肿瘤免疫治疗 总参谋部总医院亓爱杰

1、 肿瘤生物免疫治疗肿瘤生物免疫治疗 解放军总参谋部总医院国际肿瘤诊疗中心 亓爱杰肿瘤生物治疗定义肿瘤生物治疗定义 肿瘤生物治疗是指通过调动宿主的天然防卫机制或给予机体某些物质来取得抗肿瘤效应的一种治疗手段。通俗的讲，就是通过使用一些生物反应调节剂（biological response modifier，brm）如：细胞因子、肿瘤疫苗、植物多糖等来增强患者的抵抗力，从而达到杀伤和抑制肿瘤的目的。 2000年在美国举行的“国际肿瘤生物和免疫治疗年会”的总结报告指出：生物治疗是目前医疗界已知的唯一一种有望完全消灭癌细胞：生物治疗是目前医疗界已知的唯一一种有望完全消灭癌细胞的治疗手段，的治疗手段，2

2、1世纪是肿瘤生物治疗世纪世纪是肿瘤生物治疗世纪肿瘤免疫治疗的发展历程（按论文报导时间先后）2007年超级免疫年超级免疫粒细胞抗癌技术粒细胞抗癌技术1991年年cik细细胞胞（细胞因子诱导的杀伤细胞）1982年年lak细胞（淋巴因子激活的杀伤细胞）1994年出现年出现细胞融合瘤苗，细胞融合瘤苗，后来发展成后来发展成dc瘤苗技术瘤苗技术1989年年cd3ak（cd3单克隆抗体激活的杀伤细胞）1986年年til（肿瘤浸润淋巴细胞）2001年年dc与与cik共培养共培养肿瘤生物治疗的特点肿瘤生物治疗的特点o具有肿瘤特异性（高度选择性）具有肿瘤特异性（高度选择性）o作用机理及毒副作用与常规治疗不同作用机

3、理及毒副作用与常规治疗不同o不容易产生耐药不容易产生耐药o毒副作用较小毒副作用较小肿瘤生物治疗方法肿瘤生物治疗方法 肿瘤生物治疗的发展历程第一代：细胞因子技术，第一代：细胞因子技术，ifn、il、tnf、csf、tgf等等第二代：细胞技第二代：细胞技 术，术，lak、til、ctl等等第三代：非特异性免疫细胞治疗第三代：非特异性免疫细胞治疗 技术，技术，如：如：cik细胞细胞特异性肿瘤疫苗治疗技术，特异性肿瘤疫苗治疗技术，如：如：dc细胞细胞第四第四 代：代：car-t生物治疗生物治疗化疗化疗放疗放疗手术手术肿瘤肿瘤综合治疗综合治疗第四大肿瘤治疗模式第四大肿瘤治疗模式作为第三代生物治疗作为第三

4、代生物治疗技术，技术，cik/dccik/dc免疫治免疫治疗由于其明确的治疗疗由于其明确的治疗优势已成为继手术、优势已成为继手术、放疗、化疗之后的第放疗、化疗之后的第四大肿瘤治疗模式。四大肿瘤治疗模式。肿瘤肿瘤综合治疗综合治疗肿瘤生物治疗主要作用肿瘤生物治疗主要作用一直接调节肿瘤细胞的生长和分化，抑制肿瘤生长，使肿瘤缩小；二促使肿瘤细胞从低分化向高分化发展，提高肿瘤细胞对人体抗肿 瘤免疫应答的敏感性，有利于杀伤癌细胞；三特异性地作用于肿瘤新生血管，影响肿瘤的营养供应，导致肿瘤细胞坏死，而正常细胞则不受影响；四刺激病人体内产生免疫应答反应，使体内有更多的抗癌细胞产生，增强抗癌能力；五刺激造血功能

5、，促进骨髓抑制的恢复，使病人可以耐受全身大剂量的放疗或化疗，减轻病人接受抗癌治疗时的损伤，增加对抗癌治疗的耐受性，提高放、化疗的效果。cikcik细胞治疗技术简介细胞治疗技术简介ocik（cytokines -induced killer cell，细胞因子诱导的杀伤细胞），细胞因子诱导的杀伤细胞） 是将人体外周血单个核细胞（是将人体外周血单个核细胞（pbmc）在体外模拟人体内环境，用多种细胞因子（如）在体外模拟人体内环境，用多种细胞因子（如cd3mcab、il-2、ifn-、il-1等）共同培养增殖后获得的一群异质细胞。等）共同培养增殖后获得的一群异质细胞。o其中其中cd3+ cd56+双阳

