏度高(10-410-7 g/mL) 准确度高准确度高（一）对（一）对溶剂的要求溶剂的要求 A尽量小尽量小（二）

7、空白（二）空白对照试验对照试验 清零清零（三）测定波长确证三）测定波长确证 紫外区允许误差紫外区允许误差1nm（四）（四）供供试液的浓度试液的浓度 A=0.30.7 吸收吸收度的测定要求度的测定要求含量测定含量测定1.1.吸收系数法（不需要对照品）吸收系数法（不需要对照品）测定测定 处吸收度，以该物质在规定条件处吸收度，以该物质在规定条件下的吸收系数计算下的吸收系数计算。 含量含量 100100WDC lcEA%1cm1 100LEAg/mlC %1cm1 ）（盐酸氯丙嗪含量测定盐酸氯丙嗪含量测定:精密称取精密称取0.2368g，置，置500ml量量瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密

8、瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液量取续滤液1ml，置，置100ml量瓶中，加同一溶剂稀释量瓶中，加同一溶剂稀释至刻度，摇匀，在至刻度，摇匀，在254nm波长处测得吸收度为波长处测得吸收度为0.435，按按 为为915计算，求其百分含量。计算，求其百分含量。例百分含量4 .100%1002368. 0500100100915435. 0%100WD100%11lEAcm1%1cmE2.对照品比较法对照品比较法配制配制供试品溶液和对照品供试品溶液和对照品溶液，测定溶液，测定处处吸收度。吸收度。（1）外标一点法）外标一点法 C待测待测C对照对照 含量含量 100 供供试品与对照

9、品溶液中的被测试品与对照品溶液中的被测成分的量应成分的量应 尽可能尽可能一致一致（要求对照品量为供试品量（要求对照品量为供试品量 10010%）。对照待测AAWDC （2）标准曲线）标准曲线法（多点法（多点对照）对照） 绘制绘制对照液浓度吸光度标准曲线对照液浓度吸光度标准曲线（3-5点）点） 拟合拟合回归方程，求出供回归方程，求出供试液浓度。试液浓度。标准曲线标准曲线3. 计算计算分光光度法分光光度法 多多波长校正计算分光光度法波长校正计算分光光度法双波长分光光度法双波长分光光度法三波长分光光度法三波长分光光度法导数光谱法导数光谱法解联立方程法解联立方程法激发波长激发波长发射波长发射波长（激发

10、光谱）（激发光谱）（发射光谱）（发射光谱）l荧光分析法荧光分析法特点：特点：灵敏度较紫外高、选择性好灵敏度较紫外高、选择性好 (10-1010-12 g/mL)； 应应在低浓度下进行；在低浓度下进行； 干扰干扰因素较多，须进行空白校正因素较多，须进行空白校正； 能产生荧光的物质较少，可采用荧光能产生荧光的物质较少，可采用荧光 衍生化处理。衍生化处理。 思考：物质结构产生荧光的条件？思考：物质结构产生荧光的条件？含量测定原理含量测定原理 当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件一定时，在条件一定时，在较稀浓度较稀浓度范围内药物的荧光范围内药物的荧光强度与溶液中

11、该物质的强度与溶液中该物质的浓度成正比。浓度成正比。荧光强度荧光强度浓度浓度对照品对照品比较法比较法由于绝对荧光强度难以测定，需要在每次测由于绝对荧光强度难以测定，需要在每次测定前用一定浓度的对照品溶液校正仪器灵敏定前用一定浓度的对照品溶液校正仪器灵敏度，然后读取对照品溶液、供试品溶液及各度，然后读取对照品溶液、供试品溶液及各自溶剂的空白读数。自溶剂的空白读数。 C C待测待测C C对照对照由于浓度线性范围较窄，由于浓度线性范围较窄， 应应在在0.52.0之间。之间。对照空白试剂对照待测空白试剂待测RRRR对照空白试剂对照待测空白试剂待测RRRR三、色谱分析法三、色谱分析法v 高效液相色谱法（

