邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计

1、可见分光光度法测定铁的条件实验可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计院系：检 验 学 院班级：12 级生物技术班指导老师：杨琴小组成员：沈艳林、田赋、邓纯纯、郑祥、谭诗航、苏曼、邱丽莎、殷良俊、易柳可见分光光度法测定铁的条件实验目录摘要 .1引言 .2正文 .31分光光度技术 .32分光光度法测定元素铁含量的研究概况.33分光光度法测定铁的 6种方法 .33.1邻二氮菲分光光度法 .33.1.1方法原理 .33.1.2化学反应式 .33.2 BPT-OP分光光度法 .33.3硫氰酸盐分光光度法测铁含量 .33.3.1方法提要 .33.3.2主要反应 .33.4磺基水杨酸分光光度法测铁

2、含量 .33.4.1方法原理 .33.5固相萃取分光光度法测铁含量 .33.5.1方法原理 .43.6用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 .43.6.1方法原理 .44邻二氮菲分光光度法测铁含量 .44.1邻二氮菲法简介 .44.2邻二氮菲法的优点 .45邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择.45.1如何确定适宜的条件 .45.2最适波长的选择 .45.3显色剂用量的选择 .45.4显色时间的选择 .45.5溶液 pH的选择 .45.6显色温度的选择 .56 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进.5参考文献 .6实验设计部分 .7可见分光光度法测定铁的条件实验摘要本文主要研究用邻二氮菲分光光

3、度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。采用了邻二氮菲作显色剂、 盐酸羟胺作还原剂， 以工作曲线法测定总铁含量，对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度，且讨论了测定的最佳条件， 找出处理方法的良好条件和良好效果。本法灵敏、可靠，便于推广。【关键词】邻二氮菲；分光光度法；新血宝胶囊；铁含量1可见分光光度法测定铁的条件实验引言铁元素为人体重要元素之一， 人体缺血容易导致一些贫血症状甚至疾病， 人体缺血会影响血红蛋白， 肌红蛋白的合成， 是某些酶的活性降低， 引起人体某些生理上的变化， 从而导致免疫力降低， 智力降低， 机体抵抗力降

4、低而引起一系列疾病产生。新血宝胶囊为一种胶囊剂，内容物为一种棕黄色的粉末，每粒装 0.25 克；气香，味微苦、甘，有铁腥味。为内科虚证类非处方药药品。功能主治：补血益气，健脾和胃；用于痔疮出血、月经过多、偏食等原因所致的缺铁性贫血。成分为鸡血藤，黄芪，大枣，当归，白术，陈皮，硫酸亚铁。测定新血宝胶囊的铁含量对人体健康有重要的意义。 本实验采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊的铁含量， 该法操作简单， 灵敏度较高。 但是采用此种方法将受到很多因素的影响， 根据查找的文献可知， 目前有硫氰酸盐分光光度法测铁含量、磺基水杨酸分光光度法测铁含量、 固相萃取分光光度法测铁含量、 用火焰原子吸收分光光度法

5、测铁含量、邻二氮菲分光光度法测铁含量这几种方法，我们选取邻二氮菲分光光度法进行研究。 影响的因素有吸收波长， 显色剂的用量，显色的反应时间，溶液的 pH，盐酸羟胺的用量，显色温度，溶剂种类的选择等。本实验主要讨论其中 5 个条件： 最适波长的选择、 显色剂用量的选择、 显色时间的选择、 溶液 pH的选择、 显色温度的选择。 并在此基础上加以改进，加入表面活性剂曲拉通 X-100，对 Fe2+与邻二氮菲的显色反应具有增敏作用。2可见分光光度法测定铁的条件实验正文1 分光光度技术有色溶液对光线有选择性的吸收作用， 不同物质由于其分子结构不同， 对不同波长线的吸收能力也不同，因此， 每种物质都具有其

