微生物标本采集与处理ppt课件

1、微生物学检验微生物学检验标本采集与处置标本采集与处置血液培育血液培育v标本采集和运送标本采集和运送v1、血液采集时间：、血液采集时间：v 发热发热38或低温或低温36 寒战。寒战。v WBC增多。增多。v 皮肤粘膜出血。皮肤粘膜出血。v 血压降低。血压降低。v 昏迷。昏迷。v 特殊患者出现粒细胞减少特殊患者出现粒细胞减少,血小板减少等血小板减少等 。v应在以上一种或几种体征出现，而临床可疑应在以上一种或几种体征出现，而临床可疑菌血症时采集血培育，并且尽量在运用抗生菌血症时采集血培育，并且尽量在运用抗生素之前进展。为提高阳性率，在素之前进展。为提高阳性率，在24小时内采小时内采集集23份血培育。

2、份血培育。v2、采血部位及抽血量：、采血部位及抽血量：v 普通抽取肘静脉血，成人采血量是普通抽取肘静脉血，成人采血量是510ml，儿童为，儿童为35ml尽量多抽提高尽量多抽提高阳性率，原那么为血液与肉汤之比为阳性率，原那么为血液与肉汤之比为1:51:10。v3、采集血标本和接种时要严厉无菌操作，、采集血标本和接种时要严厉无菌操作，防止杂菌污染。假设双相培育基那么从防止杂菌污染。假设双相培育基那么从冰箱取出，应将其平衡到室温，方才采冰箱取出，应将其平衡到室温，方才采集血标本接种。集血标本接种。v4、无菌操作采血后应立刻送检,如不能立刻送检,需室温保管或置35 37 培育箱中,切勿冷藏！实验室处置

3、实验室处置v标本验收、登记：标本验收、登记：v1、如发现血培育瓶标识与化验单恳求单不符，、如发现血培育瓶标识与化验单恳求单不符，如瓶破裂或明显污染。应立刻与临床医师联络，如瓶破裂或明显污染。应立刻与临床医师联络，报告拒收的详细理由报告拒收的详细理由.v2、如发现标本采集放置、如发现标本采集放置12小时以上小时以上, 用不适当用不适当类型的培育瓶搜集标本、用过期的培育瓶搜集标类型的培育瓶搜集标本、用过期的培育瓶搜集标本、采血量缺乏等。应立刻与临床医师联络，报本、采血量缺乏等。应立刻与临床医师联络，报告标本不合格的详细理由，建议补做血培育。告标本不合格的详细理由，建议补做血培育。v3、对延迟送检的

4、血培育瓶留意肉眼察看瓶内能、对延迟送检的血培育瓶留意肉眼察看瓶内能否有絮状物、混浊、溶血、凝块、薄膜等。如发否有絮状物、混浊、溶血、凝块、薄膜等。如发现应立刻直接涂片镜检和划线转种。现应立刻直接涂片镜检和划线转种。 v4、如验收合格，给标本和恳求单进展标识编号，、如验收合格，给标本和恳求单进展标识编号，并在血培育公用澄记本上澄记病人的姓名、性别、并在血培育公用澄记本上澄记病人的姓名、性别、年龄、科室、住院号、标本编号，然后置于年龄、科室、住院号、标本编号，然后置于3537培育箱中培育。培育箱中培育。下呼吸道感染标本培育下呼吸道感染标本培育v标本采集标本采集v1、自然咳痰法、自然咳痰法:以晨痰为

5、佳以晨痰为佳,采集前运用清水清洁采集前运用清水清洁口腔牙齿口腔牙齿,用力咳出呼吸道深部的痰用力咳出呼吸道深部的痰,直接吐入痰培直接吐入痰培育无菌杯中育无菌杯中,标本量应标本量应1ml.咳痰困难患者可雾化咳痰困难患者可雾化吸入取痰吸入取痰,采集完标本后应尽快送检采集完标本后应尽快送检,不能及时送检不能及时送检的标本的标本,室温保管室温保管2h.v2、支气管镜采集法、支气管镜采集法:由临床医师按相应操作规程由临床医师按相应操作规程采集采集,应留意咽喉部正常菌群污染应留意咽喉部正常菌群污染.v3、小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸、小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激

