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文档简介
1、学习必备欢迎下载名词解释第一章抗凝 :采用物理或化学方法除去或抑制某种凝血因子的活性,以阻止血液凝固;阻止血液凝固的物质称为 抗凝剂或抗凝物质碱性染料 :为阳离子染料,如亚甲蓝、天青、苏木素等;能接受质子,是染细胞核的染料酸性染料 :为阴离子染料,能释放质子,主要有伊红 Y 和伊红 B 两类,能结合细胞的碱性成分并染色,如血红蛋白、 嗜酸性颗粒成分等瑞氏染料 :是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料,溶于甲醇后解离为带正电的亚甲蓝和带负电的伊红离子第二章红细胞计数(RBC):指测定单位体积血液中红细胞的数量血红蛋白( Hb):是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋
2、白质,是红细胞内的运输蛋白嗜碱性点彩红细胞:是不完全成熟的红细胞,胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料(如亚甲蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以Wright 染色,则在粉红色的胞质中出现蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞血细胞比容 :是指一定体积的全血中红细胞所占体积的相对比例(旧称红细胞压积,指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值)网织红细胞 :是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞(未成熟),略大于成熟红细胞(直径为8-9.5 m),其胞质中残存的嗜碱性物质RNA 经碱性染料(如煌焦油蓝、新亚甲蓝等)活体染色后,形成蓝色或紫色的点粒状或丝网状沉淀物
3、,故称为网织红细胞红细胞沉降率 :简称血沉,是指在规定条件下,离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率白细胞计数 :指测定单位容积的外周血液中白细胞总数白细胞分类计数( DLC):指在显微镜下观察染色后血涂片上白细胞的形态,并进行分类计数,以求得各种白细胞的比值(百分率)和绝对值类白血病反应 :是机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应;当刺激因素去除后,类白血病反应也逐渐消失中性粒细胞毒性变化 :在严重的化脓性感染、败血症、恶性肿瘤、急性中毒、大面积烧伤等病理情况下,中性粒细胞可发生大小不均、中毒颗粒、空泡形成、杜勒小体、退行性变等形态改变中毒颗粒 :在严重感染及大面积烧伤等情况下,中
4、性粒细胞胞质中出现比正常中性颗粒粗大、大小不等、分布不均的紫黑色或深紫褐色颗粒,称为中毒颗粒空泡形成 :中性粒细胞粒细胞的胞质或胞核出现 1 个或数个空泡,是细胞发生脂肪变性和颗粒缺失的结果杜勒小体 :是中性粒细胞胞质中蓝色或灰色的包涵体,常单个或成群位于细胞边缘,大小约1 2um,由糖原颗粒和内质网组成;是胞质局部不成熟,即核质发育不平衡的表现;常见于严重感染,如肺炎、败血症和烧伤等退行性变 :白细胞出现胞体肿大、结构模糊、边缘不清、核固缩、核肿胀和核溶解(染色质模糊、疏松)等现象,常见于衰老和病变的细胞棒状小体 :白细胞胞质中出现的紫红色细杆状物质,1 个或数个,长约体,出现数个棒状小体,
5、呈束状排列(柴束状)的白细胞称为faggot1 6 m,称为棒状小细胞;主要见于急性粒中性粒细胞核左移 :外周血液的中性杆状核粒细胞增多或(和)出现晚幼粒细胞、中幼粒细胞,甚至早幼粒细胞的现象称为核左移;常见于化脓性感染、急性溶血以及应用细胞因子等,常伴有中毒颗粒、空泡形成、退行性变等毒性变化再生性核左移 :核左移伴白细胞总数增高称为再生性核左移,提示骨髓造血功能和释放能力旺盛,机体抵抗力强等学习必备欢迎下载退行性核左移:核左移伴白细胞总数正常或减少称为退行性核左移,提示骨髓释放功能受到抑制,机体抵抗力差中性粒细胞核右移:外周血液的中性分叶核粒细胞增多,并且5 叶核以上的中性粒细胞3% 时称为
6、核右移;常见于巨幼细胞性贫血、内因子缺乏所致的恶性贫血、感染、尿毒症、MDS等异型淋巴细胞:在病毒、原虫感染,药物反应、结缔组织疾病、应激状态或过敏原等因素刺激下,淋巴细胞增生并发生形态上的变化,表现为胞体增大、胞质增多、嗜碱性增强、细胞核母细胞化,称为异型淋巴细胞或反应性淋巴细胞血型 :是人体血液的一种遗传性状,指红细胞抗原的差异;广义的血型是血液各种成分抗原的遗传性状血型系统 :指由单个基因座或多个紧密连锁的基因座上的等位基因所产生的一组抗原;根据血液各种抗原成分不同,可分为红细胞血型系统、白细胞抗原系统、血小板血型系统血型物质 :以可溶性抗原的形式存在于某些分泌型基因个体的体液或分泌液中
