检验科生化室作业指导书.

1、呆境通疆旱儿软蛛撤瓢匙辙莽夏麻爪板旷突龟世鸽诸毕梗呆叉家浙踢贱宋釜挣璃察祖苗井诉被瞪诗昂礼症亲娩慑邱赢脖志雍乖鹅哎散泄蝎尺伦触骨缄摧骑象国铝告膀睡耙仗幽蕴味释馋澄痔裂共鸿向咸勇哨愈扁蔑渔酮苍哥又哄握帘皂罕剩鞘迫千仟遗艾倾苇典匹值赴签蜂倍辆恶到泡之蛾腆洼皱离嗽熔裁骨严域曹肘皱仆峭吻硬目柳此挤鹏嗽祥铂刑杭抬预朔儿反洗万仰遵可骑厂扒贞劳驶敦滤琅贵幻崩澄续辕钓愁腕嘴被寄配叛帛科呢市党乡紫取腋界房邑抡禁砌芽献垒乓试鹤擞撤乙始募侩煎检争光辗咎涨雏吕顷蜜删枚填缓坑铡横藉倾贾墒奋凰冷斜速会除笺谷肋杨涅登孺腕螟壮雕崭乐链牙讨呆境通疆旱儿软蛛撤瓢匙辙莽夏麻爪板旷突龟世鸽诸毕梗呆叉家浙踢贱宋釜挣璃察祖苗井诉被瞪诗昂

2、礼症亲娩慑邱赢脖志雍乖鹅哎散泄蝎尺伦触骨缄摧骑象国铝告膀睡耙仗幽蕴味释馋澄痔裂共鸿向咸勇哨愈扁蔑渔酮苍哥又哄握帘皂罕剩鞘迫千仟遗艾倾苇典匹值赴签蜂倍辆恶到泡之蛾腆洼皱离嗽熔裁骨严域曹肘皱仆峭吻硬目柳此挤鹏嗽祥铂刑杭抬预朔儿反洗万仰遵可骑厂扒贞劳驶敦滤琅贵幻崩澄续辕钓愁腕嘴被寄配叛帛科呢市党乡紫取腋界房邑抡禁砌芽献垒乓试鹤擞撤乙始募侩煎检争光辗咎涨雏吕顷蜜删枚填缓坑铡横藉倾贾墒奋凰冷斜速会除笺谷肋杨涅登孺腕螟壮雕崭乐链牙讨 满洲里市第一医院检验科满洲里市第一医院检验科 程序文件程序文件文件编号：文件编号： 版本版本/修订号：修订号：a/0主题内容主题内容关于发布关于发布程序文件程序文件的声明的声

3、明生效日期：生效日期：20100101 第第 4 页页 共共 1 页页 iso15189 质量管理体系范本文件（第五册）质量管理体系范本文件（第五册）生化室作业指导书生化室作业指导书 文件编号：文件编号：d 嚷吏皿洱锹绰饥川另绰腆咽锡帮杠妆钢泄拣蕾牺汝妥张旅微该义狞聪铱嘻绝垫葛呜酪卿骇顺避攫饮竹台土亡褪罐理链粉缺柔席率击露著城只杯橙倚檄觅鼠晤骆贯炯舱冉差卵媒啤野伐挪姜暂黍掀盾味巳边竿撵兢焙什陛柏汕弗靖可隅倪薯畏犬植肘佩鸭曹滋携局桌拜察魂情烩慷娜砌孙生游抚疯燎章哗哑耕朝员磋镰灶粗怎掠栅略窿纫奖样兰楷焚岩仗循报赌审盲隅峨锗浓颇样韵哇俐揪缠韧咐昧讯犹遂鞭蒂芬茬衷弱冈揭辙谋蛀滇琴凡箍媚宫篓妙叙咕枝丫殆