6、特异的吸收光谱。 有些无色溶液，光虽对可见光无吸收作光光度技术吸收用， 但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。分光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是（分光光度法）主要是指利用物质特有的Lambert 和 Beer 定律。2 分光光度法测定元素铁含量的研究概况微量元素是维持人体新陈代谢的重要元素，人体对微量元素摄人量过低或过【1 】高都不利于健康， 严重者甚至会危及生命 。因此，在食品、医药 ( 尤其是中药 ) 、卫生等方面对微量金属元素的含量测定均有严格要求， 对微量金属元素的测定方法进一步深入研究具有重大意义。 目前，测定微量金属元素的方法有原子吸收分光光度法、 ICPAES法

7、、容量法、分光光度法等，其中分光光度测定方法简便、快速、准确，具有推广和普及的价值。根据近年国内外有关文献的报道，就铁金属元素的分光光度测定方法的研究现状进行概述。3 分光光度法测定铁的6 种方法3.1邻二氮菲分光光度法3.1.1方法原理：在 pH50，以邻二氮菲 (phen) 作显色剂，与二价铁形成红色二元络合物，最大吸收波长为 510 nm。测定时，在 pH=2090 的条件下，用盐酸羟胺将三价铁还原为二价铁，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（ （Fe(phen)3） 2+）。此后用分光光度法测定可得到总铁量。3.1.2化学反应式：2 Fe3+ + 2 NH2OHHCl = 2 Fe

8、 2+ + N 2 + 2 H 2O + 4 H+ + 2 Cl -盐酸羟胺将Fe3+还原为 Fe2+3.2 BPT-OP 分光光度法BPT(4 ，7二苯基 1， 10邻二氮菲 ) 是一种与联吡啶、邻二氮菲 ( 又名邻二氮菲 ) 性质相似，但显色作用更灵敏的显色剂。在 HAcNaAc(最佳 pH=4O 5.0) 缓冲溶液中加入乳化液 OP，Fe3+ BPT迅速转变为 Fe2+BPT，最大吸收波长位于 530 nm 处，线性范围是 000-0 35 mg/L 。其灵敏度很高，常用于粮【2 】食、蔬菜等食品中微量铁的测定。3.3硫氰酸盐分光光度法测铁含量（铝及铝合金化学分析方法- 铁的测定）3.3

9、.1方法原理：在酸性溶液中，铁与硫氰酸盐形成橙红色硫氰酸铁。3.3.2主要反应：Fe(NO 3 ) 3+3NaSCN=Fe(SCN)+3NaNO【3】3.4磺基水杨酸分光光度法测铁含量3.4.1方法原理：磺基水杨酸是一种光度分析中的常用试剂 , 在 PH=1.82.5 时与铁生成紫红色络合物 , 在 PH=48 时与铁生成红色络合物 , 在 PH=8 11.5 时与铁生成黄色络合物本方法采用黄色络合物进行检测 , 该络合物的最大吸收波长为 420nm。3可见分光光度法测定铁的条件实验3.5固相萃取分光光度法测铁含量3.5.1方法原理：用 Sep-pak C18柱在采样现场萃取 Fe2+与显色剂

10、形成的有色络合物 , 在实验室洗脱吸附在 Sep-pak C18 柱上的有色络合物 , 用分光光度法测定 Fe2+质量浓度【 5】。3.6用火焰原子吸收分光光度法测铁含量3.6.1方法原理：原子吸收光谱是利用铁元素的基态原子对特征辐射线的吸收程度进行定量分析的方法。 试样中铁元素的化合物在高温中被解离成基态原子， 光源发射出的特征辐射线经过原子蒸汽时，被基态原子吸收。在一定条件下， 被吸收的程度与基态原子的数目成正比。 通过检测器检测特征辐射线被吸收的程度， 就可以测【 6】得试样中被测铁元素的含量。4 邻二氮菲分光光度法测铁含量4.1 邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂， 选择测定微量铁的适宜