7、的ABH抗原称为血型物质;人体中普遍存在,以唾液中含量最丰富ABO血型系统亚型 :指虽属同一血型抗原,但抗原结构、性能或抗原表位数有一定差异的血型ABO血型鉴定 :主要是利用抗原抗体之间的反应来完成,包括正定型与反定型;前者是用已知的特异性抗体(标准血清)检查红细胞的未知抗原,后者是利用已知血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体; ABO血型鉴定常用方法有盐水介质法和微柱凝胶血型卡法等交叉配血 :是在血型鉴定的基础上,进一步检查受血者和供血者血液中是否含有不相配的抗原和抗体成分的试验,试验包括主侧和次侧配血;把受血者血清与供血者红细胞的反应管称为“主侧”;把受血者红细胞和供血者血清的反应管称为“
8、次侧”,两者合称交叉配血;两管既没有凝集也没有溶血,方可输血第三章电阻抗法(库尔特原理) :悬浮在电解质溶液中的血细胞相对于电解质溶液是非导电的颗粒,当体积不同的血细胞(或类似颗粒)通过计数小孔时,可引起小孔内外电流或电压的变化,形成与血细胞数量相当、体积大小相应的脉冲电压,从而间接区分出血细胞群,并分别进行计数红细胞体积平均分布宽度( RDW):是红细胞体积异质性的参数,是反映红细胞大小不均的客观指标;其增大提示存在红细胞大小不均的混合细胞群第四、五章尿三杯检查 :患者一次连续排尿,分别采集前段、中段、末段的尿液,分装于3 个尿杯中,第1、 3 杯 10ml,第 2 杯盛其余大部分尿液,多用
9、于泌尿系统出血部位的定位和尿道炎的诊断尿量 :指 24h 内排出体外的尿液总量,尿量的多少主要取决于肾脏生成尿液的能力和肾脏稀释与浓缩功能肉眼血尿 :指 1L 尿液内含有1ml 以上血液,且尿液外观呈红色或洗肉水样镜下血尿 :指尿液外观未见红色,离心尿液镜下红细胞>3 个 /HP乳糜尿 :指由于泌尿系统淋巴管破裂或深部淋巴管阻塞致使乳糜液或淋巴液进入尿液,尿液呈乳白色浑浊肉眼脓尿 :尿液中含大量白细胞,呈乳白色,甚至出现块状镜下脓尿 :尿液白细胞大于5 个/HP脓细胞 : 脓细胞是在炎症过程中被破坏、变性或坏死的中性粒细胞,其外形多变,不规则,胞质内充满颗粒,胞核模糊不清,常聚集成团,边
10、界不清闪光细胞 :低渗尿液中,中性粒细胞胞质内颗粒呈布朗运动,在油镜下可见灰蓝色发光现象(由于光的折射),运动似星状闪光尿比重 :指尿液在 4时与同体积纯水重量之比,是尿液中所含溶质浓度的指标,可粗略反映肾脏的浓缩稀释功能蛋白尿 :指尿液中的蛋白质超过 150mg/24h(或超过 100mg/L)时,蛋白定性试验呈阳性糖尿 :当血糖浓度超过 8.88mmol/L ( 1.6g/L )时,尿液中开始出现葡萄糖,尿糖定性试验呈阳性的尿液学习必备欢迎下载酮体 :乙酰乙酸(占20%)、 - 羟基丁酸(占 78%)和丙酮(占2%)的总称,酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间产物,血浆酮体浓度一旦超过肾阈值,
11、就会产生酮尿血红蛋白血症 :健康人血浆中大约有50mg/L 游离血红蛋白( Hb),但尿液中无游离 Hb,当发生血管内溶血时,大量Hb 释放入血液形成血红蛋白血症血红蛋白尿 :血管内溶血时,血浆游离血红蛋白增多,若Hb 量超过结合珠蛋白结合能力时,血浆游离 Hb 可经肾小球滤出,当超过1.00 1.35g/L时, Hb 可随尿液排出,即血红蛋白尿1 小时尿液有形成分排泄率:即 1 小时尿液有形成分计数,是计数3 小时内尿液细胞、管型的数量,再换算为1 小时的排出量影形红细胞 :红细胞胀大,血红蛋白溢出,仅留下细胞膜,成为大小不等的空环形或面包圈样,称为影形红细胞管型 :是蛋白质、细胞及其崩解产
12、物在肾小管、集合管内凝固而成的圆柱形蛋白凝聚体尿液干化学法检测原理 :尿液的化学成分使多联试带上的试剂膜块发生颜色变化,颜色深浅与尿液中化学成分的浓度成正比。当试带进入尿液干化学分析仪比色槽时,各试剂模块依次受到仪器光源照射并产生不同的反射光,仪器接受不同强度的光信号后,将其转换为相应的电信号,经微电脑处理,计算出各检测参数的反射率,与标准曲线比较校正,最后以定性或半定量方式自动输出结果。公式: R( %) =(Tm*Cs ) /( Ts*Cm )粪便隐血试验 :上消化道出血量小于 5ml ,粪便中无可见的血液,且红细胞被破坏,显微镜检查也未见到红细胞。需用化学法、免疫法等才能证实的出血,称为
13、隐血,检查粪便隐血的试验称为粪便隐血试验( FOBT)第八章修复 :当局部细胞损伤或死亡后,由临近正常组织的生发层细胞分裂、增生,使损伤的组织细胞更新或再生再生 :组织和细胞损伤后,由周围健康的细胞进行增生,以实现修复的过程;分为生理性再生和病理性再生化生 :是一种分化成熟的上皮在理化因素或慢性炎症作用下转化成另一种分化成熟上皮的过程核异质 :即反应性核变化,指上皮细胞的核异常,主要表现为核大小、形态和染色质分布异常,颗粒增粗,核边界不整齐,核膜增厚、不规则,偶见大核仁等,但胞质分化正常;多发生于炎症过程,可见于癌组织周围大圆点细胞 :表层鳞状上皮细胞的细胞质内含深褐色小颗粒,常位于核周,偶见