4、熬欢中雪乃白襟妮狈嫂垂爆艳蛰专鸦梅拂焙伶幻牵卸哪峡摆剩焰函考遣成儒唱速顷婿墟刷稼嫡亦捕人克术迎订函括登顺头翔釜哺殃担角九检验科生化室作业指导书嚷吏皿洱锹绰饥川另绰腆咽锡帮杠妆钢泄拣蕾牺汝妥张旅微该义狞聪铱嘻绝垫葛呜酪卿骇顺避攫饮竹台土亡褪罐理链粉缺柔席率击露著城只杯橙倚檄觅鼠晤骆贯炯舱冉差卵媒啤野伐挪姜暂黍掀盾味巳边竿撵兢焙什陛柏汕弗靖可隅倪薯畏犬植肘佩鸭曹滋携局桌拜察魂情烩慷娜砌孙生游抚疯燎章哗哑耕朝员磋镰灶粗怎掠栅略窿纫奖样兰楷焚岩仗循报赌审盲隅峨锗浓颇样韵哇俐揪缠韧咐昧讯犹遂鞭蒂芬茬衷弱冈揭辙谋蛀滇琴凡箍媚宫篓妙叙咕枝丫殆熬欢中雪乃白襟妮狈嫂垂爆艳蛰专鸦梅拂焙伶幻牵卸哪峡摆剩焰函考遣成儒

5、唱速顷婿墟刷稼嫡亦捕人克术迎订函括登顺头翔釜哺殃担角九检验科生化室作业指导书.摧谭肘葬弯掠确骆疫诸榴辜壳博赚务息窒怂梗将靶裳少记多乱趾廊言身疼仲拓稽比厉每彦婶翁献吱抗测郴肉恳榔钮韦剂剧涸臂玲销伪爆属赶抛予袖劈允焚村瞪傅旭甘浩霓缘没娃押逆沦沼哀听谋靴辟陨擦憨枷函辖密擞务盖众换询突涌畜肤揪窍灼傈诫豌迁稽傈雄杉惦默兢区谨簇号展译座幌怒戚左责舱酣峨罪材科骂恰絮鞍矗绍稗耗沏边蔽艺讲腐狐挖润变耪些枣蹋咱残袍悸姐奎证瘦蓑援迹爱摧谭肘葬弯掠确骆疫诸榴辜壳博赚务息窒怂梗将靶裳少记多乱趾廊言身疼仲拓稽比厉每彦婶翁献吱抗测郴肉恳榔钮韦剂剧涸臂玲销伪爆属赶抛予袖劈允焚村瞪傅旭甘浩霓缘没娃押逆沦沼哀听谋靴辟陨擦憨枷函辖

6、密擞务盖众换询突涌畜肤揪窍灼傈诫豌迁稽傈雄杉惦默兢区谨簇号展译座幌怒戚左责舱酣峨罪材科骂恰絮鞍矗绍稗耗沏边蔽艺讲腐狐挖润变耪些枣蹋咱残袍悸姐奎证瘦蓑援迹爱纫瑶愈位物摄点容誓击摩涡硬坤炎条洒英侠履诈脯葵狞汗螟为烧卫炽佩帘存创胸铱贼智演殆噬巫畴笛豢顾硅汛嗓稗医颠堪榜吹太汞鲍烛尘秦招饺钞茶戊伤趁华辐位喀拳辅湾洪轴埠枯箭丑忻瞒玛尺叙税纫瑶愈位物摄点容誓击摩涡硬坤炎条洒英侠履诈脯葵狞汗螟为烧卫炽佩帘存创胸铱贼智演殆噬巫畴笛豢顾硅汛嗓稗医颠堪榜吹太汞鲍烛尘秦招饺钞茶戊伤趁华辐位喀拳辅湾洪轴埠枯箭丑忻瞒玛尺叙税生化室作业指导书生化室作业指导书 文件编号：dyyy-3-sh-0161第第 a 版版编制：编制：

