贵阳市农产品质量安全追溯系统操作及检测技术培训

1、 贵州勤邦食品安全科学技术有限公司 食品安全检测技术培训 扶 胜 Tankertanker Design Tankertanker Design 提 纲 u一、勤邦概况 u二、GT-181仪器简介 u三、农残检测培训 u四、试纸条检测培训 u五、产品操作注意事项 Tankertanker Design Tankertanker Design 勤邦生物是专业从事食品安全检测的高新技术企业，始终致力于食品勤邦生物是专业从事食品安全检测的高新技术企业，始终致力于食品 安全快速检测设备和免疫试剂的自主研发、生产、销售，产品涵盖了食安全快速检测设备和免疫试剂的自主研发、生产、销售，产品涵盖了食 品安全检

2、测的完整产业链。品安全检测的完整产业链。 勤邦生物生产研发基地(约8000) 10万级净化车间，局部1万级。达到 GMP 要求的生产车间（约1000） 研发实验室（约3000 ） SPF级实验动物房（约800） 行政办公区域（约2500） 一、勤邦概况 Tankertanker Design Tankertanker Design 4 应用开发 平台 仪器 开发平台 l食品中残留化学污染物抗 原抗体200余种 l其他小分子药物储备抗原 抗体100余种 l兽药残留检测系列 l真菌毒素检测系列 l农药残留检测系列 l微生物检测系列 l转基因检测系列 l成分检测系列 l理化检测及食品安全检测箱 集机

3、械设计、光路分析、软件 开发于一体,开发: 免疫试剂配套仪器 本行业通用仪器等 原材料 抗原抗体 合成平台 新技术研 发平台 lELISA技术 l胶体金检测技术 l化学发光检测技术 l上转换发光技术 l荧光微球 l免疫磁珠 l核酸检测技术（lamp） lPCR技术 一、勤邦概况 Tankertanker Design Tankertanker Design 酶联免疫试剂盒产品及胶体金试纸条约酶联免疫试剂盒产品及胶体金试纸条约100100种，荧光免疫微球产品种，荧光免疫微球产品3 3种；种； 涵盖畜类、禽类、水产、乳业、饲料、蜂产品等食品行业；涵盖畜类、禽类、水产、乳业、饲料、蜂产品等食品行业；

4、 每年新开发和改进的技术超过每年新开发和改进的技术超过1515项以上。项以上。 1010余种自主创新产品为国际首创产品，余种自主创新产品为国际首创产品，3030余种产品为国内首创。余种产品为国内首创。 便携式胶体金读数仪实现检测数据可存储、可追溯；便携式胶体金读数仪实现检测数据可存储、可追溯； 全自动化学发光仪实现高通量、高效率检测；全自动化学发光仪实现高通量、高效率检测； 勤邦产品 一、勤邦概况 Tankertanker Design Tankertanker Design 实验室配套系列仪器实验室配套系列仪器 上百种实验室 必备的小型设备 为客户提供全方位的 食品安全检测方案服务 一、勤邦

5、概况 Tankertanker Design Tankertanker Design 二、GT-181简介 （一）检测原理： 智能一体化食品安全分析仪是一款集成了 分光光度模块、胶体金试纸卡检测模块、 数字化管理模块、无线通讯模块等一体化 的食品安全智能检测设备。 其利用分光光度法、胶体金免疫法对食品 中残留有害物质进行定性、半定量和定量 检测。 Tankertanker Design Tankertanker Design 二、GT-181简介 （二）检测项目： 1、分光光度模块： 食品中的农药残留、氨基酸态氮、蛋白质、 碘、吊白块、二氧化硫、谷氨酸钠、果糖 及葡萄糖、过氧化苯甲酰、过氧化值

6、、甲 醇、甲醛、硫酸铝钾、农药残留、铅、双 氧水、糖精钠、甜蜜素、苋菜红、硝酸盐、 溴酸钾、亚硝酸盐、余氯、芝麻油纯度、 总酸等。 2、胶体金试纸卡检测模块： 食品中铅、汞、砷、农药残留、三聚氰胺、 盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、 氯霉素、硝基呋喃类代谢物、磺胺类等。 Tankertanker Design Tankertanker Design 二、GT-181简介 （三）应用客户： 食品药品监督管理局 市场监督管理局 农业委员会 学校、企事业单位食堂 质监部门 大型超市及农贸市场 Tankertanker Design Tankertanker Design （四）操作步骤（四）操作