14、大的、圆形的、淡褐色包涵体,称为大圆点细胞船形细胞 :有的中层鳞状上皮细胞与表层细胞大小类似或更小,呈船形,说明糖原沉积在细胞质,巴士染色呈黄色,细胞核被挤至细胞边缘,常见于妊娠和绝经早期黏膜白斑 :常发生于子宫颈,多为黏膜表层异常角化,为癌前病变,偶见于角化型浸润性癌,巴氏染色后,脱落的表层角化鳞状上皮细胞呈淡黄色、无核,细胞质偶见棕色颗粒学习必备欢迎下载第一章血液标本采集和血涂片制备1. 血液标本类型:( 1)全血 :血细胞和血浆组成,用于血细胞计数、分类和形态学检查静脉全血:应用最广泛,常用肘前静脉、腕静脉,婴幼儿和新生儿采用颈静脉、股静脉动脉全血:用于血气分析,常用股动脉、桡动脉、肱动
15、脉末梢全血:用于微量血液检验,常用耳垂、中指或无名指尖内侧,小儿常用拇指、足端( 2)血浆 :全血除去血细胞的部分,用于血浆化学成分的测定和血栓与止血的检查( 3)血清 :血液离体凝固后分离出来的液体部分,用于临床化学和临床免疫学检查;与血浆比较,缺少纤维蛋白原( 4)血细胞 :如浓集的粒细胞、淋巴细胞、分离的单个核细胞,用于特殊的检验项目2. 血液标本采集方法:( 1)皮肤采血法 :用于微量检验,血液标本是微动脉血、微静脉血和毛细血管血的混合;分为毛细血管采血法(具体方法)和激光采血法A. 部位 :耳垂或手指末梢,主要是中指或无名指尖内侧,半岁以下拇指或足部,特殊人员视情况而定B. 所用器材
16、 :采血针、吸管C. 简要步骤 : 1)按摩采血部位; 2)消毒采血部位; 3)穿刺采血:针刺深度 2-3mm、拭去第一滴血因其混入组织液; 4)采血后处理:用无菌干棉签止血;( 2)静脉采血法 :临床广泛应用,常用于血沉、免疫、生化等检测项目,分为普通采血法(具体方法)和负压采血法(最符合检测前质量控制要求和实验室生物安全规范,广泛使用)A. 部位 :主要是肘静脉;其他:手背部手腕部等部位采血,幼儿可采用颈外静脉采血B. 所用器材 :一次性注射器,检验用真空定量采血装置C. 简要步骤 : 1)器材准备:准备试管、注射器及消毒双手; 2)选择静脉; 3)采血方法:检查注射器、扎压脉带、选择进针
17、部位、消毒皮肤、穿刺皮肤、抽血、止血、放血负压采血法 :即真空采血法,具有计量准确、传送方便、封闭无尘、标识醒目、刻度清晰、容易保存、一次进针多管采血等优点紫色采血管 :临床用途:血液血常规试验;标本类型:全血(1ml 2ml);所制备添加剂:抗凝剂 K2EDTA或制备标本步骤:采血后立即颠倒混匀K3EDTA;8 次;(3)动脉采血法3. 常用血液标本抗凝剂及用途:概念 :抗凝 :采用物理或化学方法除去或抑制某种凝血因子的活性,以阻止血液凝固;阻止血液凝固的物质称为 抗凝剂或抗凝物质抗凝剂 :( 1)乙二胺四乙酸( EDTA)盐A. 抗凝原理:与钙离子生成可溶性的鳌合物B. 使用方法: EDT
18、A-K2和血液C. 优点:对红细胞和白细胞形态影响小;缺点:影响血小板的聚集D. 适用范围:全血细胞分析和血细胞比容测定,但不适用于出凝血实验和血小板功能( 2)草酸盐A. 抗凝原理:与血液中钙离子形成草酸钙沉淀B. 使用方法:草酸钠和血液C. 优点:溶解性好,价廉;缺点:对凝血因子保护功能差,影响凝血因子;形成草酸钙沉淀物,影响自动凝血仪器的使用D. 适用范围:用于凝血象检查,现已逐步被淘汰( 3)肝素A. 抗凝原理:加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶,阻止凝血酶形成B. 使用方法:肝素钠与血液学习必备欢迎下载C. 优点:抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温;缺点:引起白细胞聚集,使白
19、细胞计数降低,不利于制备血涂片,价格昂贵D. 适用范围:绝大多数检查可用,红细胞渗透脆性实验的理想抗凝剂;肝素抗凝血不适全血液学一般检查( 4)枸橼酸钠A. 抗凝原理:与钙离子生成可溶性的鳌合物B. 使用方法:配成 109mmol/L 的浓度和血液C. 优点:对凝血因子有很好的保护作用;缺点:血液中溶解度低,抗凝作用较弱D. 适用范围:止血学检验、血沉、输血保养液(毒性小)4. 血液标本采集处理:血液标本 :需分离后保存,全血保存易溶血;保存不能及时检验,4;保存一个月,-20 ;保存 3 个月以上, -70 (1)保存 :血液学检验标本,室温2d;分离以后的血浆20-30 室温中储存<
