药物分析-8-1-2(改)培训教学课件

1、 （一）开环反应：适用于a,a未取代，b, 为烷基或羧基取代的。 CONHNH 2 N KMnO 4 或Br 2 COONa N CNBr 溴化氰 CNBr COOH N CHOHCHO COOH Ar Ar NNHCHCH COOH 2Ar-NH 2 1. 戊烯二醛反应（kning反应） 二、鉴别试验二、鉴别试验 2. 2，4-二硝基氯苯反应 （Vongerichten反应） CONHNH 2 N NaOH COONa N NO 2 NO 2 Cl NO 2 NO 2 COONa N CHOH NO 2 NO 2 COONa N NaOH (二). 酰肼基团的反应 CONHNH 2 N CO

2、OH N 4e + N 2 常用的氧化剂：I2、Br2、KBrO3、AgNO3 1.还原反应： 2.缩合反应：与芳醛缩合形成腙， 如香草醛、水杨醛、二甲氨基苯甲醛 CONHNH2 N + OH OCH3 CHO N CONHN OH OCH3 CH 黄色max=380nm l(四) 分解产物的反应分解产物的反应 与酸碱共热，以降解产物鉴别 吡啶臭味尼可刹米异烟肼 加热或钠石灰无水 / 32 , CONa 252 32 )HNH(C / 加热或钠石灰无水 尼可刹米 CONa 用红色石蕊试纸检查-变蓝 (三三) 形成沉淀反应形成沉淀反应 吡啶环与重金属盐类吡啶环与重金属盐类-金属配合物的沉淀金属配

3、合物的沉淀 尼可刹米尼可刹米 + CuSO4 + NH4SCN 草绿色配合物草绿色配合物 二乙胺 三三.有关物质检查有关物质检查 (一一)异烟肼中游离肼的检查异烟肼中游离肼的检查 1.薄层色谱法薄层色谱法-（对（对-二甲氨基苯甲醛二甲氨基苯甲醛+肼肼-成腙成腙-显黄色）显黄色） 2.比浊法比浊法-加水杨醛的乙醇溶液观察浑浊加水杨醛的乙醇溶液观察浑浊 (二二)尼可刹米中有关杂质检查尼可刹米中有关杂质检查-HLC (三三)硝苯地平中有关物质检查硝苯地平中有关物质检查-HPLC l 第二节第二节 喹啉类药物喹啉类药物 l一一.基本结构与化学性质基本结构与化学性质 l l l化学性质: l 1.碱性-

4、脂环氮碱性强 l 2.旋光性 l 3.荧光特性-稀硫酸溶液中显蓝色荧光 N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 2 . H 2 S O 4 . 2 H 2 O （喹核碱） pKb=5.07 （喹啉环） pKb=9.7 硫酸奎宁、硫酸奎尼丁 二.鉴别反应 (一)绿奎宁反应-水溶液+溴+氨试液-显绿色 (二)光谱特征-紫外，荧光，红外 (三)无机酸盐-硫酸奎宁的硫酸根-特征反应 三三.特殊杂质检查特殊杂质检查 (一一)硫酸奎宁中杂质检查硫酸奎宁中杂质检查 1.酸度酸度 2. 三氯甲烷三氯甲烷-乙醇中不溶物质乙醇中不溶物质 3.其他金鸡纳碱其他金鸡纳碱-HLC (二二)氧

5、氟沙星中特殊杂质反应氧氟沙星中特殊杂质反应-HPLC 第三节第三节 托烷类药物托烷类药物 一一.基本结构与化学性质基本结构与化学性质 OCOCH CH 2OH N CH 3 .H 2SO4.H2O 2 莨菪烷衍生的氨基醇和不同有机酸缩合成酯类的生物碱 硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱 化学性质 1.水解性-酯基 2.碱性-叔胺氮原子 3.旋光性 二. 鉴别试验 (一) 托烷生物碱一般鉴别试验 (二) 氧化反应 (三) 沉淀反应 (四)硫酸盐与溴化物反应 三. 氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查 1.酸度-强酸弱碱盐 2.易氧化物（杂质含不饱和双键使高锰酸钾褪色） 3.其它生物碱-加氨试液不得发生浑浊 l第三

6、节第三节 吩噻嗪类药物分析吩噻嗪类药物分析 一、结构分析 S N R R 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 共同点： （1）硫氮杂蒽母核； （2）含两个杂原子多环共轭体系，有UV吸收； （3）S被氧化生成砜或亚砜； （4）与金属离子络合，生成有色物，可比色测定 l不同点：R，R取代基不同 RR盐类药名 -(CH2)3N(CH3)2-H HCl盐酸丙嗪 -(CH2)3N(CH3)2-Cl HCl盐酸氯丙嗪 -CH2CH(CH3)N(CH3)2 -H HCl盐酸异丙嗪 二、鉴别 1、特征的紫外吸收： 具有三个峰值205nm、254nm和300nm附近，若 被氧化则有四个吸收峰，可用于判断样

