新药药理学：总论及急毒

1、 （三）药理毒理研究资料（三）药理毒理研究资料 16、药理毒理研究资料综述。、药理毒理研究资料综述。 17、主要药效学试验资料及文献资料。、主要药效学试验资料及文献资料。 18、一般药理研究的试验资料及文献资料。、一般药理研究的试验资料及文献资料。 19、急性毒性试验资料及文献资料。、急性毒性试验资料及文献资料。 20、长期毒性试验资料及文献资料。、长期毒性试验资料及文献资料。 21、过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、 皮肤、皮肤、 粘膜、肌肉等）刺激性等主要与局部、全身给药相关的特殊安全性试验研粘膜、肌肉等）刺激性等主要与

2、局部、全身给药相关的特殊安全性试验研 究和文献资料。究和文献资料。 22、复方制剂中多种成份药效、毒性、药代动力学相互影响的试验资料、复方制剂中多种成份药效、毒性、药代动力学相互影响的试验资料 及文献资料。及文献资料。 23、致突变试验资料及文献资料。、致突变试验资料及文献资料。 24、生殖毒性试验资料及文献资料。、生殖毒性试验资料及文献资料。 25、致癌试验资料及文献资料。、致癌试验资料及文献资料。 26、依赖性试验资料及文献资料。、依赖性试验资料及文献资料。 27、动物药代动力学试验资料及文献资料。、动物药代动力学试验资料及文献资料。 毒理学与新药研究 总论 急性毒性试验 长期毒性试验 遗

3、传毒性试验 生殖毒性试验 致癌试验 特殊毒性试验 GLP 新药毒理学研究目的新药毒理学研究目的 #万物皆可入药万物皆可入药 #万物皆有毒性：超过限量、改变应用范围或用万物皆有毒性：超过限量、改变应用范围或用 药途径药途径变成毒物变成毒物 #药物与毒物的区别：剂量不同，用途不同药物与毒物的区别：剂量不同，用途不同 五灵脂五灵脂蝉蜕蝉蜕 新药毒理学研究目的新药毒理学研究目的 #毒理学：研究外源性物质对机体伤害作用的科毒理学：研究外源性物质对机体伤害作用的科 学学 #新药临床前毒理学研究：对新药的安全性进行新药临床前毒理学研究：对新药的安全性进行 评价，保证临床用药安全评价，保证临床用药安全 #19

4、85198519941994年年, , 我国共我国共收审新药近四千种收审新药近四千种, , 已已 批准上市约占批准上市约占50%, 50%, 而另外而另外50%50%未被批准上市新未被批准上市新 药中药中, , 有相当一部分就是因毒理学评价没有通有相当一部分就是因毒理学评价没有通 过过 新药毒理学研究总的要求新药毒理学研究总的要求 #找出毒性剂量找出毒性剂量 Toxic dosage #确定安全剂量范围确定安全剂量范围 Safety margin #发现毒性反应发现毒性反应 Toxic reaction: 性质、程度、性质、程度、 量毒关系、产生时间，达峰时间量毒关系、产生时间，达峰时间, 持

5、续时间及持续时间及 反复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、反复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、 耐受性耐受性 #寻找毒性反应靶器官寻找毒性反应靶器官 Target organ #确定毒性反应是否可逆确定毒性反应是否可逆 Reversibility 确保临床用药安全确保临床用药安全 十种最严重的毒副反应十种最严重的毒副反应 #心得宁心得宁Practolol引起眼粘膜皮肤综合征引起眼粘膜皮肤综合征 #口服避孕药引起血栓性栓塞病口服避孕药引起血栓性栓塞病 #止痛药（非那西丁）引起的肾损伤止痛药（非那西丁）引起的肾损伤 #降糖灵引起乳酸性酸中毒降糖灵引起乳酸性酸中毒 #拟交感性喷雾剂引起哮喘致死拟交