20、4h; 4冰箱可储存 1d, -80 冰箱可储存30d;生化检验和免疫学检验的标本4冰箱可储存1 周( 2)处理原则 :血液标本在不抗凝情况 30-60min 凝固后析出血清;血凝测定,应充分抗凝后尽早离心分离血浆,在 2h 内完成测定或 4冰箱中保存;血液形态学检验的抗凝标本应放置在室温中,不宜冷冻, 1-4h 内无影响,但应及时制作血涂片(3)血液标本采集及检测结果的影响补5. 血涂片的制备和细胞染色:(1)血涂片制备 :1)载玻片要求:清洁、中性、无油腻;新载玻片用铬酸清洗液或10%盐酸浸泡24h;已用过的可用适量肥皂水或合成洗涤剂的水中煮沸20min2)血涂片制备种类:手工推:薄血膜法
21、(具体方法)、厚血膜涂片法(检查疟原虫、微丝蚴)仪器自动涂片法薄血膜法 :左手持载玻片,右手持推片从血清前方后移接触血清,使血清沿推片周围展开,然后是推片与载玻片成 30。 -45 。 匀速、平稳地向前移动制成血涂片。3)用途 :血细胞形态学检验、网织红细胞检查、异常细胞检验、寄生虫检验等4)质量评价 :一张合格的血涂片应该是厚薄适宜,血膜头、体、尾分明,分布均匀,两侧留有一定的空隙,边缘整齐注意 :血滴大、粘稠度高,速度快、角度大血膜厚;反之,则血膜厚( 2)血涂片染色 :1)概念 :碱性染料 :为阳离子染料,如亚甲蓝、天青、苏木素等;能接受质子,是染细胞核的染料酸性染料 :为阴离子染料,能
22、释放质子,主要有伊红 Y 和伊红 B 两类,能结合细胞的碱性成分并染色,如血红蛋白、 嗜酸性颗粒成分等瑞氏染料 :是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料,溶于甲醇后解离为带正电的亚甲蓝和带负电的伊红离子瑞氏染色 :利用不同种类的细胞或同一细胞的不同成分对瑞氏染色液中酸性及碱性染料的结合能力不同的特点,用瑞氏染色液将不同种类的细胞或同一细胞的不同成分染成不同的颜色,以便进行显微镜检查的染色方法称为瑞氏染色2)瑞氏染色法:A.Wright染色血细胞着色原理:( 1)碱性物质 :与伊红结合染成红色,如血红蛋白及嗜酸性颗粒等;( 2)酸性物质 :与亚甲蓝结合染成蓝紫色,如淋巴细胞胞质及嗜碱性颗
23、粒;( 3)中性颗粒 :呈等电状态,与伊红、亚甲蓝均结合,染成淡紫红色,为中性物质;( 4)细胞核 :由 DNA和碱性强的组蛋白组成;少量 DNA为酸性物质,与亚甲蓝作用染成蓝色,组蛋白为碱性物质,与伊红作用染成红色,由于蓝色极弱,细胞核被染成紫红色。学习必备欢迎下载( 5)红细胞 :原始 RBC和早幼 RBC胞质含有较多的酸性物质,与亚甲蓝作用,染成较厚蓝色晚幼红细胞和Ret 含有酸性物质和碱性物质,既能与亚甲蓝作用又能与伊红作用,染成红蓝色或灰红色成熟红细胞无核,因此酸性物质完全消失,与伊红结合,染成橙红色PH影响 : pH pI (等电点),则蛋白质带正电,结合酸性染料;反之则结合碱性染
24、料染色时常用缓冲液(pH6.4 6.8 )来调节染色时的pH 值,以达到满意的染色效果使用清洁、中性的玻片,且使用优质的甲醇配制溶液B. 试剂 : Wright染液(伊红、亚甲蓝+甲醇);磷酸盐缓冲液(PBS: pH6.4 6.8 )甲醇作用 :溶解伊红和亚甲蓝;具有很强的脱水作用,可以固定红细胞形态,提高对染料的吸附作用,增强染色效果C.染色方法 :用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上;加瑞氏染液覆盖血膜,固定1min;滴加等量或稍多的缓冲液,混匀,染色5-10 分钟;用清水冲洗,待干后镜检D.结果判断 :血膜外观为淡紫红色;低倍镜下细胞分布均匀;红细胞呈粉红色、无染料沉渣,血细胞无人为形态
25、如空泡;白细胞显示各类细胞特有色彩,核染成紫红色。染色质与副染色质清晰,粗细松紧可辨E. 方法评价 : Wright染色法:最常用的方法,对胞质成分及中性颗粒等染色较好Giemsa染色法:加强了天青的作用,对胞核和寄生虫着色较好,结构更清晰Wright-Giemsa染色法:广泛使用的方法,结合了前两者的优点,对胞质、胞核和胞质内颗粒着色均较好第二章血液一般检验血液=血细胞+血浆血细胞组成=红细胞 +白细胞 +血小板血浆 =水分 +固体成分(蛋白、无机盐、激素、维生素、代谢产物)血液占体重的7%-9%,一般: 60-80ml/kg体重,其血量约5LPH 7.35-7.45,比密 1.050-1.
26、060,相对粘度4 5,血浆渗透压为290310 mOsm/kgH2O正常红细胞寿命为120d,白细胞寿命为9-13d ,血小板寿命为8-9d红细胞生长周期:造血干细胞红系祖细胞72h(原幼早幼红中幼红晚幼红)1-2d(网织红细胞红细胞)120d 衰亡技术误差 :由于操作不规范和技术不熟练所造成的误差称为技术误差,如采血部位不当等仪器误差 :由于仪器不精确所造成的误差,如不符合规格的血细胞计数板、微量吸管等计数域误差 :由于血细胞每次在计数室内的分布不完全相同所造成的误差,也称分布误差,如使用同一稀释血液多次充液(充计数室)计数,其结果也存在一定的差异第一节红细胞检查一红细胞计数(RBC)1.