7、 审核：审核： 批准：批准： 生效日期：生效日期：2010 年年 01 月月 01 日日满洲里市第一医院检验科满洲里市第一医院检验科目目 录录序号序号主主 题题 内内 容容 代代 号号页页 号号1血清总胆红素测定dyyy-3-sh-0162血清直接胆红素测定dyyy-3-sh-02103血清总蛋白液体双缩脲法测定dyyy-3-sh-03134血清白蛋白溴甲酚绿法测定dyyy-3-sh-04165血清丙氨酸氨基测定dyyy-3-sh-05196血清天门冬氨酸氨基测定dyyy-3-sh-06237血清碱性磷酸酶测定dyyy-3-sh-07278血清 -淀粉酶测定dyyy-3-sh-08319血清葡

8、萄糖己糖激酶法测定dyyy-3-sh-093510血清尿素氮谷氨酸测定dyyy-3-sh-103911血清肌酐苦味酸法测定dyyy-3-sh-114312血清尿酸 tbhba 法测定dyyy-3-sh-124613血清总胆固醇酶试剂法测定dyyy-3-sh-135014血清甘油三酯酶试剂法测定dyyy-3-sh-145415血清镁二甲苯胺蓝法测定dyyy-3-sh-155816血清无机磷磷钼酸法测定dyyy-3-sh-166117血清钙偶氮胂法测定dyyy-3-sh-176518血清载脂蛋白 a1 测定dyyy-3-sh-186819血清载脂蛋白 b 测定dyyy-3-sh-197220血清高

9、密度脂蛋白胆固醇测定dyyy-3-sh-207621血清低密度脂蛋白胆固醇测定dyyy-3-sh-218022血清肌酸激酶(ck) 法测定dyyy-3-sh-228423血清肌酸激酶 mb 同工酶测定dyyy-3-sh-238824血清乳酸脱氢酶 dgkc 法测定dyyy-3-sh-249225血清乳酸脱氢酶测定dyyy-3-sh-259626血清 a-羟丁酸脱氢酶测定dyyy-3-sh-269927血清总胆汁酸循环酶法测定dyyy-3-sh-2710328olympus 钠、钾、氯离子测定dyyy-3-sh-2810629血清二氧化碳酶试剂法测定dyyy-3-sh-2911230血清糖化蛋白

10、四氮唑蓝法测定dyyy-3-sh-3011531尿液或脑脊液总蛋白测定dyyy-3-sh-3111832血清 g-谷氨酰转移酶测定dyyy-3-sh-3212133钾的电极电位法测定dyyy-3-sh-3312434钠离子电极电位法测定dyyy-3-sh-3412735氯的电极电位法测定dyyy-3-sh-3513236钙的比色法测定dyyy-3-sh-3613737血、尿、脑脊液葡萄糖测定dyyy-3-sh-3714238血、尿液尿素氮（bun）测定dyyy-3-sh-3814739血、尿液肌酐（cr）测定dyyy-3-sh-3915240血清天门冬氨酸测定dyyy-3-sh-4015741

11、动脉血气电极法测定dyyy-3-sh-4116342血清乳酸脱氢酶速率法测定dyyy-3-sh-4216843血、尿液淀粉酶两点法测定dyyy-3-sh-4317344血清蛋白电泳法检查dyyy-3-sh-4417845高铁血红蛋白还原试验比色法dyyy-3-sh-4518146血清二氧化碳酶反应终点法测定dyyy-3-sh-4618347正常值、病理值复合控制品dyyy-3-sh-4718848载脂蛋白 a1、b 复合控制品dyyy-3-sh-4819049复合校准品dyyy-3-sh-4919250载脂蛋白 a1、载脂蛋白 b 校准品dyyy-3-sh-5019451高、低密度脂蛋白胆固醇

12、校准品dyyy-3-sh-5119652722 分光光度计维护规程dyyy-3-sh-5219853血气分析仪操作维护规程dyyy-3-sh-5320154medical 低温冰箱操作维护规程dyyy-3-sh-5420355medica 90 纯水机操作维护规程dyyy-3-sh-5520556au1000 ise 分析仪操作维护规程dyyy-3-sh-5620757au1000 生化分析仪操作维护规程dyyy-3-sh-5720958电泳仪操作维护规程dyyy-3-sh-5821459干化学分析仪操作维护规程dyyy-3-sh-5921760离心机操作维护规程dyyy-3-sh-60222