6、性细胞是双阳性细胞是cik细胞群体中主要的效应细胞。细胞群体中主要的效应细胞。ocik细胞兼具有细胞兼具有t细胞强大的抗瘤活性和细胞强大的抗瘤活性和nk细胞的非细胞的非mhc限制性的广谱杀瘤、抗病毒限制性的广谱杀瘤、抗病毒活性活性 ocik又被称为具有又被称为具有nk细胞作用的细胞作用的t淋巴细胞淋巴细胞ocik细胞分泌的细胞因子能有效激活机体的免疫系统，提高病人自身抗肿瘤和抗病毒的细胞分泌的细胞因子能有效激活机体的免疫系统，提高病人自身抗肿瘤和抗病毒的能力。能力。cik 细胞形态细胞形态14d20cik细胞杀瘤机理细胞杀瘤机理lfa-1=icam-1cd3交连交连肿瘤肿瘤细胞细胞识别识别ci

7、kcik细胞抗肿瘤作用机制图细胞抗肿瘤作用机制图cikcik细胞杀伤肿瘤细胞电镜照片细胞杀伤肿瘤细胞电镜照片cikcik细胞抗肿瘤的优势细胞抗肿瘤的优势o增殖速度快，主要效应细胞cd3+cd56+细胞的增殖可达1000倍。o杀瘤活性高：其杀伤活性远高于其它细胞疗法，如：lak。o杀瘤谱广：cik细胞对消化道肿瘤、肺癌、肾癌、恶性黑色素瘤、淋巴瘤、肝癌、白血病等均表现出强大的杀伤活性。o对耐药肿瘤同样可以起到杀伤的作用。o杀瘤活性不受某些免疫抑制剂的影响（如环孢素a（csa）和fk506）。o能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞fas-fasl凋亡。o对正常骨髓造血前体细胞毒性很小。cikcik细胞回输

8、前后患者外周血效应细胞亚群的变化细胞回输前后患者外周血效应细胞亚群的变化 cd3+ cd3+cd4+ cd3+cd8+ cd3+cd56+回输前 73.13.4 36.43.1 34.55.2 6.52.0 10.83.6回输后 76.28.5 38.2.49.8 40.09.8 20.17.2 15.74.9dc数突状细胞因其成熟时有数突样或伪足样突起而得名。是目前已知的体内功能最强的抗原呈递细胞（ apc），与其它apc相比，其最大特点是能显著刺激已活化的或记忆性细胞作为dc前体存在于外周血、骨髓等多种组中，多种细胞因子能在体外刺激dc的生长和分化。具有激活静息性t淋巴细胞成为抗原特异性细

9、胞毒性t 淋巴细胞（cytotoxic t lymphocytes, ctl）的特殊功能。 树突细胞（dendritic cell, dc）外形不规则，细胞核大、不规则，胞质较少，由于这类细胞具有长的胞浆突起，呈树突状故称为树突细胞。dc形态形态 7d40这里添加文字这里添加文字dc细胞抗瘤优势与特点：细胞抗瘤优势与特点：很少量的很少量的dcdc即可激发即可激发强大的强大的t t细胞杀瘤反应细胞杀瘤反应可致敏辅助可致敏辅助t t细胞的多细胞的多种细胞因子，以激活种细胞因子，以激活静止状态的静止状态的t t细胞细胞（dc刺激免疫反应的特点）帮助重建肿瘤患者帮助重建肿瘤患者对肿瘤细胞的免疫对肿瘤细

10、胞的免疫监视功能监视功能dc-cik共培养技术简介共培养技术简介 是在是在cik诱导体系中加入已诱导成熟的诱导体系中加入已诱导成熟的dc，共同培养，直至细，共同培养，直至细胞成熟。胞成熟。dc-cik共培养，不仅能够提高共培养，不仅能够提高cik细胞杀伤作用，而且也细胞杀伤作用，而且也能显著提高能显著提高dc的功能。的功能。 采 集 外 周 全 血 6 0 -100ml分离pbmccik细胞诱导及培养dc诱导及培养dc成熟肿 瘤 抗原成熟dc-cik5-7d5-7d12-16d适当因子适当因子适当因子活率活率90%数量数量5-10 109细菌、真菌、细菌、真菌、支原体检测支原体检测dc-cik

