冬凌草中冬凌草甲素、乙素研究进展

1、文档来源为：从网络收集整理.word版本可编辑.欢迎下载支持冬凌草中冬凌草甲素、乙素抗肿瘤药效研究进展冬凌草又名冰凌草、六月令，得名于冬天全株结满薄如蝉翼的银白色冰凌片。冬凌草为唇形科香茶菜属植物碎米桠 Rabdos ia rubesce ns( H em s.l )H a ra的地上草质部分，产于我国河南、山西、四川、贵州等地。冬凌草味苦，性微寒， 有广泛的生物活性，具有抗炎、降压、清热解毒、消炎止痛、健胃活血等多种药 理作用。河南民间用于治疗咽喉肿痛、食管癌等已有五十余年历史，临床报道其 水及醇提取物对食管癌、贲门癌、肝癌、乳腺癌有一定疗效。近年来的药理研究充分证明，冬凌草有良好的消炎、抗

2、菌、镇痛作用，可有效地抑制甲型、乙 型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等，从而提高机体的抵抗力，研究证明二帖类 中的冬凌草甲素和冬凌草乙素是抗肿瘤的有效成分2。由于该植物及其主要活 性成分良好的抗肿瘤作用和它们在毒性实验中显示的无明显毒性，冬凌草引起了国内外医药界学者的广泛关注。近30年来，国内外学者对冬凌草及其同属植物 进行了多方面的研究。1 冬凌草的化学成分冬凌草中的主要成分是贝壳杉烷二萜类化合物。现已从各产地冬凌草中分 得20多个的此类化合物，主要为母核对映贝壳杉烯和螺断贝壳杉烯结构。从冬 凌草中分得三萜、甾体类成分a -香树脂醇、B -谷甾醇、2a -羟基乌索酸、 B -胡萝卜甙、熊果酸等

3、。研究表明，从冬凌草茎叶精油中已分离鉴定了 a -蒎 烯、B -蒎烯、柠檬烯、1, 8-桉叶素、对-聚伞花素、壬醛、癸醛、B -榄香 烯、棕榈酸、线蓟素、胡麻素和水杨酸。冬凌草甲素、乙素是唇形科(Labiatae)香茶 菜属(Rabdosia)植物中的2种重要活性二萜成分。1.1冬凌草甲素冬凌草甲素分子式：C20H28O6，熔点248 C -250 C,微溶于水，溶于甲醇、 乙酸乙酯、丙酮等。冬凌草甲素对多种癌细胞具有很强的杀灭抑制作用，主要用于抗癌，抗菌、抗肿瘤、杀虫清热解毒、消炎止痛、健胃活血及等作用冬凌草甲素结构示意图1.2冬凌草乙素文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑

4、.欢迎下载支持冬凌草乙素C20H2606是从中草药冬凌草中提取出来的具有抗癌活性的天然有机物，为中成药冬凌草片和冬凌草糖浆的有效成分，其结式如图1所示，从图中可知，分子中存在1个a亚基环戊酮结构，即A环区。这种结构具有较大的内 应力，是一个抗癌活性区。2 冬凌草的药理作用2.1 抗菌消炎作用 冬凌草对金黄色葡萄球菌、 肺炎双球菌、 乙型链球菌均有小剂量抑菌， 大剂量杀 菌作用， 其中肺炎双球菌对之最敏感。 另外， 冬凌草醇提物对大鼠棉球肉芽肿有 抑制作用，对小鼠有镇痛作用。2.2 抗氧化作用选取羟自由基， 超氧阴离子自由基， 一氧化氮和谷胱甘肽作研究指标， 观察冬凌 草甲素（Ori）、冬凌草乙

5、素（Pon）清除自由基的能力及肝细胞保护作用， 研究发现 Ori 可有效的清除羟自由基。 3、43抗肿瘤作用3 冬凌草甲素的抗肿瘤作用31 抗白血病Ikezoe 等4研究发现，冬凌草甲素抑制多发性骨髓瘤、急性淋巴细胞白血病和成人型T细胞白血病细胞的生长。缺口末端标注技术（TUNEL显示，冬凌草甲素 以时间依赖性引起白血病M一 1细胞凋亡。冬凌草甲素下调Bcl-2家族的Mcl1 和BCxL水平，但不能下调MT 1和骨髓瘤RPMI822细胞中的Bcl 一2蛋白。进一 步研究发现，冬凌草甲素在这些细胞中抑制了转录因子NF. 1c B与靶DNA段的结合活性。冬凌草甲素还能抑制造血系细胞 Jurkat