6、咳嗽时，可喷出肺部或入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。痰标本验收痰标本验收v1、呼吸道定植有大量的正常菌群,咽试子、痰厌氧培育无临床意义。v2、 肉眼察看痰标本呈水样或唾液样，或者标本涂片细胞学检查，WBC25/低倍镜，提示该标本已污染正常菌群，建议重送标本。 v3、标本容器溢漏、无盖或送检时间超越2h拒收。 v4、同时同部位或同一天两份一样检测的标本，应及时与恳求医师协商处置。 v5、遇有不合格标本,应及时与临床联络,报告不合格标本拒收的详细理由 。

7、痰标本培育痰标本培育显微镜检查：涂片革兰氏染色镜检或直接涂片低显微镜检查：涂片革兰氏染色镜检或直接涂片低倍镜镜检并记录。倍镜镜检并记录。1.如如WBC25/低倍镜和鳞状上皮细胞低倍镜和鳞状上皮细胞25/低倍镜和鳞状上皮细胞低倍镜和鳞状上皮细胞1025/低倍镜低倍镜,提示该标本尚合格可用于细菌培育提示该标本尚合格可用于细菌培育;3.WBC25/低倍镜低倍镜,提提示该标本不合格示该标本不合格,重送标本重送标本. 细菌涂片染色检查细菌涂片染色检查:挑取标本脓性或带血部份涂片挑取标本脓性或带血部份涂片革兰氏染色镜检革兰氏染色镜检,报告所见细菌的量和吞噬细胞报告所见细菌的量和吞噬细胞内能否有细菌等内能否

8、有细菌等.痰标本培育痰标本培育v分别培育分别培育v 挑取脓痰分别接种于羊血琼脂平挑取脓痰分别接种于羊血琼脂平板、麦康凯平板、巧克力琼脂平板板、麦康凯平板、巧克力琼脂平板上上, ,置于置于3535培育箱培育培育箱培育24-4824-48小时。小时。巧克力平板放入巧克力平板放入5%10%CO25%10%CO2环境中培环境中培育育24-4824-48小时。小时。初级报告初级报告v即标本涂片染色细胞学和细菌学显微镜镜检即标本涂片染色细胞学和细菌学显微镜镜检的描画报告，如发现有诊断价值时及时口头的描画报告，如发现有诊断价值时及时口头报告，但应按要求详细记录。报告，但应按要求详细记录。v1.1.细胞学镜检

9、的描画报告：包括细胞学镜检的描画报告：包括WBCWBC数数/ /低倍低倍镜和细胞内能否含有细菌且胞内细菌的染色镜和细胞内能否含有细菌且胞内细菌的染色形状特性。形状特性。v2.2.细菌学镜检的描画报告：如见到陈列成葡细菌学镜检的描画报告：如见到陈列成葡萄状的革兰氏阳性球菌，可报告萄状的革兰氏阳性球菌，可报告“找到革兰找到革兰氏阳性球菌，形似葡萄球菌；如找到不识氏阳性球菌，形似葡萄球菌；如找到不识别的细菌时那么报告别的细菌时那么报告“找到革兰性形细找到革兰性形细菌。菌。尿液细菌培育尿液细菌培育v 尿培育检查的临床指征尿培育检查的临床指征: :v1 1 有典型的尿路感染病症有典型的尿路感染病症; ;