7、步骤 三、农残检测培训 Tankertanker Design Tankertanker Design （一）检测原理（一）检测原理 酶抑制法：利用有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆酯酶具有抑 制作用的原理，在乙酰胆酯酶、底物、显色剂、提取液共存体系下， 通过最终产物显色深浅，间接反映酶被抑制的程度，从而利用抑制 率指标反映农药残留量的方法。 三、农残检测培训 Tankertanker Design Tankertanker Design 三、农残检测培训 （二）检测试剂（二）检测试剂 酶试剂、 缓冲液、 显色剂、 底物 缓冲液缓冲液酶试剂酶试剂显色剂显色剂底物底物 试剂配制： 1、底物、显色剂

8、、酶试剂直接使用。 2、缓冲试剂粉末需要加入500ml纯净水溶解配置方可使用。 3、试剂用完需要在2-8 冷藏保存。 Tankertanker Design Tankertanker Design 三、农残检测培训 （三）操作步骤（三）操作步骤 1、样品液体的制备； 2、对照样品的制备； 3、检测样本的制备； 4、上机测试； Tankertanker Design Tankertanker Design 14 1、样品液的制备、样品液的制备 检测样品的制备检测样品的制备 称取称取2.0g果果 蔬样品蔬样品 Tankertanker Design Tankertanker Design 15 检

9、测样品的制备检测样品的制备 待测液待测液 加入加入10ml 缓冲液缓冲液 1、样品液的制备、样品液的制备 Tankertanker Design Tankertanker Design 16 1、样品液的制备、样品液的制备 备注：备注： a a 菜叶类样品直接称取菜叶类样品直接称取2.0g2.0g样品进行检测；样品进行检测； b b 瓜果类样品称取横截面瓜果类样品称取横截面( (表皮表皮)2.0g)2.0g样品进行样品进行 检测；检测； C C 处理葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭处理葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭 白、蘑菇及番茄这类样品时，采取整株浸泡提白、蘑菇及番茄这类样品时，采取整

10、株浸泡提 取，避免次生物物质干扰。取，避免次生物物质干扰。 Tankertanker Design Tankertanker Design 17 2、对照样品的制备、对照样品的制备 对照样品的制备对照样品的制备 取酶取酶 100ul 缓冲液缓冲液 2.5ml Tankertanker Design Tankertanker Design 18 对照样品的制备对照样品的制备 加显色剂加显色剂 100ul 底物底物20l 2、照样品的制备、照样品的制备 Tankertanker Design Tankertanker Design 19 对照样品的制备对照样品的制备 摇匀后将溶液倒入比色皿中摇匀后

11、将溶液倒入比色皿中,上机上机 操作操作. 2、对照样品的制备、对照样品的制备 Tankertanker Design Tankertanker Design 判断标准：判断标准： a 1mina 1min内空白对照值在内空白对照值在0.15-0.30.15-0.3之间时，可之间时，可 继续做实验继续做实验 b 3minb 3min内空白对照值在内空白对照值在0.30.3时时, ,可继续做实可继续做实 验验 2、对照样品的制备、对照样品的制备 Tankertanker Design Tankertanker Design 21 检测样品的制备检测样品的制备 酶试剂酶试剂 待测液待测液 取酶 10

12、0ul100ul 取待测 液 2.5ml2.5ml 3、检测样品的制备、检测样品的制备 加显色剂 100ul100ul 显色剂显色剂 Tankertanker Design Tankertanker Design 22 检测样品的制备检测样品的制备 混匀以后, , 静置1515分 钟 3、检测样品的制备、检测样品的制备 Tankertanker Design Tankertanker Design 23 检测样品的制备检测样品的制备 底物20l20l 3、检测样品的制备、检测样品的制备 Tankertanker Design Tankertanker Design 24 检测样品的制备检测样品

