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文档简介

1、基因工程(一)【考纲要求】基因工程的诞生A基因工程的原理及技术A基因工程的应用B蛋白质工程A【课前必记】【学习活动】1.下图为科学家通过基因工程方法培育转基因抗虫棉的大致过程。请据图分析回答:1 / 8培育抗虫棉的操作水平、操作环境、操作的目的分别是什么?这种育种方法最大的优点?获取Bt毒蛋白基因常用哪种酶?该酶的主要来源、作用特点、作用部位、作用结果分别是什么?利用PCR技术可大量扩增目的基因,试比较DNA的复制和PCR技术,完成下表。体内DNA复制PCR技术解旋方式解旋每的作用引物类型一小段RNA片段DNA聚合酶一般遵循原则原料、模板数量增加方式过程需用哪种酶?上图中的Ti质粒作为载体必须

2、具备哪些条件?该质粒上的T-DNA具有什么特点?过程所构建的A中启动子、终止子的位置及功能分别是什么?标记基因的功能是什么?图中培育抗虫棉所用的受体细胞是什么类型细胞?如果培育转基因动物常用的受体细胞是什么?由目的基因能够插入到受体细胞染色体的DNA中说明基因工程得以成功实施的结构基础和物质基础分别是什么?若目的基因在受体细胞中没有成功表达,可分别用什么方法检测是基因表达的哪个阶段没有正常完成?2.仔细观察下面的表格和图解,然后思考、讨论有关问题请分别写出限制酶BamH和限制酶Sma切割所识别的序列后的结果。只用限制酶Hind分别切割图2的外源DNA和图1的一个环状质粒,能分别得到几个DNA片

3、段?基因工程中常用一种限制性内切酶切割目的基因和运载体的原因?上图中若只用一种限制酶去切割质粒和外源DNA获取目的基因,应选用哪一种限制酶;用DNA连接酶处理切割后的质粒和所获得的目的基因(只考虑两两结合情况)能得到几种环状结果?如何解决其不足之处?如果用不同的限制酶切割目的基因和运载体应选用哪两种酶?切割后的目的基因两端若带有不同的黏性末端可否与运载体结合?其优点是?3.含重组质粒的受体细胞的筛选问题步骤:将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养,目的是筛选 。能在C中生长的大肠杆菌有 种。步骤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落,分别接种到D(含 和四环素)和E(含四环素)两个培养基的

4、相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于(选填“D”或“E”) 上,请在图中相应的位置上圈出来。【链接高考】2014各地高考真题1.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是A的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到的染色体上C的染色体上若含抗虫基因,则就表现出抗虫性状D只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异2.下列关于基因工程技术的叙述,正确的是A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C.载体质粒通常采用抗生素合成基因

5、作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达3.(多选)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示,下列叙述正确的是( )A、过程需使用逆转录酶 B、过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞C、过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备 D、过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因4.植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的 基因;而cDNA文库中含有生物的 基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可

6、首先建立该植物的基因组文库,再从中 出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物 的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的 ,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的 是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推测该耐旱基因整合到了 (填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。【检测反馈】1基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组。已知限制酶的识别序列和切点是,限制酶的识别序列和切点是。根据图示判断下列

7、操作正确的是()A目的基因和质粒均用限制酶切割 B目的基因和质粒均用限制酶切割C质粒用限制酶切割,目的基因用限制酶切割 D质粒用限制酶切割,目的基因用限制酶切割2.下列关于基因表达载体构建的相关叙述,不正确的是()A需要限制酶和DNA连接酶 B必须在细胞内进行C抗生素抗性基因可作为标记基因 D启动子位于目的基因的首端 3.基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的。在基因操作的步骤中,不进行碱基互补配对的是A. 人工合成目的基因 B. 目的基因与运载体结合C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测和表达4.下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是()A构建重组质粒过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶 B愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株C卡那霉素抗性基因(kanr)中有

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