12、高效液相色谱法（HPLCHPLC）v气相色谱法（气相色谱法（GCGC）固定相固定相色谱过程色谱过程流动相被分离组分l高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC）固定相、流动相及检测器固定相、流动相及检测器的选择的选择常用系统常用系统固定相固定相（色谱柱）（色谱柱）：十八烷基硅烷键合硅：十八烷基硅烷键合硅 胶胶C C1818流动相：甲醇流动相：甲醇- -水、乙腈水、乙腈- -水水检测器：紫外吸收检测器检测器：紫外吸收检测器检测器检测器： 紫外检测器（紫外检测器（UVD 最常用）最常用）荧光检测器荧光检测器示差折光检测器示差折光检测器电化学检测器电化学检测器二极管阵列检测器（二极管阵列检测器（DAD

13、）蒸发光散射检测器（蒸发光散射检测器（ELSD）质谱检测器（质谱检测器（MS）系统适用性系统适用性试验试验 用用规定的对照品对仪器进行试验和调整规定的对照品对仪器进行试验和调整 理论板理论板数（数（n） 分离度分离度（R） 重复性（重复性（RSD） 拖尾因子（拖尾因子（T）含量测定方法含量测定方法外标法外标法内标法内标法外标一点法外标一点法标准曲线法标准曲线法1.1.外标一点法外标一点法 被测成分浓度与其峰面积被测成分浓度与其峰面积成正比成正比关系关系 要求供试液与对照液要求供试液与对照液浓度相近浓度相近=A供供A对对C供供对对样品样品C供供=C对对A供供A对对对照对照2.标准曲线法标准曲线法

14、 绘制浓度峰面积绘制浓度峰面积(峰高峰高)标准曲线；标准曲线； 拟合回归方程并计算拟合回归方程并计算相关系数相关系数r； A = aC + b 测定供试品峰面积测定供试品峰面积(峰高峰高)，带入方程，求，带入方程，求出浓度。出浓度。选择适宜的物质作为内标物选择适宜的物质作为内标物，以，以待测组分和内待测组分和内标物的峰高比或峰面积比标物的峰高比或峰面积比求算试样含量的方法求算试样含量的方法称为内标法。称为内标法。 校正因子（校正因子（f ） 其含义为：内标物其含义为：内标物峰面积与其峰面积与其浓度之比（浓度之比（As/Cs）是）是对照品对照品峰面积与其浓度之峰面积与其浓度之比（比（AR/CR）

15、的多少倍。）的多少倍。RRCACsAsf/）校正因子（3.内标法内标法对照对照+内标内标样品样品+内标内标样品样品内标内标对照对照内标内标校正因子校正因子 f =(A=(A内内/ C/ C内内)/(A)/(A对对/C/C对对) )/CssxxCAAf黄体酮的含量测定黄体酮的含量测定v内标内标溶液的制备：取己烯雌酚溶液的制备：取己烯雌酚25.0mg，置于，置于25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。v测定：取黄体酮对照品测定：取黄体酮对照品25.6mg，置于，置于25mL量瓶中，量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液加甲醇溶解并稀释至刻度

16、，摇匀，精密量取该溶液与内标溶液各与内标溶液各5mL，置于，置于25mL量瓶中，加甲醇稀量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。取释至刻度，摇匀。取5L注入液相色谱仪，记录色注入液相色谱仪，记录色谱图，测得黄体酮峰面积为谱图，测得黄体酮峰面积为537808，己烯雌酚峰面，己烯雌酚峰面积积503246；v另取样品另取样品24.6mg，按同法测定。记录色谱图，测得，按同法测定。记录色谱图，测得黄体酮峰面积为黄体酮峰面积为519397，己烯雌酚峰面积，己烯雌酚峰面积497048，求黄体酮的百分含量。（求黄体酮的百分含量。（101.8%）例 色谱柱：填充柱和毛细管柱色谱柱：填充柱和毛细管柱 检测器检测器： 氢