11、联合培养细胞特点联合培养细胞特点增殖活性提高增殖活性提高dc-cik联合培养细胞特点：联合培养细胞特点：细胞毒活性提高细胞毒活性提高肿瘤综合基础优化治疗一线选择！肿瘤综合基础优化治疗一线选择！cik/dccik/dc免疫治疗与三大常规治疗方法的对比优势免疫治疗与三大常规治疗方法的对比优势这里添加文字这里添加文字这里添加文字生生物物医医学学细细胞胞实实验验室室gmpgmp认证的认证的200200平米整体万级、平米整体万级、局部百级实验室，必备的设局部百级实验室，必备的设备备完善的实验室管理和技术标准完善的实验室管理和技术标准操作手册及严格的治疗保证系操作手册及严格的治疗保证系统统全程检测、保证细

12、胞保证全程检测、保证细胞保证细胞数量与质量。细胞数量与质量。cik/dccik/dc细胞治疗流程细胞治疗流程第一步：采集患者外周血第二步：dc/cik培养培养第三步：观察细胞数量质量第四步：cik/dc回输cik/dc细胞治疗流程细胞治疗流程cik/dccik/dc细胞治疗的适应症细胞治疗的适应症适用于各种不同病程阶段肿瘤的治疗（适用于各种不同病程阶段肿瘤的治疗（细胞淋巴癌细胞淋巴癌/瘤瘤除外）除外） 呼吸系统：肺癌（小细胞肺癌、鳞癌、腺癌）等呼吸系统：肺癌（小细胞肺癌、鳞癌、腺癌）等消化系统：肝癌、胃癌、肠癌消化系统：肝癌、胃癌、肠癌 食道癌食道癌 胰腺癌胰腺癌 等等 泌尿系统：肾癌、肾上腺

13、癌、膀胱癌、前列腺癌及其转移癌等泌尿系统：肾癌、肾上腺癌、膀胱癌、前列腺癌及其转移癌等 血液系统：急慢性白血病、淋巴瘤（除血液系统：急慢性白血病、淋巴瘤（除t t细胞淋巴瘤）。细胞淋巴瘤）。 其他肿瘤：恶性黑色素瘤、鼻咽癌、乳腺癌、舌癌等。其他肿瘤：恶性黑色素瘤、鼻咽癌、乳腺癌、舌癌等。 对胸水、腹水的胸腹腔灌注治疗效果显著。对胸水、腹水的胸腹腔灌注治疗效果显著。 cik/dc 细胞治疗注意事项与禁忌症以下情况慎用或遵医嘱：以下情况慎用或遵医嘱：1 1正在使用免疫抑制药物，或器官移植后长期使用免疫抑制剂的患者；正在使用免疫抑制药物，或器官移植后长期使用免疫抑制剂的患者；2 2正在接受化疗、放疗

14、患者，不能与化疗、放疗同时应用，一般要求间隔正在接受化疗、放疗患者，不能与化疗、放疗同时应用，一般要求间隔1 1周或以上；周或以上；3 3严重肝、肾功能异常者；严重肝、肾功能异常者；4 4严重凝血功能异常者；严重凝血功能异常者；5 5近期内有活动性出血史者；近期内有活动性出血史者；6 6严重感染未控制或高热患者；严重感染未控制或高热患者；7 7严重的心脑血管疾病、糖尿病患者；严重的心脑血管疾病、糖尿病患者；8. 8. 严重自身免疫性疾病患者；严重自身免疫性疾病患者；9. 9. 孕妇或哺乳期妇女；孕妇或哺乳期妇女；1010顽固性或持续性癫痫患者；顽固性或持续性癫痫患者；11. rh11. rh阴

15、性患者（自体血可用）。阴性患者（自体血可用）。禁忌症：禁忌症：1.1.细胞淋巴癌细胞淋巴癌/ /瘤患者；瘤患者；2. hiv2. hiv阳性患者；阳性患者；3. 3. 严重过敏体质者，尤其对严重过敏体质者，尤其对il-2il-2过敏患者。过敏患者。cik/dc 细胞治疗注意事项与禁忌症cik/dccik/dc细胞治疗的安全性及不良反应细胞治疗的安全性及不良反应u dc dc细胞治疗和细胞治疗和cikcik细胞治疗的安全性好，至今未有严重不良反应细胞治疗的安全性好，至今未有严重不良反应（严重的变态反应、肝肾功能损害、骨髓抑制等）的报道。（严重的变态反应、肝肾功能损害、骨髓抑制等）的报道。 u少部