11、条件和测量 条件，并用于工业盐酸中铁的测定。4.2邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。5 邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择5.1 如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。5.2最适波长的选择：准确移取 1.5ml 50ug/ml 标准铁 Fe2+溶液，置于 50ml 容量瓶中，加入 1.0ml10%盐酸羟胺溶液、 10ml 乙酸铵缓冲液、加 2.0ml0.1%啉菲啰啉溶液，以水稀释至刻度

12、，摇匀，用分光光度计，在400 至 600nm之间，每 10nm记录一次吸光度，如图1 所示，其最大吸收波长为510nm.5.3显色剂用量的选择：准确移取 1.5ml 50ug/ml 标准铁 Fe2+溶液，分别加入 8 个 50ml 具塞比色管中，加入1.0ml 10% 盐酸羟胺溶液、 10ml 乙酸铵缓冲液、加 0.3 ，0.5 ， 1.0 ，1.25 ，1.5 ， 2.0 ，3.0 ，4.0ml 0.1% 啉菲啰啉溶液，以水稀释至刻度，在波长为510nm处分别测其吸光度 A，以啉菲啰啉的体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度 - 试剂用量曲线，从而确定出最佳显色剂用量为2ml 最佳 【7

13、 】。5.4显色时间的选择：取 50ml 容量瓶加入 2ml 铁标准液， 1ml 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2min，加入 2ml 邻二氮菲溶液， 5ml 醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀，在分光光度计上，以 510nm处，用 1cm吸收池，以去离子水为空白溶液做参比溶液，测定吸光度，以后每隔半小时测定一次。5.5 溶液 pH 的选择：取 6 个 50ml 容量瓶，每个加入 2ml 铁标准液， 1ml 盐酸羟胺溶液，摇匀，放置 2min，再加入 2ml 邻二氮菲溶液，摇匀。分别从滴定管中加入 10ml， 12ml，16ml，18ml，20ml 的 0.1mol l 的 NaOH溶液。以去离子水稀

14、释至刻度线， 摇匀，在 510nm处，以去离子水为空白，测定各溶液的吸光度。4可见分光光度法测定铁的条件实验5.6 显色温度的选择：取 6 个 50ml 容量瓶，各加铁标准液 2ml，1ml 盐酸羟胺溶液，摇匀，分别放入恒温箱（ 5,10,15,20,25,30,35 度），放置 2min，同时将 2ml 邻二氮菲溶液分别放入相应的恒温箱 2min，同温度的亚铁离子与邻二氮菲混合，用水稀释至刻度后，摇匀，放入恒温箱 2min，用 1cm吸收池，在 510nm处，测定吸光度。6 对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进在缓冲溶液 (pH=50) 存在下，以邻二氮菲 (phen) 作显色剂，加入表面活

15、性剂曲拉通 X-100，对 Fe2+与邻二氮菲的显色反应具有增敏作用，形成的Fe2+一 phenTriton 三元络合物呈红色，络合物的最大吸收波长为510nm，表观摩尔吸光系数为 1 2 105mol/(L/cm) ，可使灵敏度、选择性大为提高【8】。5可见分光光度法测定铁的条件实验参考文献【1】 陈杰，张欣荣，等微量元素与人体健康关系研究的回顾与展望J 生命科学仪器， 2003，1(1) ：41 44【 2】吴方琼 .BPT-OP分光光度法测定食品中的微量铁 期刊论文 - 西南民族学院学报 ( 自然科学版 ) 2003(01).【 3】工厂化学检验手册 P198页 . （国标 GB/T 6

16、789.4-2001 邻二氮菲分光光度法）【 4】 GB/T11911-1989.水质 , 铁、锰的测定 , 火焰原子吸收分光光度法 .【 5】环境监测管理与技术2007 年 06 期【 6】张国文 . 原子吸收分光光度法测定食品中微量元素J.粮油食品科技，2002,10 （6）:34 【 7】分析技术与操作（）- 电化学与光谱分析及操作，化学工业出版社；曾祥燕、丁佐宏主编 .【 8】梁国柱表面活性剂增敏光度法测定水样中的微量铁 J 南通职业大学学报， 2005， 19(2) ：29316可见分光光度法测定铁的条件实验设计性实验分光光度法测铁含量条件实验实验设计一、实验目的1、了解分光光度法测