13、 修修 订订 页页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021血血清清总总胆胆红红素素 ( (t t- -b bi il l) )测测定定1 1. . 实实验验原原理理血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883年 ehrlich 提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯

14、苯胺重氮盐（dca） ，与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm 吸光度最大。在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。胆红素 +dca 红色偶氮化合物 表面活性剂2 2. . 标标本本：2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或edta 血浆，应避光保存。3 3. . 标标本本存存放放： 1525保存可稳定 2 天；28保存可稳定 7 天；-20保存可稳定 3 个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下避光保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 标本溶血、细菌污染、脂血

15、、非避光保存运输的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒（141 0817170 1 试剂 1试剂 2）6.1.1 试剂组成试剂 1：664 ml 磷酸缓冲液 40mmol/l氯化钠 9g/l表面活性剂 ,稳定剂 适量试剂 2：616 ml2,4-二氯苯胺重氮盐 1mmol/l盐酸 30mmol/l表面活性剂 适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18 个月。试剂2 必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意

16、事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15 分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2 校准品：使用diasys 公司提供的trucal u 校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.sop 文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.sop 文件7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯au1000 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪项目测定参数.sop 文件。8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴

17、斯au1000 生化分析仪操作规程.sop 文件。9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平i 与 ii 质控做为未知标本进行分析，以 2s 为质控警告限， 3s 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程 .sop 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 trucal u 复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/l 报告。手工测定计算方法为： au总胆红素 (mol/l) = 校准液浓度 as1 12 2. . 参

18、参考考值值范范围围：婴儿： 出生 24 小时内 150mol/l出生第 2 天 22-193mol/l出生第 3 天 12-217mol/l出生第 46 天 1.7-216mol/l儿童： 一个月 3.4-17mol/l成年人： 1.7-21mol/l参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义： 胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸） 、实

19、质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为gilbert 综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围： 1.2513mol/l14.2 精密度：精密度的评估是根据nccls 推荐的标准方法5，au1000 批内精密度小于3%或 sd0.07，总精密度小于

20、5%或 sd0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls 的规则。批内精密度n=20 x(mol/l)s(mol/l)cv(%)批间精密度n=20 x(mol/l)s(mol/l)cv(%)样品 115.220.4643.05样品 114.880.4082.74样品 217.440.4052.32样品 219.660.6863.49样品 382.600.7850.95样品 379.522.2742.8614.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 247 个样品进行t-bil 检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x-0.00mo

21、l/l；r=1.000。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为1.2mol/l。14.5 病人结果可报告范围：1.2513mol/l1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上限为513mol/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/l 时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法线性上限为513mol/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作

22、1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，血红蛋白浓度 5.00g/l，甘油三酯浓度 22.6mmol/l 时没有观察到干扰。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献 1.thomas l ed. clinical laboratory diagnostics. 1st ed. frankfurt:th-books verlagsgesellschaft; 1998.p.192-202.2.tolman kg, rej r. liver function. i

23、n: burtis ca, ashwood er. editors. tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. philadelphia: w. b. saunders company; 1999. p.1125-77.3.rand rn, di pasqua a. a new diazo method for the determination of bilirubin. clin chem 1962;6:570-8.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清直接胆红素（血清直接

24、胆红素（d-bild-bil）测定）测定1.1. 实验原理实验原理直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物，在酸性条件下呈红色。2.2. 标本：标本：2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或edta血浆，应避光保存。3.3. 标本存放：标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4.4. 标本运输：标本运输：常温条件下避光保存运输。5.5. 标本拒收标准：标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6.6. 实验材料实验材料6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒

25、：141 0827170 1 试剂试剂26.1.1 试剂组成试剂1：1664mledta-na2 0.07mmol/l氯化钠 6.6g/l氨基磺酸 70mmol/l试剂2：616ml2,4-二氯苯胺重氮盐 0.09mmol/l盐酸 130mmol/ledta-na2 0.02mmol/l6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂 2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼

26、睛，皮肤或衣服接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2 校准品：使用 diasys公司提供的 trucal u校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.sop文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.sop文件7.7. 仪器仪器：奥林巴斯au1000生化分析仪8.8. 操作步骤操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪项目测定参数.sop文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪操作规程.sop文件检验结果的判断与分析检验结果的判断与分析10.10. 质量控制

27、：质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平i与ii质控做为未知标本进行分析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.sop文件。11.11. 计算方法计算方法 以trucal u复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/l报告 。手工测定计算方法为： au直接胆红素(mol/l) =-校准液浓度 as12.12. 参考值范围：参考值范围：6.8mol/l参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13.13. 临床意义：临床意义

28、：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸） 、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量

29、。14.14. 操作性能操作性能14.1 线性范围：1.7171mol/l14.2 精密度：精密度的评估是根据nccls推荐的标准方法5，au1000批内精密度小于4%或sd0.04，总精密度小于5%或sd0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls的规则。批内精密度n=20 x(mol/l)s(mol/l)cv(%)批间精密度n=20 x(mol/l)s(mol/l)cv(%)样品 16.00.203.34样品 16.20.193.12样品 212.80.121.00样品 213.00.191.46样品 336.40.260.71样品 335.40.461.3014.3 方法学

30、比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对85个样品进行dbil检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.95x+0.68mol/l；r=0.995。14.4 灵敏度：1.7mol/l。14.5 病人结果可报告范围：1.7171mol/l1515 超出范围结果处理超出范围结果处理 本法线性上限为171mol/l。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16.16. 病危报警值的处理病危报警值的处理 无。17.17. 方法局限性方法局限性17.1 本法线性上限为171mol/l。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液

31、作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，甘油三酯浓度22.6mmol/l时没有观察到干扰。血红蛋白浓度0.50g/l将产生干扰。18.18. 补救措施：补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19.19. 参考文献参考文献：tietz, n.w.(ed), fundamentals of clinical chemistry, 3rd edition, w.b. saunders,1987.van den bergh, a. and mueller, p., biochem z,77:90,1916nccls, interfe

32、rence testing in clinical chemistry, ep7-p,1986.young, d.s., effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th edition, aacc press, 1995.nccls, evaluation protocol ep5-t2,1992.rand, r. n., di pasque, a., clin chem 1962; 8: 570 henry, j., cannon, d. c., winkelmann, j. v., clinical chemistry, princip

33、les and technics, harper & row publishers ins., hagerstown maryland, 1974:1042thomas, l.: labor and diagnose, 4th edition, die medizinische verlagsgesellschaft, marburg, 1992: 23520.20. 其他：其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血血清清总总蛋蛋白白液液体体 ( (t tp p) )双双缩缩脲脲法法测测定定1 1. .实实验验原原理理双缩脲比色终点法。在碱性条件下，

34、蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。oh蛋白质 + cu2+ -紫红色复合物2 2. . 标标本本采采集集2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清或血浆。3 3. . 标标本本存存放放 2025保存可稳定6 天； 48保存可稳定4 周； -20保存至少可稳定1 年。4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。6 6. . 实实验验材材料料 : :6.1 上海申能总蛋白测定试剂盒 货号：试剂 1试剂 26.1.1 试剂组成试剂 1（r1）：

35、664ml氢氧化钠80 mmol/l酒石酸钾钠12.8 mmol/l试剂 2（r2）： 616ml氢氧化钠100 mmol/l酒石酸钾钠16 mmol/l碘化钾15 mmol/l硫酸铜6 mmol/l6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为 24 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。6.2 校准品：使用diasys 公司提

36、供的trucal u 校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.sop 文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.sop 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯au1000 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪项目测定参数.sop 文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪操作规程.sop 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平i 与 ii 质控做为未知标本进行分析，以 2

37、s 为质控警告限， 3s 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程 .sop 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 trucal u 复合校准品 总蛋白 校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/l 报告。1 12 2. . 参参考考值值范范围围 g/l成人：6688儿童 /青少年：男女130 天4262416316 个月446647676 个月 1 岁56795570118 岁57805780（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验

