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文档简介

1、SHMT的分离制备 原理：利用溶液中带有不同量的电荷的阳离子或阴离子，在外加电场中以不同的迁移速度向电极移动，而达到分离目的的分析方法。 电泳方案：聚丙烯酰胺凝胶电泳第1页/共7页操作准备 样品处理：超声波破碎大肠杆菌。 管型盘状电泳 电泳槽：盘状电泳槽国内有很多单位生产，也可因地制宜，自己制造，槽大多为圆筒形(图9)，也有长方形的，上、下槽分别接铂金丝电极，要注意电极到各胶管的距离相等，以保持各凝胶管的电场一致。 电泳仪：国内生产的型号很多，如北京六一仪器厂的DYY-型，电压在0600v内任意调节，电流输出0100mA，这类电泳仪比较恰当。 玻璃管：选择粗细均一的圆玻璃管，内径57mm左右，

2、管长70100mm。管口用金刚砂磨平，电泳管的清洁很重要，需浸入10%重铬酸盐-硫酸溶液中清洗，再用蒸馏水彻底淋洗干净，在管中滴入丙酮而后干燥备用。 第2页/共7页 聚胶架：普通试管架式样，有机玻璃制成，架的孔洞内装一乳胶管，要求乳胶管孔内径与玻璃管外径相同或略小。 微量注射器或微量进样器：加样时，由于需样品量极小，作定量分析时要求样品量准确，因此最好用或100l的微量进样器加样，也可用50或100l加液器代用。 普通注射器：主要用于灌胶和剥胶，2030ml，附加10号不锈钢长针头(约10cm长)。 第3页/共7页 其他：日光台灯，PH计，恒温水浴，烧杯，容量瓶，量筒，试管，漏斗，滤纸，电炉，电子天平等。 试剂 甲叉双丙烯酰胺(Bis)；丙烯酰胺(Acr)；四甲基乙二胺(TEMED)；过硫酸铵；核黄素(VB2)；三羟甲基氨基甲烷(Tris)；蔗糖；甘氨酸；盐酸等。 第4页/共7页分离胶的制备浓缩胶的制备待分离样品的准备加样电泳脱色

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