电泳实验中常用到的缓冲剂tris和caps_第1页
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文档简介

1、湖北新德晟材料科技有限公司CAS1135-40-6 CAPS试剂与Tris在电泳实验中的应用区别CAPS试剂即环己胺丙磺酸，是一种氨基磺酸盐，具有两性，应用最广泛的就是在水性聚异氰酸酯涂料中以及HPLC分离、SDS-PAGE凝胶电泳等生化实验的生物缓冲液中。作为生物缓冲液时，CAPS与Tris、MOPS类似，都可用于电泳缓冲液，但又有区别，我们可以先了解下电泳缓冲液的要求。电泳是指带电粒子在电场作用下，想着与其电性相反的电极移动，在确定条件下，带电粒子的移动速率（迁移率）固定。生化实验中，带电粒子通常是蛋白质胶粒、核酸等，不同的蛋白质或核酸迁移率不同，从而会相互分离。由于蛋白质和核酸颗粒对pH

2、非常敏感，所以电泳液中必须加入缓冲剂来保护蛋白质或者核酸。环己胺丙磺酸CAPS在外加电场的电压固定和电泳时间等条件相同时，不同的电泳粒子迁移率不同，所以蛋白质或核酸的大小不同或种类不同，迁移率就不同。不同粒子的迁移率差值即分开距离与电压和电泳时间成正比。根据电泳粒子的大小不一，其使用的电泳缓冲液也不一样。CAPS缓冲液：适用于高分子量的蛋白质（大于20KD）的电泳，即western blot。由于CAPS制成的电泳缓冲液中只含有EDTA、甲醇，蛋白质凝胶电泳PVDF不仅用于蛋白质的分离，也可以用于后续的蛋白质测序。Tris缓冲液：通常用于核酸DNA的电泳，即Southernblot。其中TEA用于大于13kb的DNA片段，分离效果好，可用于回收DNA；TBA用于小于1kb的DNA片段，不过其中的硼酸会影响DNA回收及后续的酶反应实验。Tris也可以用于低分子量蛋白的印迹实验，不过要进行蛋白质测序时不能用带有甘氨酸，需要用Tris-Tricine+EDTA缓冲体系。MOPS缓冲液：电泳时通常用于配制RNA电泳缓冲液，即Northern blot。除了上述的CAPS、Tris、MOPS之外，还有一些其它的电泳缓冲液，在整个电印迹实验中，缓冲

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