27、 概念 :红细胞计数 :指测定单位体积血液中红细胞的数量2. 原理 (显微镜计数法):用等渗稀释将血液稀释一定倍数( 200 倍)后,滴入血细胞计数盘,于显微镜下,计数一定范围内的红细胞数,经过换算即可求得每升体积血液中红细胞数( 1)红细胞稀释液 : Hayem液、枸橼酸钠液甲醛盐水溶液、生理盐水、1%甲醛生理盐水要求:等渗、防粘连、防腐Hayem 稀释液 :优点 a. 氯化钠:调节渗透浓度; b. 硫酸钠:调节渗透浓度,防止红细胞聚集; c. 氯化高汞:防腐剂,有毒缺点:如遇高球蛋白血症或自身凝集素增高患者,红细胞易凝集或形成串钱状,影响计数(2)方法及计算:1)操作:高倍镜计数中间大方格
28、的四角和中央5 个中方格内的红细胞学习必备欢迎下载2)计算:红细胞数 /L= ( 5 个中方格内红细胞)12/100 × 10 /L3.参考区间 : 成年:男性 ( 4.0 5.5 )× 1012/L ,女性 ( 3.5 5.0)× 1012/L ;新生儿( 6.0 7.0 )× 1012/L报告方式: X.XX * 10 12/L医学决定水平:高于 6.8 × 1012/L ,应采取相应治疗措施;低于3.5× 1012/L 可诊断贫血;低于 1.5 ×1012 /L 应考虑输血4.临床意义 :(1)生理性变化:1)增多 :
29、见于机体缺氧如新生儿、高原居民、剧烈运动和体力劳动等;雄激素增高,如年龄和性别的差异;肾上腺皮质激素增多,如情绪波动(兴奋、恐惧等);长期重度吸烟;静脉压迫时间 >2 分钟;采血部位:毛细血管血比静脉血测定结果高;日内差异,如一天中上午 7 时红细胞数量最高;药物影响,如肾上腺素、糖皮质激素等2)减少 :主要见于生理性贫血:生长发育过快,导致造血原料相对不足,如 6 个月 2 岁的婴幼儿;造血功能减退,如老年人;血容量增加,如妊娠中、后期血浆量增多,红细胞被稀释而减低;长期饮酒(2)病理性变化:1)增多 : 相对性增多:血容量减少使红细胞相对增多,如呕吐、腹泻、大面积烧伤等;绝对性增多:
30、分为继发性和原发性增多,继发性增多见于心肺疾病、异常血红蛋白病、某些肿瘤等;原发性增多见于真性红细胞增多症2)减少: 主要见于病理性贫血,此外,药物也可引起贫血,如阿司匹林、雌激素、头孢类等1 )红细胞生成减少 :骨髓功能衰竭的再生障碍性贫血、急性造血功能停滞等;造血物质缺乏或利用障碍,如肾性贫血、缺铁性贫血(铁缺乏)、铁粒幼细胞贫血(铁利用障碍)、巨幼细胞贫血(叶酸、维生素B12 缺乏性 DNA合成障碍)等2 )红细胞破坏过多:因红细胞内在缺陷(膜、酶缺陷,血红蛋白异常)或外在异常(免疫反应引起的贫血、机械性损伤、疾病所致溶血)造成红细胞破坏过多导致的贫血,如遗传性球形红细胞增多症、地中海性
31、贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、异常血红蛋白病、免疫性溶血性贫血、脾功能亢进所致溶血性贫血等3 )红细胞丢失(失血):如急性、慢性失血性贫血二血红蛋白测定(Hb 或 HGB)1. 概念 :血红蛋白 :是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质,是红细胞内的运输蛋白贫血 :单位容积循环血液中红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考区间下限,称为贫血。临床上通常以血红蛋白为标准2.Hb 结构 : Hb 由珠蛋白和亚铁血红素(血红蛋白色素部分,1 亚铁原子 +4 原卟啉区)结合组成;Hb空间结构:每个血红蛋白有4 条珠蛋白肽链每条肽链包裹1 个亚铁血红素,形成具有四级空间结构
32、的四聚体每克 Hb 携氧 1.34mol3. 原理 :氰化高铁血红蛋白( HiCN)法( WHO和 ICSH 推荐 Hb 检测的参考方法):血液在血红蛋白转化液中溶血后,血红蛋白( SHb除外)中的亚铁离子( Fe2+)被高铁氰化钾氧化为高铁离子(Fe3+),血红蛋白转化成高铁血红蛋白(Hi )。 Hi 与氰化钾( KCN)中的氰离子反应生成HiCN。 HiCN 最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm。在特定条件下,HiCN毫摩尔消光系数为44L/ ( mmol?cm)。 HiCN 在 540nm处的吸光度与浓度成正比,根据测得吸光度可求得血红蛋白浓度( 1)测定方法:分四类:全血铁法(H
33、b 分子组成)、比重法(血液物理特性)、血气分析法( Hb 与 O2 可逆性结合)及比色法( Hb 衍生物光谱特点);( 2)方法评价 (比色法):1)氰化高铁血红蛋白法(HiCN):参考方法;该法操作简单、显色快、结果稳定可靠、试剂容易保存,能测定除SHb以外的所有血红蛋白,便于建立质控;缺点 是氰化钾(毒,可使高白细胞、高球蛋白血症标本浑浊,对HbCO反应慢,不能测定SHbKCN)有剧学习必备欢迎下载2)十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS-Hb):次选方法;操作简单,呈色稳定,准确性和精确性符合要求,无公害;缺点是 SDS本身质量差异较大、消光系数未定且SDS破坏白细胞,不适于同时用于有
