传染病类胶体金试纸ppt课件

1、1；.人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒梅毒螺旋体抗体检测试剂盒丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒乙肝表面抗原检测试剂盒乙肝表面抗体检测试剂盒乙肝两对半检测试剂盒2；.一、人类免疫缺陷病毒抗体检测3；.获得性免疫缺陷综合征（AIDS，艾滋病），分为两型：HIV-1型和HIV-2型，是人体感染了“人类免疫缺陷病毒”（HIV - human immunodeficiency virus）（又称艾滋病病毒）所导致的传染病。 HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的T4淋巴组织作为攻击目标，大量破坏T4淋巴组织，破坏人的免疫平衡，使人体成为各种疾病的载体。 HIV本身并不会引发任何疾病，而

2、是当免疫系统被HIV破坏后，人体由于抵抗能力过低，并感染其它的疾病导致各种复合感染而死亡。人不会死于艾滋病，而是会死于与艾滋病相关的疾病。4；.a.血清学实验b.HIV核酸检测c.基因芯片技术的应用 早期的诊断，主要通过血清学试验检测抗HIV抗体，间接地诊断HIV感染，至今为止血清学试验依然是HIV诊断的主要依据。 近年来，分子生物学技术的发展，HIV检测也在变化，PCR、实时荧光定量PCR和基因芯片的运用5；.血清学试验分为初筛和确认试验，最常用的初筛试验和确认试验分别是酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹试验（Western Blot） 初筛的试剂经过了第一代、第二代、第三代后已经发展

3、到第四代检测试剂第一代：1985年，主要以病毒裂解物和部分的纯化的病毒抗原包被反应板，检测血清中的抗体，由于包被抗原不很纯，假阳性率较高。第二代：1990年，使用基因工程方法得到重组抗原和合成肽包被反应板，由于纯化抗原的使用，特异性有了很大的提高。第三代：使用双抗原夹心法检测抗体，进一步提高灵敏度。第四代：在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测，同时检测HIV抗体和P24抗原进一步缩短“窗口期”。6；.一、朝着简便快速方向发展二、朝着提高敏感性、特异性，缩短窗口期方向发展一、第三代试剂的研制 使用HIV-I型重组gp41抗原和HIV-II型gp36抗原包被NC膜，HIVI+II型重组抗原

4、标记胶体金，快速的检测血清中HIV-I和II型抗体二、P24 抗原的检测同时检测P24 抗原和HIV-I+II联合检测，可以提高试剂的敏感性减少急性感染者的窗口期诊断。7；.二、梅毒螺旋体抗体检测8；.梅毒螺旋体（TreponemaPallidun）是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体。梅素螺旋体对温度、干燥均特别敏感，离体干燥1-2小时死亡，41中1小时死亡，对化学消毒剂敏感，1-2%石炭酸中数分钟死亡，对青霉素、四环素、砷剂等敏感。人是梅梅毒的唯一传染源，由于感染方式不同可分先天性梅毒和后天性梅毒。 先天性梅毒：也称胎传梅毒。螺旋体通过患病孕妇经胎盘进入胎儿血循环，引起胎儿

5、的全身性感染。梅毒螺旋体在胎儿的肝、脾、肾上腺等器官大量繁殖导致流产、早产、死胎或出生活的梅毒儿。早期病变有梅毒性鼻炎，梅毒性天疱疮和斑丘疹：晚期呈现锯状形牙、先天性耳聋和间质性角膜炎等。 获得性梅毒：又称后天梅毒。主要经性接触传染，少数也可通过接吻、哺乳和接触有传染性损害的病人带菌的日常用品而传染。此外，输带菌的新鲜血也可传染。获得性悔毒反复稳伏与再发为其特点，整个病程分为3期。一、二期梅毒又统称为早期梅毒，此期传染性强而破坏性小。三期梅毒又称为晚期梅毒，该期传染性小，病程长、而破坏性大。 9；.1、病原体的检测 直接观察分泌物中的梅毒螺旋体，如见到运动的苍白螺旋体可直接诊断梅毒，是最特异、

6、最准确的诊断方法，但是灵敏度低。2、梅毒血清学试验 是梅毒诊断的最主要的实验室检查方法，根据所用抗原不同分为两类：非梅毒螺旋体抗原血清试验（非特异性抗体检测试验）和梅毒螺旋体抗原血清试验 梅毒螺旋体含有表面抗原，能刺激机体产生两类抗体。一类为抗螺旋体的特异性抗体；另一类抗体能与广泛分布于生物组织中的类脂抗原发生非特异性反应，这类抗体成为反应素，为非特异性抗体非梅毒螺旋体抗原血清试验：用心磷脂做抗原检测血液中的心磷脂抗体，即反应素。目前多数医院将此试验作为梅毒常规筛选试验，由于治疗后反应素会转阴或消失，因此此类试验可观察疗效、复发和再感染，其灵敏度高但特异性低，此类试验适用于期梅毒，而不适用于期