10、v2 2 肉眼脓尿或血尿肉眼脓尿或血尿 v3 3 尿常规白细胞和尿常规白细胞和/ /或亚硝酸盐阳性或亚硝酸盐阳性v4 4 不明缘由的发热不明缘由的发热, ,无其他部分病症无其他部分病症v5 5 泌尿系统疾病手术前和膀胱排空功能泌尿系统疾病手术前和膀胱排空功能 受损等受损等. .v6 6 留置导尿管的病人出现发热。留置导尿管的病人出现发热。尿标本的采集尿标本的采集v1.清洁中段尿: 晚睡前少饮水,女性病人用手分开大阴唇,男性病人翻上包皮,用肥皂将阴部清洗干净后,用清水冲洗尿道口周围。将前段尿排去，将中段尿约10ml直接排入公用的无菌管中。v2.耻骨上膀胱穿刺法：严厉按无菌操作，用注射器直接从耻骨

11、上皮穿入膀胱，汲取尿液置于公用的无菌管中。v3.直接导尿法：按常规方法部分消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿。v4.留置导尿：先消毒导尿管外部，按无菌操作用注射器经过导尿管汲取尿液置于公用的无菌管中。v6.其他方法：搜集特定部位的尿标本可以经过侵入的方式如膀胱镜或手术中进展采集。尿标本的运送尿标本的运送v标本采集后应及时送检，2h内进展接种,否那么应置48冰箱保管，冷藏保管标本时间不得超越8h。制止尿中参与防腐剂和消毒剂。v尽量在未运用抗生素前采集标本培育。尿标本验收尿标本验收v检查恳求单所提供的信息姓名、床号和标本标鉴上的信息能否一样，所用的容器10ml无菌管能否合格等 。v对不

12、合格的标本应注明缘由，拒收，并做记录。尿分别培育尿分别培育v普通培育：将标本悄然旋转混匀，用定量接种环或无菌微量加样器取尿液0.001ml 接种于血平板和麦康凯平板，3537培育1824h。v特殊培育：对疑心有苛氧菌感染者应采用耻骨上膀胱穿刺法或导尿法采集标本，接种时加一块巧克力平板，并置5%CO2环境中培育24-48小时。v经1824h培育无菌生长者，应将一切培育基继续培育24小时。v建议：为提高检出率，要求10ml尿液置于无菌管内离心3000r/h，510分钟。取尿沉渣接种脓汁与创伤感染分泌物培育脓汁与创伤感染分泌物培育v标本采集标本采集v开放性感染分必物或脓液先用无菌生理盐水冲开放性感染

13、分必物或脓液先用无菌生理盐水冲洗外表，用洗外表，用2支无菌棉拭子取创伤或溃疡深处支无菌棉拭子取创伤或溃疡深处的脓液及分泌物送检，一支涂片检查用，一支的脓液及分泌物送检，一支涂片检查用，一支为培育用，将棉拭子放入无菌管内或增菌培育为培育用，将棉拭子放入无菌管内或增菌培育基内送检。基内送检。v闭性脓肿常部分消毒后，用注射器抽取脓液置闭性脓肿常部分消毒后，用注射器抽取脓液置于无菌试管内送检。假设疑心厌氧菌感染时，于无菌试管内送检。假设疑心厌氧菌感染时，当即作床边接种或置于厌氧运送培育基内送检。当即作床边接种或置于厌氧运送培育基内送检。v细菌对枯燥敏感或只能采集少量标本时，用棉拭子采集标本后立刻放入增

14、菌培育基内。对于不能立刻送检的标本，应放4保管，培育淋病奈瑟菌和及脑膜炎奈瑟菌的标本除外。v对放线菌标本，常用无菌棉拭子挤压瘘管，选取流出脓液中的“硫磺样颗粒置于无菌试管内送检。也可无菌纱布条塞入瘘管，次日拨出送检。v胸腔、腹腔、心包腔和滑膜腔等标本采集，应严厉按无菌操作程序，由临床医生进展采集及时送检。分泌物分别培育分泌物分别培育v需氧菌的分别培育：v 化脓性感染的标本用划线分别法将标本接种于血平板、巧克力平板上，经3537 2448h培育，巧克力平板放入5%10%CO2环境中培育24-48小时。分泌物涂片检查及初级报告分泌物涂片检查及初级报告v涂片、显微镜下察看细菌的形状、大小、陈列及染色