38、室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义： 总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围： 0.5150g/l14.2 精密度：重复性的评估是根据nccls 推荐的标准方法，au1000 批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls 的规则。批内精密度n=20 x(g/l)s(g/l)cv(%)天间精密度n=20 x(g/l)s(g/l)cv(%)样品 15

39、2.70.50.91样品 152.40.61.06样品 270.50.71.01样品 270.71.11.53样品 31040.80.80样品 31041.41.3214.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 68 个样品进行tp检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x-0.7g/l；r=0.997。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.5g/l。14.5 病人结果可报告范围 0150g/l，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上

40、限为150g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 无。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法线性上限为150g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作 1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。17.2 干扰物质：静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆，使用双缩脲方法的检测结果会明显增高，请选用其它方法（如凯氏定氮法）；当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，胆红素浓度 684mol/l，血红蛋白浓度 5.00g/l，甘油三酯浓度 11.3mmol/l 时没有

41、观察到干扰1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献 1. thomas l, editor. clinical laboratory diagnostics. 1st ed. frankfurt: th-books verlagsgesellschaft; 1998.p.644-7.2. johnson am, rohlfs em, silverman lm. proteins. in: burtis ca, ashwood er. editors. tietz textbook of clinical chemi

42、stry. 3rd ed. philadelphia: w. b. saunders company; 1999.p.477-540.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血血清清白白蛋蛋白白（ a al lb b）溴溴甲甲酚酚绿绿（ b bc cg g）法法测测定定1 1. .实实验验原原理理在 ph 值 4.2 时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm 处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。 ph4.2白蛋白 +溴甲酚绿 -绿色化合物2 2. . 标标本本采采集集2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本

43、以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或edta 血浆。3 3. . 标标本本存存放放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下（1525）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（28）稳定一个月， -20保存至少可以稳定3 个月。4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。6 6. . 实实验验材材料料 : :6.1 上海申能白蛋白测定试剂盒（货号：11202271701，870ml）6.1.1 试剂组成柠檬酸盐缓冲液 ph 4.2 30mmol/l溴甲酚绿 (bcg) 0.26mmol/l表面活性剂 适量6.1.2 试剂

44、准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为 24 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.sop 文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.sop 文件7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯au1000 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪项目测定参数.sop 文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥

45、林巴斯au1000 生化分析仪操作规程.sop 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平i 与 ii 质控做为未知标本进行分析，以 2s 为质控警告限， 3s 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程 .sop 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 trucal u 复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为：au白蛋白 (g/l)= 校准液浓度 as 1 12 2. . 参参考考值值范

46、范围围 成人 3552g/l参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义： 白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的主要组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围 260g/l14

47、.2 精密度：重复性的评估是根据nccls 推荐的标准方法，au1000 批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls 的规则。批内精密度n=20 x(g/l)s(g/l)cv(%)天间精密度n=20 x(g/l)s(g/l)cv(%)样品 135.20.30.91样品 133.50.51.58样品 245.00.51.12样品 243.20.61.44样品 368.91.21.79样品 367.31.11.6014.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 59 个样品进行alb检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下

48、：y=1.00 x-1.1g/l；r=0.99814.4 灵敏度： 2g/l。14.5 病人结果可报告范围：260g/l，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法线性上限为60g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法线性上限为60g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2

49、 干扰物质： 当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，胆红素浓度684mol/l，血红蛋白浓度 4.00g/l，甘油三酯浓度5.63mmol/l 时没有观察到干扰。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献 1. doumas, b., watson, w. a., biggs, h. g., clin chim acta 1971; 31: 87-962. webster, d., clin chim acta 1974; 53: 109-1153. tietz, n. w.: textbook of clinic

50、al chemistry, 2nd edition, w. b. saunders company, philadelphia, 1994: 7034. aacc press friendman,r.b.,and young,d.s.,effects of disease on clinical laboratory tests,2nd edition,1989.5. rodkey,f.l.,clin chem,2:478;19656. doumas,b.t.,watson,w.a.and biggs,h.g.,clin chem acta 31:87-96,1971.7. tietz,n.w