7、和期梅毒，包括潜伏梅毒和神经梅毒。梅毒螺旋体抗原血清试验：这种试验敏感性和特异性均高,一般用作确认试验 。这种试验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG或IgM 抗体,这种抗体即使患者经过足够治疗,仍能长期存在,甚至终身不消失,血清反应持续存在阳性,因此,不能用于观察疗效。10；.3、基因诊断技术检测梅毒螺旋体（TP-PCR）TP-PCR检测梅毒螺旋体DNA，特异性很强，敏感性很高，是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。4、脑脊液检查 用于诊断神经性梅毒11；. 使用TP重组抗原包被NC膜，TP重组抗原标记胶体金，快速的检测血清中TP抗体。12；.三、丙型肝炎病毒抗体检测13；.丙型病毒性肝炎是由丙肝病毒（

8、HCV）所引起，是通过输血或血制品、血透析、单采血浆还输血球、肾移植、静脉注射毒品、性传播、母婴传播等传染引起的。 传播途径类似乙型肝炎，但由于体液中HCV含量较少，且为RNA病毒，外界抵抗力较低，其传播方式较乙型肝炎局限，传染力也较乙肝病毒为弱。（1 1）输血及血制品传播）输血及血制品传播（2 2）注射、针刺、器官移植、血液透析传播）注射、针刺、器官移植、血液透析传播（3 3）生活密切接触传播）生活密切接触传播（4 4）性传播）性传播（5 5）母婴传播）母婴传播14；.（一）血常规、尿常规（二）肝功能检查 （三）其他生化指标检测（四）病原学检查 1、抗HCV IgM和抗HCV IgG 2、

9、HCV RNA（五）影像学检查15；.目前诊断主要依靠抗HCV2IgG及HCV2RNA 的检测，IgM类抗体的检测主要用于一些临床研究。抗HCV2IgG EL ISA 试剂自1989 年问世以来,包被抗原已从单纯的病毒NS3 区发展到包括C区、NS3 区、NS4 区、NS5 区抗原的第3 代试剂HCVHCV各片段抗体检出的临床意义各片段抗体检出的临床意义抗体抗体临临 床床 意意 义义C HCV感染后出现很早，阳性率也很高；在抗-HCV检测中发挥重要作用NS3 抗原的免疫原性很强，相应的抗体滴度也很高，HCV感染后出现很早，同C区抗体一样在抗-HCV的检测中发挥重要作用NS4 HCV感染后出现延

10、迟，持续阳性可能与疾病的慢性化有关NS5 HCV感染后出现较早，可用于急性期感染的诊断16；. 使用HCV重组抗原（包括C区、NS3 区）包被NC膜，HCV重组抗原标记胶体金，快速的检测血清中HCV抗体17；.四、乙型病毒性肝炎检测18；. 乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种世界性疾病。发展中国家发病率高，据统计，全世界无症状乙肝病毒携带者(HBsAg携带者)超过2.8亿，我国约占1.3亿。多数无症状，其中1/3出现肝损害的临床表现。目前我国有乙肝患者3000万。乙肝的特点为起病较缓，以亚临床型及慢性型较常见。无黄疸型HBsAg持续阳性者易慢性化。本病主要通过血液、母婴和性接触

11、进行传播。乙肝疫苗的应用是预防和控制乙型肝炎的根本措施。19；.一、乙肝表面抗原（HBsAg） HBsAg 血清中HBsAg阳性是HBV感染的标志。本身具有抗原性，无传染性。但由于HBsAg常与HBV同时存在，故认为是传染性标志之一。二、乙肝表面抗体（HBsAb） 抗-HBs 为感染HBV或接种乙肝疫苗后产生的一种保护性抗体。抗-HBs在初次感染HBV后623周出现，约20%在感染早期出现。抗-HBs阳性表示已获得免疫。定量检测抗-HBs的效价，认为抗-HBs效价10IUml表示有保护性。三、e抗原 （HBeAg）和e抗体（HBeAb） HBeAg 为HBV复制的重要指标。 e抗体为病毒复制停

12、止标志。病毒复制减少，传染性较弱，但并非完全没有传染性 20；.四、HBcAg及抗-HBC HBcAg 为HBC复制指标。外周血中无游离的HBcAg，所以血清中一般测不出。抗-HBc 为HBV感染的标志。抗-HBc IgM阳性是急性或近期HBV感染的指标，提示有病毒复制。其效价高代表急性期，效价低代表为慢性HBV感染或无症状HBsAg携带者。抗-HBc IgG阳性表示为既往感染HBV的指标。 五、HBV-DNAHBV-DNA阳性是表示HBV复制的最可靠指标。HBVHBV标志出现的顺序为标志出现的顺序为 ：HBsAgHBsAg、HBeAgHBeAg、抗、抗-HBc-HBc-（抗（抗-HBcIgM

