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文档简介

1977年，英国人Fred Sanger 发现，如果在DNA复制过程中掺入ddNTP，就会产生一系列末端终止的DNA链，并能通过电泳按长度分辨。 不同末端终止DNA链的长度是由掺入到新合成链上随机位置的ddNTP决定的。 由此诞生了以Sanger命名的测序原理即双脱氧链终止法测序原理。Sanger简介第1页/共5页dNTP和ddNTPoHoPHCH2碱基HOH23oo-oPoo-oPoo-o-2-脱氧核糖核苷酸HHoHoPHCH2碱基HH23oo-oPoo-oPoo-o-2，3-脱氧核糖核苷酸HH第2页/共5页双脱氧末端终止oHHCH2 AHOH23HH正常延伸延伸终止oHHCH2HO23oPoo-oPoo-oPoo-o-HHoPoo-磷酸二酯键-T GCoHHCH2 THOH23HHoHHCH2H23oPoo-oPoo-oPoo-o-HHoPoo-磷酸二酯键无法形成-A CGHdNTPdNTPdNTPddNTP继续延伸第3页/共5页测序反应5DNA Template3ACTTCGACAAC TGATTCGGAATTG53ddNTPLarge fragmentsSmall fragments毛细管电泳荧光检测TACTGATGTG荧光检测结果：53TACTGATGTGDNA测序结果：35TCA

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