7、品中有无氧 化物。 2. 显色反应： （1） （2）（可用于比色测定） )(红色樱红呈色母核 氧化剂 呈色环上的 或 23 PdClFeCl S 氧化剂：H2SO4、溴水、FeCl3、H2O2 三.特殊杂质检查 吩噻嗪类药物-有关物质检查-HLC 主成份自身对照法控制限量 l第五节第五节 苯苯并并二氮杂卓类药物二氮杂卓类药物 一. 结构分析 CCl NC N NHCH3 O CH2 12 3 45 6 7 8 9 CCl NC N CH2 CH3 O 9 8 7 6 54 3 21 氯氮卓（1955年合成） 地西泮（1959年合成） l共同点：共同点： （1）二氮杂卓环为七元环，环上氮原子 具

8、有强碱性，苯基的取代使碱性降低， 可进行非水滴定法测定； （2）UV吸收，用于含量测定； （3）环比较稳定，在强酸性下水解， 形成相应的二苯甲酮衍生物，可用 于鉴别和比色测定。（氯氮卓水解 生成芳伯胺基；地西泮水解生成芳 仲胺基和甘氨酸）； （4）本品多为游离碱，不溶于水，而 溶于甲醇、乙醇和氯仿中。 二、鉴别二、鉴别 (一) 化学鉴别 1.沉淀反应 -有生物碱性质可与生物碱沉淀剂（碘化铋）作用 2.芳伯胺基反应： 氯氮卓水解生成芳伯胺基(重氮化偶合反应) 3.硫酸荧光反应： 本类药物加硫酸，在紫外灯下，呈荧光。 4.分解产物的反应-有机氯化物-氧瓶燃烧-氯化氢-Cl- (二) 紫外特征吸收和

9、红外吸收光谱 (三) 薄层色谱法 三.有关物质检查 (一) 氯氮卓中有关物质的检验 1. HLC 2. HPLC (二) 三唑仑中有关物质检查 GC l 第第六六节节 含量测定含量测定 l一一、非水碱量法、非水碱量法 在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和滴定（滴 定突跃不明显，难以判断滴定终点）。 在酸性非水介质中（如HAc中），则能显示出 较强的碱性，滴定突跃增大，可以顺利地进行中和 滴定。 1测定方法 供试品：适量 溶剂：HAc，一般用量1030ml 滴定剂：0.1mol/L HClO4 指示剂：结晶紫 做空白试验 2讨论讨论 适用范围 Kb10-8 有机碱盐。 K b为10-810-10

10、选冰醋酸作溶剂 Kb为10-1010-12 选冰醋酸和醋酐作溶剂 Kb 10-12 选醋酐作溶剂 4 HClOABH HAClOBH 4 HA不同，对滴定反应的影响也不同。 HAc中酸强度不相同 HClO4HBrHClH2SO4HNO3其它弱酸 有机弱碱的有机弱碱的盐的滴定盐的滴定 置换滴定，即用强酸（HClO4） 置换出与生物碱结合的较弱的酸（HA）. 中难电离）（gHAc 22 HgXAcBH2HgAcXBH2 a. 氢卤酸盐的测定氢卤酸盐的测定 氢卤酸gHAc中酸性较强，对滴定有影响。 排除方法： 加入过量的HgAc2/gHAc溶液 b.硫酸盐的测定硫酸盐的测定 （以硫酸奎宁的测定为例（

11、以硫酸奎宁的测定为例） 直接滴定法直接滴定法 注意硫酸盐的结构，正确判断反应的摩尔比。 N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 2 . H 2 S O 4 . 2 H 2 O （喹核碱） pKb=5.07 （喹啉环） pKb=9.7 两个N原子 l喹啉N，属于芳环族N，碱性较弱 l喹核N，属于脂环族N，碱性较强 l在水中硫酸是二元酸，能够解离出两个 氢离子，即 42SO H 4 HSOH 4 HSO 2 4 SOH l 在冰醋酸中硫酸是一元酸，能够解离出 一个氢离子，即 42SO H 4 HSOH l奎宁与硫酸结合时，一分子的硫酸 能与两分子的奎宁结合，即： N C