34、计数白细胞和Hb 定量两种功能和血细胞分析仪使用3)碱羟血红蛋白( AHD)测定法 :该法试剂简单,不含有毒剂,呈色稳定,准确性及精密度575较高; 缺点 是由于吸收峰在575nm,但仪器多采用 540nm左右滤光板,限制了此法使用4)叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法 :该法优点与HiCN 测定法相似、最大吸收峰在542nm、准确性和精确性较高;缺点 是试剂毒性仅为 HiCN 测定法的 1/7 ,但仍存在公害问题5)溴代十六烷基三甲胺(CTAB)血红蛋白测定法 :该法试剂溶血性强又不破坏白细胞,适用于仪器上自动检测 Hb和白细胞; 缺点 是测定结果的准确度和精密度不佳4. 参考区间 :成年:
35、男性120 160 g/L ,女性 110 150 g/L ;新生儿: 170 200 g/L5. 临床意义 : Hb 的临床意义与红细胞计数相似,判断贫血程度优于红细胞计数;根据Hb 浓度可将贫血分为 4 度:轻度贫血:男性Hb120g/L (女性 Hb110g/L );中度贫血: Hb 90g/L ;重度贫血:Hb60g/L ;极重度贫血:Hb30g/L 。当 RBC 1.5 × 1012/L , Hb 45g/L 时,应考虑输血三红细胞形态检查1. 概念:豪焦小体 ( 染色质小体 ) :成熟红细胞或幼红细胞胞质内含有一个或多个直径为 12 m暗紫红色圆形小体,为核碎裂或溶解后的
36、剩余部分,常与卡波环同时存在;见于脾切除后、无脾症、脾萎缩、脾功能减低、红白血病、某些贫血(如巨幼红细胞性贫血)卡波环 :成熟红细胞内的胞质中出现的紫红色或绕成 8 字型结构,可能是由于核膜的残余物或纺锤体的残余物及胞质中脂蛋白变性所致,常与染色质小体同时存在;多见于巨幼细胞贫血,铅中毒,白血病嗜碱性点彩红细胞:是不完全成熟的红细胞,胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料(如亚甲蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以 Wright 染色,则在粉红色的胞质中出现蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞。多见于重金属中毒,常作为铅中毒诊断筛选指标。2. 正常形态红细胞 :正常形态红细胞常见于健康
37、人,但也可见于急性失血性贫血、部分再生障碍性贫血等正常红细胞呈双凹圆盘形,大小相对均一,平均直径7.2 m( 6.7 7.7 m); Wrihgt染色后为粉红色或琥珀色,血红蛋白充盈良好,呈正色素性、向心性淡染;中央部位为生理性淡染区,大小约为细胞直径的1/3 ;胞质内无异常结构3. 异常形态红细胞分类 :补全( 1)大小异常:小红细胞、大红细胞、巨红细胞、红细胞大小不均( 2)血红蛋白含量异常:低色素性、高色素性、嗜多色性、细胞着色不一( 3)形态异常:球形、椭圆形、靶形、口形、镰形、棘形、新月形、泪滴形、锯齿状、角形、裂片红细胞、红细胞形态不整(4)异常结构和排列异常:嗜碱性点彩红细胞、豪
38、焦小体、卡波环、有核红细胞、红细胞自凝、缗线状红细胞四血细胞比容测定(Hct 、HCT、 PCV)参考方法 :微量分层离心法1. 概念 :血细胞比容 :是指一定体积的全血中红细胞所占体积的相对比例2. 原理:温氏法 :血液离心后分 5 层,自上而下分别为 最上层为血浆;白色乳糜层主要是血小板;灰红色层为白细胞和有核红细胞;呈紫黑色一薄层为被血细胞代谢还原成的还原红细胞层;最下层为含氧红细胞层;读取以黑色红细胞层为准的红细胞柱高,除以100血液分析仪法 :测定红细胞平均体积和红细胞计数,公式 Hct = MCV * RBC 红细胞比容的多少主要与红细胞数量及其大小有关,与血浆量也有关系;主要用于
39、贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断3. 参考区间 :成年男性:0.40 0.50 ,女性: 0.37 0.48 ;新生儿: 0.47 0.67 ;学习必备欢迎下载儿童: 0.33 0.424. 临床意义 : HCT减低是诊断贫血的指标,若红细胞数量正常,血浆量增加,为假性贫血;HCT增加可因红细胞数量绝对增加或血浆量减少所致,反之亦此;HCT的主要应用价值为真性红细胞增多症诊断指标、临床补液量的参考、计算红细胞平均指数的基础五红细胞平均指数(MCV、MCH、 MCHC)1. 概念:红细胞平均容积(MCV):指红细胞群体中,单个红细胞体积的平均值,以飞升(fl )为单位红细胞平均血红蛋白含