6、感性喷雾剂引起哮喘致死 #氨碘喹啉引起亚急性脊髓视神经病变氨碘喹啉引起亚急性脊髓视神经病变 #己烯雌酚引起子代妇女阴道癌己烯雌酚引起子代妇女阴道癌 #氯霉素引起再生障碍性贫血氯霉素引起再生障碍性贫血 #氟烷引起黄疸氟烷引起黄疸 #二甲麦角新碱引起腹膜后纤维变性二甲麦角新碱引起腹膜后纤维变性 临床前毒理学评价的局限性临床前毒理学评价的局限性 #新药本身新药本身 新药不断地改变着化学结构和药理毒新药不断地改变着化学结构和药理毒 理学特征理学特征, 不同于已有的老药不同于已有的老药, 因而也因而也 往往超出人们原有的知识、经验和评价往往超出人们原有的知识、经验和评价 手段所达到的预测能力手段所达到的

7、预测能力 #现有评价手段不能完全适应现有评价手段不能完全适应“新药新药” 评价需要评价需要 临床前毒理学评价的局限性临床前毒理学评价的局限性 #动物实验缺点动物实验缺点 1）试验动物与人对药物反应的种属差异）试验动物与人对药物反应的种属差异 2）试验动物的数量有限）试验动物的数量有限 发生率发生率558只动物只动物 发生率发生率1299只动物只动物 发生率发生率0.1%2995只动物只动物 非甾体抗炎药非甾体抗炎药Benoxaprofen以万分之一的以万分之一的 发生率使发生率使61名病人中毒身亡名病人中毒身亡 临床前毒理学评价的局限性临床前毒理学评价的局限性 #动物实验缺点动物实验缺点 3）

8、动物品种单一）动物品种单一 4）采用健康模型）采用健康模型 5）采用大剂量）采用大剂量 乳糖乳糖钙性肾病钙性肾病 临床前毒理学评价成功例子临床前毒理学评价成功例子 #化学物质致癌、致畸、己烯雌酚防流化学物质致癌、致畸、己烯雌酚防流 产而使子代女性出现阴道癌产而使子代女性出现阴道癌致癌、致致癌、致 畸、生殖及三代生殖试验畸、生殖及三代生殖试验 #青霉素严重过敏反应青霉素严重过敏反应动物模型动物模型豚豚 鼠鼠 基本概念基本概念 o 最大无毒性反应剂量：即未见毒性反应剂量最大无毒性反应剂量：即未见毒性反应剂量 （No observed adverse effect level, NOAEL），指受试

9、物在一定时间内，），指受试物在一定时间内， 按一定方式与机体接触，用灵敏的现代检测按一定方式与机体接触，用灵敏的现代检测 方法和观察指标未发现损害作用的最高剂量。方法和观察指标未发现损害作用的最高剂量。 o 最小毒性反应剂量：动物出现毒性反应的最最小毒性反应剂量：动物出现毒性反应的最 小剂量。小剂量。 基本概念基本概念 o 最大耐受量（最大耐受量（Maximal tolerance dose, MTD）：不引起受试动物死亡的最）：不引起受试动物死亡的最 高剂量。高剂量。 o 最大给药量指单次或最大给药量指单次或24小时内多次（小时内多次（23 次）给药所采用的最大给药剂量。最大给药次）给药所采

10、用的最大给药剂量。最大给药 量试验是指在合理的给药浓度及合理的给药量试验是指在合理的给药浓度及合理的给药 容量的条件下，以允许的最大剂量给予实验容量的条件下，以允许的最大剂量给予实验 动物，观察动物出现的反应。动物，观察动物出现的反应。 基本概念基本概念 o 最小致死剂量（最小致死剂量（Minimal lethal dose, MLD）：引起个别受试动物出现死亡的剂）：引起个别受试动物出现死亡的剂 量。量。 o 半数致死量（半数致死量（Median lethal dose, LD50）：在一定试验条件下引起）：在一定试验条件下引起50%受受 试动物死亡的剂量。该值是经统计学处理所试动物死亡的剂

11、量。该值是经统计学处理所 得的结果。得的结果。 急性毒性试验急性毒性试验 急性毒性试验急性毒性试验指动物指动物一次接触一次接触或或2424小小 时内多次接触时内多次接触药物后在短期药物后在短期( (最长到最长到1414天天) )内内 连续观察动物所产生的毒性反应及死亡情况。连续观察动物所产生的毒性反应及死亡情况。 急性毒性试验急性毒性试验 定性观测：中毒表现定性观测：中毒表现 毒性反应出现和消失的速度毒性反应出现和消失的速度 涉及组织和器官涉及组织和器官 可能的主要毒性靶器官可能的主要毒性靶器官 损伤的性质及可逆程度损伤的性质及可逆程度 中毒死亡过程的特征中毒死亡过程的特征 可能的死亡原因可能