6、、巨噬细胞 RAW264 7细胞中 由TNF a和LPS刺激诱导产生的NF一XB舌性。但冬凌草甲素不影响健康志愿者的 正常淋巴细胞存活率。Liu等研究了冬凌草甲素体外对白血病HPALLffl胞株 抗增殖和凋亡诱导作用及其机制。 结果显示， 冬凌草甲素能以时间、 剂量依赖方 式显著抑制HPB ALLffl胞增殖并促使其凋亡。在给予冬凌草甲素 48 h后，伴有凋 亡细胞的标志性变化，线粒体膜电势（ V m）破裂的百分数以剂量依赖方式逐渐 增加，在给予冬凌草甲素 72 h 后，坏死细胞显著增加。给文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持予冬凌草甲素24 h后，这些细胞的B

7、cl-2和Bcl xl蛋白表达显著下调，而促凋亡 蛋白Bax和Bid表达上调。32 抗鼻咽癌、肺癌朱国臣等发现，冬凌草甲素能抑制人鼻咽癌 CN一 2细胞生长，诱导其凋亡 并坏死，流式细胞分析发现“亚二倍体峰”，冬凌草甲素作用后CNE-2细胞处在G2/M期的比例增多。此外，他们研究了冬凌草甲素的放射增敏比。Liu等的研究发现，冬凌草甲素（28umol 匚）能抑制肺癌SPC-A-1细胞增殖并诱导凋亡。 观察到凋亡细胞的形态明显变化，特别是用冬凌草甲素处理4860 h的细胞48 h后，蛋白印迹法分析显示bcl . 2表达下调而bax蛋白表达上调。3 3 抗肝癌、胆囊癌Zhang等在体外培养基中给予肝

8、癌BEL-7402细胞不同浓度的冬凌草甲素后， 发现冬凌草甲素能以时间、剂量依赖方式抑制BEL- 7402细胞增殖并引起细胞显著凋亡。细胞接触冬凌草甲素 60 h 后，观察到凋亡细胞的形态明显变化 I 蛋白质 印迹法显示，caspase. 3酶原蛋白（32x 103）分裂出现20X103的亚单位，细胞凋 亡过程中，观察到Bcl 一2蛋白表达下调而Bax蛋白表达上调。不同浓度的冬凌草 甲素处理人胆囊癌GBC-SD胞，能诱导细胞凋亡，并呈浓度依赖性。药物作用 24 h后，对照组和实验组细胞中p53，bcl 一2，fas /apo-1及cmyc蛋白表达差 异均有统计学意义 （P005）9。34 抗黑

9、色素瘤、皮肤癌Ren等10叫研究发现，冬凌草甲素以时间剂量依赖方式抑制培养的鼠黑色素 瘤K1735M细胞的生长。进一步研究表明，其抑制效应与剂量依赖的G,/ M相停止和分化诱导有关。形态学观察显示，冬凌草甲素能诱导K1735M细胞产生树突状结构。迁移结果表明，冬凌草甲素以剂量依赖方式影响K1735M细胞的活力。Li等11给予人皮肤癌A431细胞不同剂量的冬凌草甲素24 h后，发现冬凌草甲素X 于A431细胞酪氨酸激酶活性有一定的抑制能力。 酪氨酸激酶活性降低和EGF酪氨 酸磷酸化阻断可能是冬凌草甲素诱导 A43l细胞坏死的一个原因。 35抗宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌等崔侨等12等发现，冬凌草甲素明

10、显抑制宫颈癌HeLeffl胞增殖，诱导其凋亡并 发生自噬。冬凌草甲素作用24 h后，促凋亡蛋白Bax、细胞色素c和控制Bax活力 文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持的去乙酰化酶SIRT 1的表达明显改变。冬凌草甲素（64umol /L）诱导的自噬通过 影响SIRT. 1和线粒体途径蛋白表达下调凋亡。Chen等13 研究了冬凌草甲素对人前列腺癌（DU-145, LNCaP）乳腺癌（MC一7）和卵巢癌（A2780和PTXIO）细胞生物 活性的影响。冬凌草甲素对所有被测定的癌细胞都有抗增殖活性，IC。在5. 8 2. 311. 72土4. 8 “mol/L范围。更值

11、得注意的是，冬凌草甲素诱导癌细胞 凋亡的浓度不能诱导培养的正常人成纤维细胞凋亡。3. 6其他Liu 等14 研究发现，当鼠脾淋巴细胞和冬凌草甲素一起培养时，冬凌草甲素有效地以剂量、时间依赖方式抑制刀豆蛋白Co nA刺激的细胞过度增殖。抑制活性 主要是干涉DNAT制和调节了细胞周期所致，CD4+ CD8淋巴细胞水平降低也起 了作用。二甲苯诱导的鼠耳肿胀模型结果表明， 冬凌草甲素降低了鼠耳肿胀程度 和动物血清中IL . 2水平。ELISA测定结果表明，冬凌草甲素能抑制鼠脾淋巴细胞 分泌IL-2，IFN- 丫，IL-12p40和TNF. a的能力，而且逆转录PCR勺结果证明，抑 制是通过降低这些细胞

