细胞生物学实验：实验二－线粒体和液泡系的超活染色与观察_第1页
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1、上次实验总结上次实验总结 实验名称实验名称：实验一 叶绿体的分离与荧光观察 实验结果实验结果：叶绿体提取效果理想，明视野下观察结果良好。荧光观察结果不理想。原因为显微镜没有调好。明视野下的叶绿体明视野下的叶绿体叶绿体自发荧光叶绿体自发荧光(续然实验组结果续然实验组结果)叶绿体自发荧光叶绿体自发荧光叶绿体间接荧光（吖啶橙）叶绿体间接荧光（吖啶橙）实验二实验二 线粒体和液泡系的超活染色与观察线粒体和液泡系的超活染色与观察指导教师：何春梅 林建中1 实验目的实验目的 观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布； 学习一些细胞器的超活染色技术。2 实验原理实验原理 活体染色是应用无毒或毒性较

2、小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。分为体内活体染色与体外活体染色。 詹纳斯绿 B是线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。 中性红中性红为弱碱性染料，对液泡系(即高尔基体)的染色有专一性，只将活细胞中的液泡系染成红色，细胞核与细胞质完全不着色，这可能是与液泡中某些蛋白质有关。3 实验材料实验材料,仪器和试剂仪器和试剂3.1 实验材料：实验材料： 人口腔上皮细胞，洋葱鳞茎内表皮，黄豆（拟南芥）幼根根尖。3.2 实验仪器实验仪器： 显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀

3、、镊子、双面刀片、解剖盘载玻片、凹面载玻片、盖玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。载玻片载玻片盖玻片盖玻片水浴锅水浴锅显微镜显微镜3.3 实验药品和试剂实验药品和试剂 Ringer溶液 10%、1/3000中性红溶液 1%、1/5000詹纳斯绿B溶液 4 实验步骤实验步骤4.1 人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察口腔上皮细胞的刮取和装片的制作口腔上皮细胞的刮取和装片的制作3737恒温水浴锅的金属板上恒温水浴锅的金属板上 装片的观察装片的观察线粒体线粒体细胞核细胞核4.2 洋葱鳞茎表皮细胞线粒体的超活染色观察洋葱鳞茎表皮细胞线粒体的超活染色观察洋葱鳞茎内表皮的撕取洋葱鳞茎内表皮的撕取 洋葱表

4、皮细胞用洋葱表皮细胞用于蛋白的亚细胞于蛋白的亚细胞定位研究定位研究明视野下的洋葱表皮细胞明视野下的洋葱表皮细胞43 植物细胞液泡系的超活染色与观察植物细胞液泡系的超活染色与观察 （附加实验）（附加实验） 根尖结构示意图根尖结构示意图拟南芥幼苗根尖细胞拟南芥幼苗根尖细胞5 实验数据的记录和分析实验数据的记录和分析 拍照口腔上皮细胞，示线粒体的形态与分布。 拍照洋葱表皮细胞，示中央大液泡、细胞核细胞质中线粒体的形态与分布。 拍照根尖部分的生长点的细胞，示液泡系的形态与分布。转基因发芽种子的转基因发芽种子的RFP检测检测对图片进行简单说明对图片进行简单说明（参考以下图例参考以下图例）转化植株的转化植株的Western检测检测407OsActinWT 7 12 1

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