17、火焰离子化检测器（氢火焰离子化检测器（FIDFID） 电子捕获检测器（电子捕获检测器（ECDECD） l气相色谱法（气相色谱法（GC）色谱系统色谱系统系统适用性试验：系统适用性试验：同同HPLC法法含量测定：含量测定： 以内标法为主，操作及计算方法同以内标法为主，操作及计算方法同HPLCHPLC法法第二节第二节 药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证一、目的一、目的 证明所用的分析方法适合相应的证明所用的分析方法适合相应的检验要求。检验要求。 （一）起草新药质量标准时（一）起草新药质量标准时 （二）改变生产工艺时（二）改变生产工艺时 改变改变制剂处方制剂处方 修订修订原分析方法时原分

18、析方法时二、用途二、用途三、需验证的分析项目三、需验证的分析项目v 鉴别鉴别v 检查：检查：杂质定量或限度检查杂质定量或限度检查v 含量测定：含量测定：原料药或制剂中有效成原料药或制剂中有效成分及制剂中其他成分（如降解产物、分及制剂中其他成分（如降解产物、防腐剂防腐剂等）。等）。四、验证指标四、验证指标准确度准确度 精密度精密度专属性专属性 检测限检测限定量限定量限 线性线性范围范围 耐用性耐用性（一）准确度（一）准确度 测定结果与真实值或参考值接近程度测定结果与真实值或参考值接近程度 用百分回收率表示。用百分回收率表示。 测定测定回收率回收率R R（recoveryrecovery）的具体方

19、法可采）的具体方法可采用用“回收试验法回收试验法”和和“加样回收试验法加样回收试验法”。 l 原料药：用已知浓度的对照品测定，或将原料药：用已知浓度的对照品测定，或将本法测定结果与另一已建立准确度的方法本法测定结果与另一已建立准确度的方法的测定结果相比。的测定结果相比。1. 1. 含量测定方法的准确度含量测定方法的准确度%100%加入量测得量）回收率（制剂：采用在空白辅料中加入原料药对制剂：采用在空白辅料中加入原料药对照品的方法。照品的方法。 如不能得到制剂的全部组分，可向如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，制剂中加入已知量的被测物进行测定，或与另一个已建立准确度的

20、或与另一个已建立准确度的方法比较结方法比较结果。果。%100%加入量本底量测得量）回收率（2. 杂质定量测定杂质定量测定的准确度的准确度v向向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。定结果与另一成熟的方法进行比较。数据要求：数据要求： 规定的范围内，至少用规定的范围内，至少用9 9次测定结果评次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。价，如制备三个不同浓度样品各测三次。（二）精密度（二）精密度同一均匀样品，经多次取样测定，所得结同一均匀样品，经多

21、次取样测定，所得结果之间的接近程度。果之间的接近程度。%100 xSDRSD 1nxxSDn1i2i 标准偏差标准偏差相对标准偏差相对标准偏差*重复性重复性 同人、仪器、时间同人、仪器、时间* *中间精密度中间精密度 同室，但不同人、仪器、时间同室，但不同人、仪器、时间 * *重现性重现性 不同地方协同检验不同地方协同检验（三）专属性（选择性）（三）专属性（选择性） 在有其他成分（杂质、降解产物、辅料在有其他成分（杂质、降解产物、辅料等）可能存在时，该分析方法对待测组分准等）可能存在时，该分析方法对待测组分准确而专属的测定能力。确而专属的测定能力。 鉴别反应、杂质检查、含量测定鉴别反应、杂质检

22、查、含量测定方法均方法均应考察。应考察。v 鉴别反应鉴别反应：用不含被测成分的供试品，应：用不含被测成分的供试品，应呈负反应。呈负反应。v含量测定和杂质检查含量测定和杂质检查： 试样中加入杂质或辅料，考察是否干扰。试样中加入杂质或辅料，考察是否干扰。 加速破坏试验（强光照射、高温、高湿、加速破坏试验（强光照射、高温、高湿、酸碱水解、氧化），研究可能的降解产物酸碱水解、氧化），研究可能的降解产物和降解途径，检查色谱分离情况。和降解途径，检查色谱分离情况。（四）检测限LOD样品中待测组分能被检测出的最低量。样品中待测组分能被检测出的最低量。是限度试验参数，无需定量测定。常用是限度试验参数，无需定量