16、分患者可出现一过性类流感样症状，如发烧、头痛、关节酸痛，少部分患者可出现一过性类流感样症状，如发烧、头痛、关节酸痛，按常规处理即可，大多可自行缓解。按常规处理即可，大多可自行缓解。u 其治疗有效性确切，安全性高，副作用极小，在广泛的临床应用其治疗有效性确切，安全性高，副作用极小，在广泛的临床应用中得到证实中得到证实。 联合治疗方案联合治疗方案联合治疗的意义联合治疗的意义术后术后+cik/dc快速恢复手术造成的免疫损伤；快速恢复手术造成的免疫损伤；特异性清除术后微小残余肿瘤病灶，防治转移与复发；特异性清除术后微小残余肿瘤病灶，防治转移与复发；增强对化疗药物敏感性；增强对化疗药物敏感性；增强放疗敏

17、感性，减少放疗毒副作用；增强放疗敏感性，减少放疗毒副作用；抵抗化疗药物的免疫抑制作用；抵抗化疗药物的免疫抑制作用；支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；放疗放疗+cik/dc化疗化疗+cik/dc常规治疗无效常规治疗无效cik/dc单用单用 直接杀伤肿瘤细胞；直接杀伤肿瘤细胞；活化后产生大量炎性细胞抑制瘤、杀瘤；活化后产生大量炎性细胞抑制瘤、杀瘤；诱导肿瘤细胞凋亡；诱导肿瘤细胞凋亡；促进促进t细胞增殖活化；细胞增殖活化；提高机体免疫力；提高机体免疫力；推荐推荐cik/dccik/dc联合治疗方案联合治疗方案典型病例典型病例 董某，男，董某，男，6666岁岁o右肾颗粒细胞癌

18、右肾颗粒细胞癌, ,双肺转移双肺转移o治疗治疗9 9个月后个月后, ,接近接近crcr 部分患者治疗后肿瘤体积先增大，而后逐步缩小。部分患者治疗后肿瘤体积先增大，而后逐步缩小。细胞回输前后临床有效性的研究临床有效性的研究1、2000年yamazakit 等人在柳叶刀杂志报道了cik预防肝癌根治性肿瘤切除术后复发的随机对比临床研究。统计显示，经过cik治疗的病人肝癌复发的危险降低了41%， 3年无复发率为48% (对照组：33%)。2、天津医科大学附属肿瘤医院任秀宝等应用dc-cik治疗非小细胞肺癌并进行了3年临床研究。术后42例生物治疗+化疗组与同期42例常规化疗对照组对比2年总生存率显著提高

19、94.7，对照组为78.8%7.0%（p0.05)。3、上海第二军医大曹雪涛、万涛教授等2008年完成了150例转移性晚期大肠癌应用肿瘤抗原负载dc细胞治疗的临床研究，研究结果cr+pr达到46.2%，显著高于随机对照化疗组22.5%。4、苏州大学附属第三医院蒋敬庭等进行cik治疗29例老年人中晚期胃癌患者副反应分析。结果回输患者pr8例，mr9例，sd7例，pd5例，总缓解率58.6%5、广州中山大学附属第三医院司徒杰等报道了9例肾癌患者cik治疗的情况。应用cik治疗后，肾癌患者体内的t细胞亚群比例有治疗前的抑制状态恢复到正常比例，患者随访最长4年均无复发及转移。目的：评价非小细胞肺癌患者

20、术后行常规化疗，再接受目的：评价非小细胞肺癌患者术后行常规化疗，再接受dcdc细胞活化的细胞活化的cikcik细胞治疗细胞治疗对患者免疫反应的作用。对患者免疫反应的作用。方法方法84例iiii期非小细胞肺癌 对照组 42例，术后只行常规化疗 研究组 42例，术后行化疗，并采取dc活化的cik细胞治疗评价无病生存率和总生存率检测cik细胞针对肿瘤细胞的细胞毒性结果结果cik细胞的细胞毒性:通过dc细胞的活化被显著提高2年总生存率:研究组对照组（p0.05）2年无病生存率：无显著差异。dc细胞活化的cik细胞治疗在肿瘤无进展患者能增加具有抗瘤作用的细胞因子的产生（包括：ifn- ，mig，tnf和tnf ），但在发生复发和转移的患者体内无此作用。dc细胞活化的细胞活化的cik细胞提高非小细胞肺癌患者术后化疗的抗细胞提高非小细胞肺癌患者术后化疗的抗肿瘤作用肿瘤作用天津肿瘤医院任秀宝等天津肿瘤医院任秀宝等美国美国细胞治疗细胞治疗20092009年，第年，第1111卷，