13、-HBcIgM、抗、抗-HBcIgG-HBcIgG）、抗）、抗-HBe-HBe、抗、抗-HBs-HBs，同时检测，同时检测以上各项可说明以上各项可说明HBVHBV感染所处的阶段。感染所处的阶段。21；.乙肝乙肝“三对三对”检查检查大三阳（135阳性）：即表面抗原(HBsAg)、E抗原(HBeAg)、核心抗体(HBcAb)同时阳性，E抗原阳性是HBV复制的直接证据，这种情况出现，表示体内有HBV复制，传染性强。小三阳（145阳性）：即表面抗原(HBsAg）、E抗体(HBeAb) 、核心抗体（HBcAb)同时阳性，提示急性或慢性乙型肝炎，体内病毒复制，为乙型肝炎病毒复制状态。小三阳通常是由“大三阳

14、”转变而来，是人体针对E抗原产生了一定程度的免疫力。单二阳：即只有表面抗体(HBsAb）为阳性，乙肝疫苗接种者，若仅此项阳性，应视为乙肝疫苗接种后正常现象；感染乙肝病毒后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的人体内也会产生乙肝表面抗体，这是一种好现象22；.45阳性： 即E抗体(HBeAb) 、核心抗体（HBcAb)同时阳性， (1)既往感染过HBV；(2)急性HBV感染恢复期；(3)少数标本仍有传染性。15阳性：即表面抗原(HBsAg)、核心抗体(HBcAb) ，(1)急性HBV感染；(2)慢性HBsAg携带者；(3)传染性弱。245阳性：急性HBV感染后康复25阳性：既往感染过乙肝病毒，现病毒已基本

15、清除，身体在康复。但也有个别病人仍出现肝功能异常、DNA阳性，考虑病毒是否有变异存在，仍要继续治疗，仍有免疫力。HBV感染，恢复期。23；.24；. 乙肝表面抗原检测试剂盒（双抗体夹心法）乙肝表面抗原检测试剂盒（双抗体夹心法） 预先包被在聚酯膜上的金标记抗HBs单抗SAB-3以及固定于NC膜上测试区（T）的抗HBS单抗SAB-24，如果血清中含有HBsAg，则最终在T线位置形成夹心结构显色（SAB24HBsAgSAB3Au），检测人血中的HBsAg。乙肝表面抗体检测试剂盒（双抗原夹心法）乙肝表面抗体检测试剂盒（双抗原夹心法） 预先包被在聚酯膜上的金标记抗人源性HBsAg以及固定于NC膜上测试区

16、（T）的重组HBsAg，如果血清中含有HBsAb，则最终在T线位置形成夹心结构显色（重组HBsAgHBsAb人源性HBsAgAu），检测人血中的HBsAb。乙肝乙肝e e抗原检测（双抗体夹心法）抗原检测（双抗体夹心法） 预先包被在聚酯膜上的金标记抗HBe单抗HBe1以及固定于NC膜上测试区（T）的抗HBe单抗HBe2，如果血清中含有HBeAg，则最终在T线位置形成夹心结构显色（HBe2HBeAgHBe1Au），检测人血中HBeAg。25；.乙肝乙肝e e抗体（抗体（HBeAbHBeAb）检测（竞争法）检测（竞争法） 预先包被在聚酯膜上的金标记抗HBe单抗HBe1以及固定于NC膜上测试区（T）的

17、抗HBe单抗HBe2，含有中和抗原HBeAg的玻纤膜样品垫，如果血清中没有HBeAb，则中和抗原HBeAg最终在T线位置形成夹心结构显色（HBe2HBeAgHBe1Au），如果血清中含有HBeAb，则先与玻纤膜样品垫中的中和抗原HBeAg反应，不会在T线显色。所以阳性不显色、阴性显色。吸水纸NC膜玻纤膜样品垫金标垫CT二抗HBe2HBe1AuHBeAg按照血清的流向，各个步骤的反应：阴性：4、C线：HBe1-Au+二抗二抗-HBe1-Au（显色）3、T线： HBeAg-HBe1-Au+HBe2 HBe2-HBeAg-HBe1-Au（显色）2、金标垫：HBeAg+HBe1-AuHBeAg-HBe

18、1-Au1、样品垫：无反应26；.吸水纸NC膜玻纤膜样品垫金标垫CT二抗HBe2HBe1AuHBeAg按照血清的流向，各个步骤的反应：阳性：4、C线：HBe1-Au+二抗二抗-HBe1-Au（显色）3、T线： 无2、金标垫：无1、样品垫：HBeAg+HBeAb HBeAg-HBeAb27；.乙肝核心抗体（乙肝核心抗体（HBcAbHBcAb）检测（竞争法）检测（竞争法）预先包被在聚酯膜上的金标记重组HBcAg以及固定于NC膜上测试区（T）的抗HBc单抗，如果血清中没有HBcAb，则胶体金标记的HBcAg最终在T线位置与HBcAb结合显色（HBcAbHBcAgAu），如果血清中含有HBcAb，则先竞争与胶体金标记的HBcAg抗原反应，不会在T线显色。所以阳性不显色、阴性显色。吸水