12、的死亡原因 定量观察：定量观察： 半数致死剂量（半数致死剂量（ LD50 ） 近似致死剂量（近似致死剂量（ALD） 目的意义目的意义 了解新药急性毒性强度了解新药急性毒性强度 计算新药相对毒性参数计算新药相对毒性参数 为临床毒副反应监护提供参考依据为临床毒副反应监护提供参考依据 为长期毒性、蓄积性毒性和特殊毒性试验选择剂量提供依据为长期毒性、蓄积性毒性和特殊毒性试验选择剂量提供依据 新药急性毒性的强度新药急性毒性的强度 表表. 化学物质的急性毒性分级标准化学物质的急性毒性分级标准(WHO) 毒性分级毒性分级 ig大、小鼠大、小鼠LD50 吸入大、小鼠吸入大、小鼠LC50 涂皮兔涂皮兔LD50

13、人口服可能的人口服可能的 (mg/kg) (ppm) (mg/kg) 致死量致死量(g) 极极 毒毒 1 10 5000 10000 2180 1200 *吸入毒性吸入毒性LC50指中毒栏中的浓度指中毒栏中的浓度, 一次中毒一次中毒2-4小时小时, 观察观察24天天 新药急性毒性的强度新药急性毒性的强度 表表. 欧共体对化学物的毒性分级欧共体对化学物的毒性分级 动物及给药途径动物及给药途径 剧剧 毒毒 毒毒 有有 害害 大鼠大鼠 LD50 ig(mg/kg) 25 25-200 200-2000 大鼠或兔经皮大鼠或兔经皮LD50 (mg/kg) 50 50-400 400-2000 大鼠大鼠

14、LC50 (mg/L/4hr) 0.5 0.2-2 2-20 新药急性毒性的强度新药急性毒性的强度 我国毒理急性毒性分级法我国毒理急性毒性分级法 急性毒性分级急性毒性分级大鼠经口大鼠经口LD50(mg/kg) 相当于相当于70kg人的致死量人的致死量 6级级(极毒极毒) 1 稍尝稍尝,15000 1050克克 计算相对毒性参数计算相对毒性参数 治疗指数治疗指数TI =LD50/ED50 安全系数安全系数SF=LD5/ED95 可靠或确实安全系数可靠或确实安全系数CSF =LD1/ED99 安全范围安全范围SM=(LD1/ED99-1) X 100% SED50/ED50, 越大越安全越大越安全

15、 LD5基本无害量基本无害量 ED95基本有效量基本有效量 LD1肯定无害量肯定无害量 ED99肯定有效量肯定有效量 不能直接把动物试验的结果外推到人不能直接把动物试验的结果外推到人 磺胺酏剂惨剧磺胺酏剂惨剧 19371937年，使用磺胺酏剂消炎年，使用磺胺酏剂消炎 ，引起尿毒症、肾衰，引起尿毒症、肾衰， 死亡死亡107107人人 大鼠口服的大鼠口服的LDLD50 50 为 为6g/kg6g/kg，按化学物分级标准属于，按化学物分级标准属于 实际无毒类实际无毒类 1010人中毒死亡人中毒死亡 为临床毒副反应监护提供参考为临床毒副反应监护提供参考 中毒症状中毒症状 起始时间起始时间 持续时间持续

16、时间 恢复时间恢复时间 对抗试验为临床急救提对抗试验为临床急救提 供依据供依据 急性毒性试验观察动物反应指标急性毒性试验观察动物反应指标 中中 毒毒 部部 位位 毒毒 性性 症症 状状 表表 现现 中枢神经系统中枢神经系统 呆滞呆滞:对刺激反应迟缓、减弱、消失；不安：对刺激反应对刺激反应迟缓、减弱、消失；不安：对刺激反应 过敏、过敏、 兴奋；强直：行动姿势改变、叫声异常、震颤、兴奋；强直：行动姿势改变、叫声异常、震颤、 共济失调共济失调 植物神经系统瞳孔缩小、放大植物神经系统瞳孔缩小、放大; 分泌增多，如流涎、流泪分泌增多，如流涎、流泪 呼呼 吸吸 系系 统统 鼻孔流鼻涕、呼吸缓慢、困难、潮式