12、因子mRN表达水平实现的。MT法测定显示，冬凌草甲素 以时间、剂量依赖方式抑制人结直肠癌 HT20田胞的增殖。体内实验表明，HT29 细胞在小鼠体内培育24h后，腹腔注射冬凌草甲素（10，l 5, 20 mg/kg体重，1 1 2 d） 也观察到实体瘤受抑制 15。 Jin 等16 的研究结果显示， 冬凌草甲素以浓度、 时间依赖方式抑制骨肉瘤细胞U2-OS M&63和SaO一2增殖并诱导凋亡。冬凌草 甲素能够诱导细胞色素释放，并伴随 Ca sPa se一9，caspase一3，PAR激活。4. 冬凌草乙素的抗肿瘤作用Liu 等17 的研究结果显示，冬凌草乙素能以时间、剂量方式显著抑制人骨髓 瘤

13、细胞系K562和HL- 60细胞的增殖并诱导凋亡。用冬凌草乙素处理细胞 48 72 h 后，可以清楚地观察到细胞凋亡。凋亡发生时， caspase. 3酶原蛋白（32 x 103） 分裂出17X103亚单位，同时相对分子质量为116X 103的PAR分裂产生89x 103 组分。冬凌草乙素处理细胞2448 h后，Bcl . 2表达下调而Bax表达上调。Zhang 等18 研究发现冬凌草乙素显著抑制人肝癌细胞系 QG一 7701和HepS 2细胞增殖 并诱导凋亡，其机制是Survivin和Bcl-2表达下调及Bax表达上调。文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持5.

14、 冬凌草甲素和乙素抗肿瘤作用的比较Zhang等19评价了体外冬凌草甲素和冬凌草乙素对癌细胞和人外周血单个核 细胞（PBMC的抗增殖活性。冬凌草甲素比冬凌草乙素对 4种癌细胞（人黑色素瘤 A375-s2、人子宫癌HeLa人乳腺癌MC一7、鼠纤维肉瘤L929）有更强的细胞毒 作用。冬凌草甲素只寸A375. S2细胞比对另外几种细胞有更强的增殖抑制活性。 用冬凌草甲素34. 3肛mol/L处理12 h后，能显著抑制A375-S2细胞增殖，而对 PBM的作用较弱。而冬凌草乙素在相同条件下能显著抑制 PBM的生长。A375. S2 细胞分别用冬凌草甲素34. 3mol/L和137. 4 mol/L处理后

15、显示冬凌草甲素 诱导A375. S2细胞死亡是凋亡和坏死的平衡。Hsieh等1201测定了冬凌草乙素和 冬凌草甲素对低侵袭性乳腺癌M细胞系MC一7和高侵袭性乳腺癌细胞系MD MB-231细胞及正常乳腺细胞系MC一 10A细胞的作用，发现冬凌草乙素比冬凌草甲素能更有效地抑制 MCF7细胞集落的生成和增殖， 但用于MC IOA细胞则观察到相反的结果。在对MC一7或MCIOA细胞都有效的 剂量范围内，它们都不影响 MDAMB-23 l 细胞的增殖。冬凌草乙素处理 MCF7 细胞，发现cyclin . B1，cdc2转录因子E2F和780位Ser磷酸化的Rb表达水平均降 低。而冬凌草甲素处理则无明显的

16、作用。 二者都不能改变MCF7细胞的cyclin-D1 和cdk4的表达。对于MCF-10AJ胞，冬凌草甲素比冬凌草乙素能更有效地抑制 cyclin B1，cdc2转录因子E2F和780位Ser磷酸化的表达。进一步研究表明，冬 凌草甲素处理MCF 10Affl胞后，其NF- lcB组分p65、p50及其上游调控子I . cB 减少，对MC一7细胞则无这种作用。6. 总结 冬凌草甲素、乙素具有很好的抗癌活性，有着广阔的开发前景。目前，国内 除了早期上市的冬凌草总提物制剂外， 尚无冬凌草甲素、 乙素的单体制剂。 近年 对冬凌草甲素的研究主要集中在生物活性上，在提取、分离、结构修饰、制剂及 药动学等

17、方面也作了很多有益的探讨； 冬凌草乙素的研究近年也逐渐增多。 近年 的研究主要是冬凌草甲素， 尤其是冬凌草甲素的抗肿瘤活性方面的实验报道较多。 研究表明， 冬凌草甲素具有较好的抗肿瘤活性， 且对正常细胞毒性较低， 具有很 好的临床应用和开发价值。 将冬凌草甲素开发成新药制剂， 对开发利用丰富的自 然资源具有重要的意义。参考文献文档来源为 :从网络收集整理 .word 版本可编辑 .欢迎下载支持1阴健. 中药现代研究与临床应用 M. 北京: 学苑出版社 , 1995:223.2刘晨江 , 赵志鸿 . 冬凌草的研究进展 J . 中国药学杂志 , 1998, 33( 10 ): 577.3张春玲，吴

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