15、特点，可初步报告“找到革兰氏性菌，呈状陈列。v如镜检未见细菌时，可初步报告“直接涂片未找到细菌v对疑心有结核分枝杆菌感染的标本，采用抗酸性染色镜检，并报告镜检测结果。 穿刺液标本培育穿刺液标本培育v标本采集和运送：标本采集和运送：v1由临床医师无菌操作经皮肤抽吸或手术中采由临床医师无菌操作经皮肤抽吸或手术中采集标本。为防止穿刺液的凝固，应在无菌容器内集标本。为防止穿刺液的凝固，应在无菌容器内预先参与灭菌肝素预先参与灭菌肝素0.5mg肝素，可抗凝肝素，可抗凝5ml标标本再注入各种穿刺液。本再注入各种穿刺液。v2标本采集量为细菌标本采集量为细菌1ml,真菌真菌10ml,分枝杆分枝杆菌菌10ml。标

16、本采集完后应立刻送检，最迟不超。标本采集完后应立刻送检，最迟不超越越2小时。小时。实验室检查实验室检查v显微镜检查：标本如为浆液，可先经显微镜检查：标本如为浆液，可先经3000r/min离心，取沉淀涂片。如为脓液，可直接涂片。固离心，取沉淀涂片。如为脓液，可直接涂片。固定后，革兰染色和抗酸染色镜检。根据细菌形状、定后，革兰染色和抗酸染色镜检。根据细菌形状、染色特征即可初步报告。染色特征即可初步报告。v分别培育：分别培育：v无菌操作取离心后的沉淀物接种于血平板、巧克无菌操作取离心后的沉淀物接种于血平板、巧克力平板和麦康凯平板，力平板和麦康凯平板，v为提高检出细菌阳性率，并接种肉汤增菌培育。为提高

17、检出细菌阳性率，并接种肉汤增菌培育。置于置于35培育箱中培育培育箱中培育1824小时，其中巧克小时，其中巧克力平板置于力平板置于CO2环境中。环境中。女性生殖道感染标本培育女性生殖道感染标本培育v标本采集：标本采集：v由临床医生规范采集，立刻送检，最迟由临床医生规范采集，立刻送检，最迟应在应在2小时内。小时内。v分别培育：分别培育：v无菌操作将标本接种于血平板、巧克力无菌操作将标本接种于血平板、巧克力平板和麦康凯平板，置于平板和麦康凯平板，置于35 培育培育244 8 h ， 其 中 巧 克 力 平 板 置 于， 其 中 巧 克 力 平 板 置 于5%10%CO2环境中。环境中。精液、前列腺液

18、培育精液、前列腺液培育v标本采集：标本采集：v 前列腺液由临床医生进展无菌采集，精液前列腺液由临床医生进展无菌采集，精液搜集于无菌瓶中。搜集于无菌瓶中。1小时内及时送检。小时内及时送检。v分别培育：分别培育：v 无菌操作将标本接种于血平板、巧克力平无菌操作将标本接种于血平板、巧克力平板和麦康凯平板，置于板和麦康凯平板，置于35 培育培育2448h，其中巧克力平板置于其中巧克力平板置于5%10%CO2环境中。环境中。粪便细菌培育粪便细菌培育v标本采集：标本采集：v1、标本采集尽能够在发病早期和运用抗、标本采集尽能够在发病早期和运用抗生素之前。生素之前。v2、自然排便采集粪便标本时，取有脓血、自然排便采集粪便标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便粘液、组织碎片部分的粪便23g。液体粪。液体粪便那么取絮状物，普通取便那么取絮状物，普通取23ml，直接装，直接装入无菌管或运送培育基入无菌管或运送