17、呼吸、速率加快等鼻孔流鼻涕、呼吸缓慢、困难、潮式呼吸、速率加快等 心血管心血管 系统系统 心动过速、缓慢、心律不齐、心跳过强、微弱心动过速、缓慢、心律不齐、心跳过强、微弱 胃胃 肠肠 系系 统统 气胀、腹泻、便秘、粪便不成形、粪便黑色气胀、腹泻、便秘、粪便不成形、粪便黑色 生生 殖殖 系系 统统 乳腺膨胀、会阴部污浊、阴囊下垂等乳腺膨胀、会阴部污浊、阴囊下垂等 皮肤、皮肤、 毛毛 皮肤发红、松弛、皮疹、毛竖起皮肤发红、松弛、皮疹、毛竖起 粘粘 膜膜 口腔流粘液、充血、溃疡、出血性紫绀口腔流粘液、充血、溃疡、出血性紫绀 眼眼 睛睛 上睑下垂、眼球突出混浊上睑下垂、眼球突出混浊 其其 他他 直肠温

18、度升高、降低；消瘦；拒食等直肠温度升高、降低；消瘦；拒食等 为长毒、蓄毒试验选择剂量提供依据为长毒、蓄毒试验选择剂量提供依据 长期毒性剂量设计长期毒性剂量设计 LD50法法 (1/10, 1/50, 1/100) MTD法法 (1, 1/3, 1/10) 蓄积性毒性剂量设计蓄积性毒性剂量设计 1/10LD50, 然后按等比级数然后按等比级数1.5倍逐渐递增倍逐渐递增 为特殊毒性试验选择剂量提供依据为特殊毒性试验选择剂量提供依据 生殖毒性试验高剂量为母鼠生殖毒性试验高剂量为母鼠MTD 致突变试验致突变试验 啮齿类动物微核试验高剂量为啮齿类动物微核试验高剂量为1/2 LD50 果蝇伴性隐性致死试验

19、的高、低剂量分别为果蝇伴性隐性致死试验的高、低剂量分别为1/2 LD50和和1/4 LD50 精原细胞染色体畸变试验高剂量应为精原细胞染色体畸变试验高剂量应为1/2 LD50 动物短期致癌试验高剂量应是动物短期致癌试验高剂量应是MTD 内容和要求内容和要求-动物动物 啮齿类啮齿类-小鼠或大鼠小鼠或大鼠 非啮齿类非啮齿类-犬犬 类药必须采用二类动物类药必须采用二类动物(啮齿类及非啮齿类各一种啮齿类及非啮齿类各一种, 其其 中非啮齿类宜用中非啮齿类宜用Beagle犬犬)， 其它分类药酌情用二种动其它分类药酌情用二种动 物物 健康成年动物健康成年动物 体重不得超过或低于平均体重的体重不得超过或低于平

20、均体重的20% 各半各半 内容和要求内容和要求-给药途径给药途径 采用不同的给药途径采用不同的给药途径 类药及可溶于水的至少用两种给药途径类药及可溶于水的至少用两种给药途径, 其中一其中一 种必须是临床给药途径，另一种最好能使种必须是临床给药途径，另一种最好能使药物完全药物完全 进入循环进入循环 经口给药前动物应禁食一段时间，不禁水经口给药前动物应禁食一段时间，不禁水 内容和要求内容和要求-剂量和分组剂量和分组 小动物一般分小动物一般分4-6 个剂量组个剂量组,给药剂量应从未见毒性给药剂量应从未见毒性 剂量到出现严重毒性的剂量剂量到出现严重毒性的剂量, 求出求出LD50 大动物可用大动物可用50%等量递升法等量递升法, 求出求出ALD和和MTD 内容和要求内容和要求-试验周期试验周期 至少观察一周，一般观察至少观察一周，一般观察2周周 时间太短结果往往不可靠时间太短结果往往不可靠 有机锡事件有机锡事件急性毒性试验只观察了急性毒性试验只观察了24小小 时，导致时，导致207人视力障碍、其中人视力障碍、其中102人死亡人死亡 内容和要求内容和要求-观察记录观察记录 给药当天给药当天, 尤其是药后尤其是药后4h