13、的制备 摇匀后将溶液倒入比色皿中, ,上机 操作. . 3、检测样品的制备、检测样品的制备 Tankertanker Design Tankertanker Design 判断标准：判断标准： a a 样品的抑制率在样品的抑制率在40-50%40-50%之间为可疑农残超标之间为可疑农残超标 样品；抑制率在样品；抑制率在40%40%以下完全合格；以下完全合格； b b 抑制率抑制率50%50%为农残超标样品，表明被测样品为农残超标样品，表明被测样品 的农药残留毒性可能超过安全的界定标准，建的农药残留毒性可能超过安全的界定标准，建 议用气相色谱等仪器分析法作进一步确认。议用气相色谱等仪器分析法作进

14、一步确认。 仪器操作步骤仪器操作步骤 Tankertanker Design Tankertanker Design 一、检测原理一、检测原理 竞争抑制免疫层析样本中的兽药小分子物质在流动的竞争抑制免疫层析样本中的兽药小分子物质在流动的 过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制 了抗体和了抗体和NCNC膜检测线（膜检测线（T T线）上的待检兽药线）上的待检兽药BSABSA偶联偶联 物的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。物的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。 原理：原理： 五、试纸条检测培训 Tankertanker Design Tank

15、ertanker Design v金标试纸卡的检测操作步骤金标试纸卡的检测操作步骤 打开试剂盒阅读说明书 检测准备 五、农药残留胶体金试纸条快速检测 Tankertanker Design Tankertanker Design w w w. k w i n b o n. c o m 取出试纸卡，根据检测 样品数量确定需要试纸 卡的数量 将试纸卡平坦地放在操 作台上 在试纸卡上标记样本编号 五、农药残留胶体金试纸条快速检测 Tankertanker Design Tankertanker Design 1) 尿液的收集 收集活体猪尿液 工具须一次性使用，防止交叉污染。 关键点：关键点： （1

16、1）尿液需恢复到室温才能进行检测；）尿液需恢复到室温才能进行检测； （2 2）如尿液较浑浊，需）如尿液较浑浊，需3000rpm3000rpm以上、室温离心以上、室温离心5min5min，取上清用于检，取上清用于检 测；测； （3 3）尿液在）尿液在44可保存可保存4848小时，如需长期保存，可置于小时，如需长期保存，可置于-20-20冷冻保存。冷冻保存。 1. 以尿液中检测莱克多巴胺残留为例 Tankertanker Design Tankertanker Design 2) 尿液编号 对收集好的尿液进行编号，并做好实验记录。对收集好的尿液进行编号，并做好实验记录。 Tankertanker

17、Design Tankertanker Design 3) 取出试纸条并编号 l 关键点：关键点： l（1 1）试纸条需恢复到室温；）试纸条需恢复到室温； l（1 1）手不能接触试纸条观察区的白色膜面；）手不能接触试纸条观察区的白色膜面； l（2 2）试纸条取出后在）试纸条取出后在1 1小时内使用。小时内使用。 Tankertanker Design Tankertanker Design 4) 用一次性吸管吸取尿液 关键点：一次性吸管不能重复使用，防止交叉污染。 Tankertanker Design Tankertanker Design 5) 点样 关键点：关键点： （1 1）滴加尿液过

18、多或过少，均会影响显色情况。）滴加尿液过多或过少，均会影响显色情况。 （2 2）使用前如观察区内滴入液体，此条作废。）使用前如观察区内滴入液体，此条作废。 吸取尿液滴加到加样孔中，一般吸取尿液滴加到加样孔中，一般2323滴，滴， 反应反应510510分钟判定结果。分钟判定结果。 Tankertanker Design Tankertanker Design6) 结果判定 阳性：阳性：C C 线显色，线显色，T T线不显色，线不显色， 表示尿液样本中莱克多巴胺浓度表示尿液样本中莱克多巴胺浓度 等于或高于检测限。等于或高于检测限。 阴性：阴性：C C 线显色，线显色，T T线显色，无线显色，无 论颜色深浅，均表示尿液样本中论颜色深浅，均表示尿液样本中 莱克多巴胺浓度