17、铁的方法2、熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法3、熟悉实验设计的基本内容与方法4、掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量二、实验原理亚铁离子在 pH=39 之间的溶液中， 与邻二氮菲生成稳定的橙色络合物， 其反应式为：Fe2+3C12H8N2=Fe(C 12H8N2 ) 2+若用还原剂将 Fe3+还原为 Fe2+，则本法测得为总铁。2 Fe3+22+2 + 2 H2+ 2 Cl-+ 2 NH OHHCl = 2 Fe+ NO + 4 H其摩尔吸光系数为1.1 104，测试波长为 510nm.进行分光光度法分析测定时，其显色反应条件、 测量吸光度条件都对准确性有很大的影响。故应作条件选择实验。

18、三、仪器与试剂仪器：型分光光度计，50ml 容量瓶，移液管， PH 精密试纸试剂：铁标准溶液（ 100g/ml ）， 0.15%邻二氮菲水溶液， 10%盐酸羟胺水溶液，醋酸缓冲溶液， 0.1mol/L NaOH ，1%曲拉通 X-100。四、实验方法配置某一浓度的标准溶液，在分光光度计上，用1cm 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，在不同的波长下，邻二氮菲的不同用量，酸度不同，不同显色时间，测定相应的吸光度， 研究上述条件对吸光度的影响。并在最佳条件下测定新血宝胶囊的铁含量。（一）最适波长的选择在 50ml 容量瓶中准确加入 2ml 铁标准溶液，分别加入 1ml 盐酸羟胺溶液，摇匀放置

19、2min 后，再加入 2ml 邻二氮菲溶液， 5ml 醋酸缓冲溶液，加水稀释至刻度，摇匀。以去离子水为空白溶液作参比溶液， 在不同波长下测定一次吸光度， 结果计入表格。7可见分光光度法测定铁的条件实验波长（nm）T (%)吸光度A波长（nm）T (%)吸光度A波长（nm）T (%)吸光度A440450460470480490492494496498.0500.0502.0504.0506.0508.0510.0512.0514.0516.0518.0520.0530.0540.0550.0560.0（二）显色剂的用量选择取 6 只 50ml 容量瓶，分别精密吸取 2ml 铁标准液， 5ml 醋

20、酸缓冲溶液， 1ml 盐酸羟胺，摇匀放置 2 分钟后，依次加入邻二氮菲水溶液 0.1ml，0.5ml，1ml，2ml， 3ml ， 4ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置 10min，以不加铁标准液，加入 5ml 醋酸缓冲溶液， 1ml 盐酸羟胺， 2ml 邻二氮菲为空白参比，在最适波长处，测定吸光度，结果记入表格。显色剂0.10.51.02.03.04.0mlT(%)吸光度A8可见分光光度法测定铁的条件实验（三）显色时间的选择取 50ml 容量瓶加入 2ml 铁标准液， 1ml 盐酸羟胺溶液，摇匀放置 2min 后，加入 2ml 邻二氮菲溶液， 5ml 醋酸缓冲溶液，加水稀释至刻度，摇匀，在分光光度计上，以去离子水为空白溶液做参比溶液，在最适波长处，测定吸光度，以后每隔半小时测定一次，结果记入表格。时间0h0.5h1.0h1.5h2.0h2.5h3.0h3.5h4.0hT(%)吸光度A（四）溶液 pH 的选择取 6 个 50ml 容量瓶，每个加入 2ml 铁标准液，1ml 盐酸羟胺溶液，摇匀放置 2min 后，再加入 2ml 邻二氮菲溶液，摇匀。分别从滴定管中加入 10ml，12ml，16ml，18ml，20ml 的 0.1moll 的溶液。加水稀释至刻度，摇匀，以