23、测定。常用%、ppm、ppb表示。表示。非仪器分析法非仪器分析法- -目视法目视法 能观察到实验现象的最低浓度为检测限能观察到实验现象的最低浓度为检测限仪器分析法仪器分析法空样样S3ACLOD 色谱法色谱法：按信噪比（按信噪比（S/N）3:1或或2:1时的相时的相应浓度或进样量为检测限。应浓度或进样量为检测限。 分光光度法分光光度法：用：用空白样品空白样品进行分析，进行分析，求得方求得方法背景响应值的标准偏差法背景响应值的标准偏差S S空空。（五）定量限（五）定量限 LOQ 样品中被测组分能被定量测定的最低量样品中被测组分能被定量测定的最低量（应达到一定的准确度和应达到一定的准确度和精密度精密

24、度）。）。 常用常用%、ppm、ppb表示表示 非仪器分析法非仪器分析法 用已知浓度的样品确定定量限，将测定用已知浓度的样品确定定量限，将测定结果计算准确度和精密度结果计算准确度和精密度 仪器分析法仪器分析法按按信噪比信噪比10:1时的相应浓度或进样量为定量限时的相应浓度或进样量为定量限NLOD: S/N=3LOQ: S/N=10检测限与定量限的区别在于检测限与定量限的区别在于1.检测限是以信噪比检测限是以信噪比(2：1)来确定，而定量限来确定，而定量限是以信噪比是以信噪比(10：1)来确定。来确定。2.定量限规定的最低浓度应符合一定的精密度定量限规定的最低浓度应符合一定的精密度和准确度要求和

25、准确度要求。 （六）线性（六）线性 是是指在一定范围内，样品浓度与检测结果指在一定范围内，样品浓度与检测结果的的线性关系。线性关系。 线性回归线性回归 y a + bx相关系数相关系数 r 越接近越接近1越好越好（七）范围（七）范围 指在达到一定指在达到一定精密度、准确度和线性精密度、准确度和线性的的条件下，该方法适用的高低浓度或量条件下，该方法适用的高低浓度或量的区间。的区间。适宜检测范围适宜检测范围原料或制剂原料或制剂 测试浓度的测试浓度的 80%120%含量均匀度含量均匀度 70%130%溶出量溶出量 下限下限80%上限上限120%标准曲线的高低浓度范围即为线性范围标准曲线的高低浓度范围

26、即为线性范围（八）耐用性（八）耐用性 指测定条件稍有变动时，测定结果不指测定条件稍有变动时，测定结果不受影响的受影响的承受程度。承受程度。 是是衡量实验室和工作人员之间在正常衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性情况下实验结果重现性的尺度。的尺度。鉴别鉴别：仅需专属性、检测限、耐用性：仅需专属性、检测限、耐用性检测限检测限定量限定量限含量与溶出度测定含量与溶出度测定 仅仅不需不需2、定量、定量 仅仅“检测限检测限”视情况而定视情况而定专属性专属性 检测限检测限 耐用性耐用性1、限量、限量 仅仅需需杂质检查杂质检查定量定量限量限量耐用性耐用性范围范围线性线性定量限定量限检测限检测限专

27、属性专属性精密度精密度+准确度准确度含量测定含量测定杂质测定杂质测定鉴别鉴别 项目项目 内容内容举例举例 化学鉴别法化学鉴别法- -三氯化铁反应三氯化铁反应v专属性：空白试剂，应显阴性反应专属性：空白试剂，应显阴性反应v检测限：减少供试品取样量检测限：减少供试品取样量v耐用性：改变试液的浓度、用量、酸碱度、耐用性：改变试液的浓度、用量、酸碱度、加热温度、反应时间等。加热温度、反应时间等。 v专属性：阿司匹林原料药进行加速破坏；阿专属性：阿司匹林原料药进行加速破坏；阿司匹林粗品。司匹林粗品。v线性与范围：线性与范围：0.04、0.08、 0.10、 0.12、 0.16mg/ml系列标准溶液，以