40、量(MCH):指红细胞群体中,单个红细胞血红蛋白含量的平均值,以皮克( pg)为单位红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC):指全部红细胞血红蛋白浓度的平均值,单位为(g/L )2. 计算 : 手工法 :测定 RBC、 Hb、 Hct ,公式 MCV =HCT/RBC;MCH =Hb/RBC; MCHC =Hb/HCT;血液分析仪法 :血液分析仪 MCV,仪器 Hb、 RBC,公式 MCH =Hb/RBC; MCHC =Hb/( RBC*MCV)3. 参考区间 :成年人: MCV 80 100fl ; MCH 26 34pg; MCHC 320360g/L单位换算: 1 升 =103 毫升 =106
41、 微升 =109 纳升 =1012 皮升 =1015 飞升4. 临床意义 :红细胞平均指数可用于贫血形态学分类及提示贫血的可能原因;但红细胞平均指数仅反映了红细胞群体平均情况,无法阐明红细胞彼此之间的差异贫血形态学分类及临床意义形态学分类MCV( fl )MCH( Pg)MCHC临床意义正细胞性贫血正常正常正常急性失血、溶血,再障、白血病等大细胞性贫血增高增高正常维生素 B12、叶酸缺乏或吸收障碍单纯小细胞性贫血降低降低正常感染、中毒,慢性炎症,尿毒症等小细胞低色素性贫血降低降低降低缺铁性贫血,慢性病贫血,珠蛋白生成障碍性贫血六网织红细胞计数(Ret 或 RET) 参考方法 :染色新亚甲蓝,计
42、数Miller 窥盘法1. 概念:网织红细胞 :是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞(未成熟),略大于成熟红细胞(直径为8-9.5 m),其胞质中残存的嗜碱性物质RNA经碱性染料(如煌焦油蓝、新亚甲蓝等)活体染色后,形成蓝色或紫色的点粒状或丝网状沉淀物,故称为网织红细胞网织红细胞生成指数:RPI = (被测 Hct/ 正常人 Hct )* (被测 Ret%/Ret 成熟天数) *100网织红细胞成熟指数:RMI =(HFR + MFR)/ LFR× 100%,是反映幼稚网织红细胞变化较为敏感指标,常用于分析骨髓造血状态2. 分型 :四型, I 型:即丝球型,嗜碱性物质呈致密块状
43、;主要存在于骨髓中II型:即网型,嗜碱性物质呈疏松网状结构;主要存在于骨髓,极少见于外周血III型:即破网型,嗜碱性物质呈散在的不规则枝点状结构;少量存在于外周血IV型:即点粒型,嗜碱性物质少,呈分散的细颗粒、短丝状;主要存在于外周血中3. 原理:( 1)显微镜计数法 :活体染料的碱性着色基团( +)可与网织红细胞 RNA的磷酸基(- )结合,使 RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩,形成蓝色的点状、线状或网状结构;外周血液网织红细胞主要为型,凡含有 2 个或 2 个以上颗粒、且颗粒必须远离细胞边缘的红细胞均应计为网织红细胞染料 : 1)煌焦油兰:常用,染色效果好,但沉渣较多;2)新亚甲兰:WH
44、O推荐,染色效果好,但试剂昂贵;方法 : 1)试管法:染色时间长,效果好,易重复计数;手工法计数Ret 推荐方法2 )玻片法:染色时间短,水分易蒸发,结果偏低;计数 : Miller 窥盘法: ICSH 及我国卫生部推荐方法,优点是规范了计算区域,减少了实验误差,使结果准确性有所提高;缺点是受操作人员的认知水平、血涂片质量好坏、红细胞计数的方法和多少的影响( 2)血液分析仪法 :用荧光染料使含 RNA的网织红细胞着色,用流式细胞术计数并计算网织红细胞的百分率。血液分析仪法还可将网织红细胞分为高荧光强度 (HFR)、中荧光强度(MFR)、低荧光强度 (LFR) 三类,荧光强度越强,网织红细胞越幼
45、稚;该方法优点是可精确计数学习必备欢迎下载网织红细胞占成熟红细胞的百分数( Ret%),并可根据 RNA含量将网织红细胞分类及计算网织红细胞 ;缺点是仪器价格昂贵,如存在豪焦小体、有核红细胞、巨血小板,可见假阳性4. 参数 :( 1)网织红细胞百分率:评价红系有效性的最简单方法( 2)网织红细胞绝对值:更准确反映骨髓造血( 3)网织红细胞生成指数( RPI):代表网织红细胞的生成相当于正常人的多少倍释放入外周血Ret 越幼稚,成熟时间越长;正常网织红细胞成熟时间应为1 天(4)网织红细胞成熟指数(RMI):5. 参考区间 :成人、儿童:0. 5 1.5 ;新生儿:2.0 6.0 9成人绝对值:
46、(24 84)× 10 /L6. 临床意义 :网织红细胞计数是反映骨髓造血功能的重要指标:一般外周血网织红细胞增多提示骨髓造血旺盛,外周血网织红细胞减少提示骨髓造血衰竭(1)评价骨髓增生能力,判断贫血类型网织红细胞增加:表示骨髓红细胞生成旺盛,如溶血性贫血;(急性失血后5-10 天网织红细胞达高峰,2 周后恢复;网织红细胞持续升高提示慢性失血)网织红细胞减少:表示骨髓造血机能减弱,如再生障碍性贫血;(临床将贫血病人网织9鉴别贫血 :小细胞性贫血、正细胞性贫血、大细胞性贫血(2)评价疗效作为疗效观察指标:是贫血患者随访检查的项目之一;骨髓增生功能良好的病人,如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血
