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文档简介

南通大学江苏省神经再生重点实验室蒋茂荣 双链闭环dna； 1kb-200kb； 独立存在于宿主染色体之外； 具复制起始点； 复制和转录不同程度依赖于宿主基因； 编码某些酶，使宿主具有特殊标志， 可供选择。1）.复制能力； （2）.容纳外源dna的能力； （3）.选择标记：抗生素耐受。（4）.引入多克隆位点； （5）.引入重组选择标记。 按功能分 1.克隆载体 2.表达载体 （一）、细菌培养物的生长和收获（二）、质粒dna的提取 1、碱裂解法小量制备质粒dna: a、细菌的收集； b、加入100l溶液，重悬细菌； c、加入200l溶液，使细菌悬液清亮； d、加入150l溶液，冰上放置3-5分钟； e、加入450l酚：氯仿混匀； f、12000rpm，离心5分钟； g、吸取上清，加入2倍体积无水乙醇，室温 静置2分钟； h、12000rpm离心5分钟，弃上清； i、75%乙醇洗涤，室温晾干； j、溶于适量te/r中。（一）、紫外光谱分析 通常使用样品的吸光度鉴定其浓度和纯度。（二）、eb荧光分析（三）、电泳鉴定 在凝胶电泳中，dna分子的迁移速度与分子量的对数值成反比关系。质粒dna经单一酶切后与dna marker进行电泳对照，

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