28、峰面积系列标准溶液，以峰面积A为纵坐为纵坐标，浓度为横坐标，回归方程标，浓度为横坐标，回归方程y=a+bx。阿司匹林片的含量测定阿司匹林片的含量测定v准确度与精密度：取对照品准确度与精密度：取对照品8、 10、 12 mg各各3份，分别置份，分别置100ml量瓶中，各加入处方量的量瓶中，各加入处方量的混合辅料，照拟定方法测定。计算回收率和混合辅料，照拟定方法测定。计算回收率和精密度。精密度。v耐用性：取粗品和降解产物溶液，改变色谱耐用性：取粗品和降解产物溶液，改变色谱条件并于不同时间进样，主峰与杂质峰应能条件并于不同时间进样，主峰与杂质峰应能达到基线分离。溶液的稳定性。达到基线分离。溶液的稳定

29、性。一、需要前处理的样品一、需要前处理的样品含金属的有机药物：含金属的有机药物：金属原子不与碳原子金属原子不与碳原子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物。位化合物。富马酸亚铁、葡萄糖酸锑钠、枸富马酸亚铁、葡萄糖酸锑钠、枸橼酸铋钾、葡萄糖酸锌、酒石酸锑钾等。橼酸铋钾、葡萄糖酸锌、酒石酸锑钾等。有机金属药物：有机金属药物：金属原子直接与碳原子以金属原子直接与碳原子以共价键相连，结合比较牢固共价键相连，结合比较牢固。 第第三三节节 样品的前处理方法样品的前处理方法含含卤素药物卤素药物：含卤素有机药物系指药物分含卤素有机药物系指药物分子结构中所含卤素直接

30、与芳环或脂肪链相子结构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包括某些有机药物的卤酸盐或连者，而不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐氢卤酸盐。 1 1、酸水解后测定法、酸水解后测定法难溶于水的含金属的有机药物，与适当的无难溶于水的含金属的有机药物，与适当的无机酸共热，可置换为可溶性盐。机酸共热，可置换为可溶性盐。 如：硬脂酸镁与如：硬脂酸镁与定量硫酸定量硫酸共沸、水解生成硬共沸、水解生成硬脂酸和硫酸镁脂酸和硫酸镁, ,剩余的酸剩余的酸以氢氧化钠滴定。以氢氧化钠滴定。 Mg(C17H35COO)2 +H2SO4 MgSO4 + 2 C17HCOOH H2SO4 + NaOH Na2SO4 + H

31、2O 二二、不经有机破坏处理的分析方法、不经有机破坏处理的分析方法2.碱水解测定法碱水解测定法 将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中乙醇）中, ,加加氢氧化钠氢氧化钠溶液溶液, ,加热回流使其水加热回流使其水解解, ,将有机结合的卤素将有机结合的卤素, ,经水解作用转变为无经水解作用转变为无机的卤素离子机的卤素离子, ,然后选用然后选用间接银量法间接银量法进行测进行测定。定。 原理原理 三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热回流三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热回流水解，氯元素全部转变成水解，氯元素全部转变成氯化钠氯化钠，然后用剩余，然后用剩余滴定法，即于水解液中加

32、硝酸酸化，再加入定滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定量过量的硝酸银滴定液，使量过量的硝酸银滴定液，使ClCl- -生成生成AgClAgCl沉淀，沉淀，过量的硝酸银，以过量的硝酸银，以FeFe3+3+为指示剂，用硫氰酸铵为指示剂，用硫氰酸铵液回滴定。液回滴定。 例例 三氯叔丁醇的测定三氯叔丁醇的测定 3.经还原后测定法经还原后测定法 卤素结合于芳环上卤素结合于芳环上, ,由于分子碘的结合由于分子碘的结合较较牢固牢固, ,需在碱性溶液中加还原剂（如锌需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）粉）, ,加热回流加热回流, ,使使碳碳- -碘键断裂碘键断裂, ,形成无机碘形成无机碘化物后测定。化物后测定。 如：碘他拉酸的含量测定如：碘他拉酸的含量测定 适用于适用于金属原子或卤素与碳原子金属原子或卤素与碳原子结合牢固结合牢固的有机金属药物。的有机金属药物。湿法破坏湿法破坏干法破坏干法破坏三三、经有机破坏处理的分析方法经有机破坏处理的分