47、经有效治疗后,Ret 的升高先于红细胞之前,在用药3-5d 后 Ret升高, 7-10d 达高峰, 2 周后, Ret 下降, Hb 和 RBC才开始升高× 10 9/L ,无移植并发症;小于骨髓移植后监测骨髓造血恢复:移植后 21 天,大于 1515 × 10 9/L ,伴中性粒细胞和血小板增高,可能移植失败( 3)放疗和化疗的监测 :指导临床调整治疗方案,避免造成严重的骨髓抑制( 4)药物影响 :导致 Ret 假阳性药物: Ret>1.5% 铁剂、维生素 B12 和叶酸;导致 Ret 假阴性药物: Ret<1.5% 硫唑嘌呤、氯霉素、马卡西平七嗜碱性点彩红细
48、胞计数1. 概念 :嗜碱性点彩红细胞 :是不完全成熟的红细胞,胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料(如亚甲蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以 Wright 染色,则在粉红色的胞质中出现蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞2. 临床意义 :参考区间 0.03%;嗜碱性点彩红细胞计数增高主要见于铅、汞、银、铋等重金属及硝基苯、苯胺中毒,对慢性重金属中毒具有辅助诊断价值;常作为铅中毒诊断筛选指标八红细胞沉降率测定(ESR)参考方法 :魏氏法1. 概念 :红细胞沉降率 :简称血沉,是指在规定条件下,离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率2. 原理:魏氏法 :采用枸橼酸钠抗凝剂,血沉测定实际上
49、是测量单位时间内红细胞下沉后血浆段的高度,而并非真正红细胞沉降的速度;(1)血沉一般分为3 期:缗钱状红细胞形成期,10min;快速沉降期,40min;细胞堆积期,10min(2)影响血沉测定的因素:1)增快 : 血浆因素 :纤维蛋白原,其次为 、 球蛋白和胆固醇等;缗钱状红细胞形成期(最强)红细胞因素:大红细胞易形成缗钱状,血沉加快;各种原因贫血标本及物理条件:标本溶血;血沉管倾斜、温度过高感染因素 :某些病毒、细菌、药物、代谢产物和异常抗体等中和了细胞表面的负电荷2)减慢 : 血浆因素 :白蛋白、糖蛋白及磷脂酰胆碱等增高,抑制红细胞缗线状形成红细胞因素:数量增加、大小不均或球形、镰刀形红细
50、胞增多时,不利于缗钱状形成物理条件 :血沉管不洁净或血柱含气泡、温度过低药物因素 :阿司匹林、可的松、奎宁A学习必备欢迎下载3. 参考区间 :魏氏法:男性 0 15mm/h,女性 0 20mm/h4. 临床意义 : ESR增快: 25mm/h 轻度; 50mm/h 中度; 50mm/h 重度(1)血沉加快 :1)生理性加快 :血沉受年龄,月经周期影响:新生儿红细胞数量较高,血沉较慢;小于12 岁儿童,红细胞数量生理性低下,血沉稍快;女性纤维蛋白原含量高血沉比男性高;50 岁后,由于纤维蛋白原增多,血沉加快;月经期由于子宫内膜损伤及出血,纤维蛋白原增多,女性血沉加快;妊娠期妇女血沉加快2)病理性
51、加快 :组织损伤时急性时相反应蛋白迅速增多、恶性肿瘤、炎症疾病、自身免疫疾病、高球蛋白血症、高胆固醇血症,以及退行性疾病、巨细胞性动脉炎和风湿性多肌瘤( 2)血沉减慢 :见于真性红细胞增多症,低纤维蛋白原血症,充血性心力衰竭,红细胞形态异常(如球形、镰形)等第二节白细胞检查外周血白细胞 :起源于骨髓的造血干细胞( HSC),在骨髓多种造血生长因子的调控下,粒细胞分化、发育和成熟的过程可划分为干细胞池、分裂池、成熟池、贮存池、循环池、边缘池;白细胞计数结果仅反映了循环池的粒细胞数量变化白细胞( WBC):球形,直径7- 25m,分类有粒细胞( GRAN)、淋巴细胞(L)、单核细胞(M),粒细胞又
52、可分为中性粒细胞(N)、嗜酸性粒细胞(E)、嗜碱性粒细胞(B)一白细胞计数参考方法:显微镜法;筛检方法:血液分析仪法1. 概念 :白细胞计数 :指测定单位容积的外周血液中白细胞总数白细胞增多 :白细胞总数高于10× 109/L白细胞减少 :白细胞总数低于4× 109/L ;通常将减少的临界值定为(4 2.5 )× 109 /L白细胞异常 :白细胞总数低于2.5 × 109/L2. 原理 :显微镜计数法 :用稀乙酸 将血液稀释并破坏红细胞,混匀后,滴入计数盘中,在显微镜低倍镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算求得每升血液中白细胞总数白细胞计数观察部位及血细胞计数板计数原则:原则 :一侧计数池, 4 个大方格;数上不数下,数左不数右;规律移动,“城垛式”进行,避免重复、遗漏、主观选择观察部位 :由于血涂片分布不均匀,观察时应选择细胞分布不均匀、染色效果好的部位,一般在体尾交界处或头至尾 3/4处;体部:体积较小、密度较大的淋巴细胞,尾部和两侧:体积较大,密度较小的单核细胞和粒细胞,大细胞也在尾部(1)稀乙酸作用 :将血液标本稀释一定倍数;破坏红细胞;固定白细胞(2)计算 :白细胞 /L = X/469×10 ×20
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