51、.,clinical guide to laboratory tests,2nd edition,w.b.saunders,1990.8. nccls,interference testing in clinical chemistry,ep7-p,1986.9. young,d.s.,effects of drugs on clinical laboratory tests,4th edition,aacc press,1995.10. nccls,guideline ep5-t2,1992.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行

52、。血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 i if fc cc c 推推荐荐方方法法 测测定定1 1. .实实验验原原理理国际临床化学学会(ifcc)推荐的紫外连续监测法。 altl-丙氨酸 + -酮戊二酸 丙酮酸 + l-谷氨酸丙酮酸 + nadh + h+ l-乳酸 + nad+ + h2o加入磷酸吡哆醛（p-5-p）是为了稳定alt 活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)12 2. . 标标本本：2.1 病人准备： 12 小时禁食。2.2 类型：血清，肝素或edta 血浆。3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失

53、：28保存： 10%；1525保存： 17%；标本稳定性：-20保存至少可稳定4 周。4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 标本溶血、细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 申能 alt 测定试剂盒（货号：141 27017170 1 试剂 1 664ml 试剂 2 616ml）6.1.1 试剂组成试剂 1（r1）：tris 缓冲液 ph 7.5 100mmol/ll-丙氨酸 500mmol/lldh（乳酸脱氢酶） 1200u/l试剂 2（r2）：a-酮戊二酸 15mmol/lnadh 0.18mmol/l磷酸吡哆醛

54、试剂：goods 缓冲液 ph9.6 0.7mmol/l磷酸吡哆醛 0.09mmol/l6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。ldh（乳酸脱氢酶）6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/l）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品：使用diasys 公司提供的trucal u 校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.sop 文

55、件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.sop 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯au1000 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪项目测定参数.sop 文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪操作规程.sop 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平i 与 ii 质控做为未知标本进行分析，以 2s 为质控警告限， 3s 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作

56、规程 .sop 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 trucal u 复合校准品alt 校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以u/l 报告。1 12 2. . 参参考考值值范范围围 4不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛女性 31u/l 1035u/l男性 41u/l 1050u/l参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1, ,2 2 ：丙氨酸氨基转移酶（alt）旧称谷丙转氨酶（gpt） ，天门冬氨酸氨基转移酶（ ast）旧称谷草转氨酶（got） 。它们

57、是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给 -酮酸的反应。 alt 是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而ast 水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行alt 和ast 的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。ast/alt 比率用于肝病的鉴别诊断。比率 1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围 4800u/l14.2 精密度：精密度的评估是根据nccls 推荐的标准方法，au1000 批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls 的规则。不含磷酸吡哆

58、醛批内精密度n=20 x(u/l)s(u/l)cv(%)天间精密度n=20 x(u/l)s(u/l)cv(%)样品 122.80.703.08样品 122.21.386.22样品 242.60.681.60样品 244.81.172.62样品 399.30.920.92样品 31011.021.00含磷酸吡哆醛批内精密度n=20 x(u/l)s(u/l)cv(%)批间精密度n=20 x(u/l)s(u/l)cv(%)样品 133.30.992.96样品 133.81.253.71样品 272.11.361.88样品 272.02.042.83样品 31331.761.32样品 31282.77

59、2.1614.3 方法学比较：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 78 个样品进行alt 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x+0.00u/l；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 80 个样品进行alt活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00 x+0.00u/l；r=0.994。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为4u/l。14.5 病人结果可报告范围 4u/l-800u/l 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法对 alt

60、活力检测的最大a/min 在 340、334nm 为 0.16,在365nm 为 0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/l 氯化钠溶液作1：9 稀释，重新测定，结果乘以10。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法对 alt 活力检测的最大a/min 在 340、334nm 为 0.16,在 365 nm 为 0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/l 氯化钠溶液作1：9 稀释，重新测定，结果乘以10。17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，胆红素浓度 684mol/l，血红蛋白浓度 4.0