12、 H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 H N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 H + + S O 4 2 - . N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 H N C H ( O H ) N C H 3 O C H C H 2 H + + S O 4 2 - . N CH(OH) N CH3O CHCH2 H H + .ClO4 .HSO4 + - - N CH(OH) N CH3O CHCH2 H H + .ClO4 + - - .ClO4 滴定反应如下： +3HClO4+ l用HClO4直接滴定硫酸喹宁时，摩

13、尔比是1 3 OCOCH CH 2OH N CH 3 .H 2SO4.H2O 2 l用HClO4直接滴定硫酸阿托品 硫酸阿托品（莨菪碱）的结构如下： 反应的摩尔比是11 c. 硝酸盐的测定硝酸盐的测定 HNO3在gHAc中为弱酸，不影响滴定突跃。 HNO3具有氧化性，应采用电位法指示终点或 将HNO3破坏分解后再进行测定。 d. 磷酸盐及有机酸盐的测定磷酸盐及有机酸盐的测定 磷酸、有机酸为弱酸，不干扰滴定 终点指示方法终点指示方法 最常用的指示剂是-结晶紫 紫蓝蓝绿黄绿黄 （碱性区）（酸性区） 终点的颜色应用电位法校准。 二、氧化还原滴定法-铈量法 原理：适当pH下，用硫酸铈氧化吩噻嗪进 行测

14、定 开始时，吩噻嗪失去一个电子 游离基 （红色） 等电点吩噻嗪失去2个电子 无色， 终点：红色无色 条件：在硫酸性下 优点： （1）赋形剂不干扰,复方制剂中咖啡因、苯 丙胺、可待因、巴比妥类药物等不干扰； （2）反应为一价还原（Ce4+Ce3+）,对环 上取代基无作用； （3）用于原料药，也可用于制剂分析。 三三 比色法比色法 (一一)、酸性染料比色法、酸性染料比色法 1原理原理 在适当pH溶液中,有机碱（B）可以与氢离 子成盐,酸性染料（HIn）可解离成阴离子,阴离 子可与有机碱盐阳离子定量地结合成有色离子 对，而进入到有机相。通过测定有机溶剂提取 液的吸收度;或将有机溶剂提取液酸化或碱化，

15、 使与有机碱结合的酸性染料释放出来，测定染 料的吸收度来测得有机碱的含量。 BHHB InHHIn InBHBHIn 碱性药物 酸性条件 酸性染料 有色离子对 C H 3C CH 3 BrBr HO (CH 3)2HC SO3H CH(CH 3)2 O l溴麝香草酚蓝(BTB) lbrom thymol blue lpH 6.07.6（黄蓝） 2常用酸性染料 磺酞类指示剂 C Br BrBr Br HO CH3CH3 SO3H O C Br BrBr Br HO SO3H O l溴甲酚绿(BCG) lbrom cresol green lpH 3.65.2（黄蓝） l溴酚蓝(BPB) lbro

16、mophenol blue lpH 3.84.6（黄紫） l3主要条件主要条件 l最主要条件是水相的pH。 要求： 能使有机碱全部以盐的形式存在，酸性 染料能够解离成离子，以便它们定量地 结合成离子对而转溶于有机相，且又能 将剩余的染料完全保留在水相。 B + H + B H + H I n H + + I n H + O H O H H + pH（酸性）BH+，In BH+In-，有机溶剂提取的是HIn pH（碱性） In-，BH+ BH+In-，有机溶剂提取的是B l 水相pH的选择方法： 理论计算。 实验求得。 用待测的有机碱加入一定的酸性染 料，配制成一系列不同pH值的溶液， 分别用有

17、机溶剂提取后测定有机溶 剂提取液的吸收度，吸收度值最大 的溶液所对应的pH值就是水相的最 佳pH值。 (二二) 钯离子比色法：钯离子比色法： 原理： 吩噻嗪类药物可与一些金属离子 （如Pd2+）在适当pH值的溶液中形成有 色的络合物，借以进行比色测定。 Pd 2+ S S 2Cl - N S R R PdCl 2 pH2 讨论：讨论： （1）钯离子试剂： PdCl2和十二烷基硫酸酯钯盐. 用PdCl2时，形成的有色络合物水中溶 解度小,样品量大时,产生沉淀. 十二烷基硫酸酯钯盐,其络合物溶解度 大,吸收强度增大（约2倍）. （2）本法优点：氧化产物不干扰。 l四、四、UV法：法： l(1) 直接分光光度法： l(2) 萃取后分光光度法-消除其他成分的干扰 l(3) 二阶导数分光光度法： l(4) 萃取-双波长分光光度法： 直接分光光度法：直接