药物制剂分析二

1、1药物制剂分析（二）药物制剂分析（二）analysis of pharmaceutical preparations2p 【注射液的装量注射液的装量】 p 【注射用无菌粉末的装量差异注射用无菌粉末的装量差异】 p 【可见异物可见异物】 p 【无菌无菌】 p 【热原热原】或或【细菌内毒素细菌内毒素】 p 【不溶性微粒不溶性微粒】 指药物制成的供注入体内的灭菌溶液、乳状液指药物制成的供注入体内的灭菌溶液、乳状液或混悬液，以及供临用前配成溶或混悬液，以及供临用前配成溶液或混悬液的液或混悬液的无菌粉末或浓溶液。无菌粉末或浓溶液。注射剂大都血管内直接给药，部分肌肉注射。注射剂大都血管内直接给药，部分肌肉

2、注射。安全性要求与检查必须特别严格。安全性要求与检查必须特别严格。 注射剂注射剂3不溶性微粒检查不溶性微粒检查p在在可见异物检查可见异物检查符合规定后，用以检查静符合规定后，用以检查静脉滴注用注射液（装量为脉滴注用注射液（装量为100ml以上者）以上者）中不溶性微粒。中不溶性微粒。p除另有规定外，每除另有规定外，每1ml中含有中含有10m以上的以上的微粒不得超过微粒不得超过20粒，含粒，含25m的微粒不得超的微粒不得超过过2粒。粒。p显微计数法、光阻法显微计数法、光阻法4热原（热原（pyrogen）检查法检查法o 热原热原o 活的微生物的代谢产物或是死亡的微生物尸体，是活的微生物的代谢产物或是

3、死亡的微生物尸体，是微生物的一种内毒素，注射后会引起体温异常升高，微生物的一种内毒素，注射后会引起体温异常升高，严重的还会出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。严重的还会出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。o 热原检查法热原检查法o 本法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，本法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。供试品中所含热原的限度是否符合规定。5o 检查法检查法 o 取适用的家兔取适用的家兔3只，测定其正常体温后只，测定其正常体温后15分钟以内，分钟以内，自耳静脉缓缓注

4、入规定剂量并温热至约自耳静脉缓缓注入规定剂量并温热至约38的供试品的供试品溶液，然后每隔溶液，然后每隔30分钟按前法测量其体温分钟按前法测量其体温1次，共测次，共测6次，以次，以6次体温中最高的一次减去正常体温，即为该次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度兔体温的升高温度()。o 如如3只家兔中有只家兔中有1只体温升高只体温升高0.6或或0.6以上，或以上，或3只只家兔体温升高均低于家兔体温升高均低于0.6，但体温升高的总和达，但体温升高的总和达1.4或或1.4以上，应另取以上，应另取5只家兔复试。只家兔复试。o 结果判断结果判断61、注射剂中主药含量大，附加成分不、注射剂中主

5、药含量大，附加成分不干扰，可直接测定干扰，可直接测定葡萄糖酸钙的原料药和注射剂：络合滴定法；葡萄糖酸钙的原料药和注射剂：络合滴定法；2、主药遇热不稳定而易分解，常采用、主药遇热不稳定而易分解，常采用有机溶剂提取后测定有机溶剂提取后测定3、主药含量较少，采用灵敏度高的方、主药含量较少，采用灵敏度高的方法法排除附加剂干扰排除附加剂干扰注射剂含量测定注射剂含量测定7注射剂的溶剂注射剂的溶剂u包括包括: 水性溶剂、植物油及其他非水性溶剂等。水性溶剂、植物油及其他非水性溶剂等。u 最常用的水性溶剂为注射用水，亦可用最常用的水性溶剂为注射用水，亦可用0.9%氯化钠溶液或其他适宜的水溶液。氯化钠溶液或其他适

6、宜的水溶液。u 非水溶剂有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。非水溶剂有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。u 常用的油溶剂为注射用大豆油。其质量应符合常用的油溶剂为注射用大豆油。其质量应符合大豆油大豆油(供注射用供注射用)的标准。的标准。8p附加剂一般有渗透压调节剂、附加剂一般有渗透压调节剂、phph值调节剂、增溶剂、抗氧剂、值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂等。抑菌剂等。p抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等。抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等。p常用的抑菌剂及其浓度常用的抑菌剂及其浓度(g/ml)(g/ml)为苯酚为苯酚0.5%0.5%、甲酚、甲酚0.3%0.3%、三氯叔、三氯叔丁醇

7、丁醇0.5%0.5%等。等。p抑菌剂用量应能抑制注射液内微生物的生长。加有抑菌剂的注抑菌剂用量应能抑制注射液内微生物的生长。加有抑菌剂的注射液，仍应用适宜的方法灭菌。射液，仍应用适宜的方法灭菌。附加剂附加剂9排除附加剂干扰排除附加剂干扰 o抗氧剂（亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、维生素c等）onacl（等渗溶液） o稳定剂(乳酸钙或其他钙盐) o溶剂水o溶剂油 10抗氧剂抗氧剂 具有还原性药物的注射剂中常加抗氧剂。具有还原性药物的注射剂中常加抗氧剂。 对氧化还原滴定有干扰。对氧化还原滴定有干扰。nahso3 + ch3coch3 (ch3)2c(oh)-so3na碘量法测定维生素碘量法测定维

8、生素c注射液注射液 na2s2o5 + h2o2nahso3nahso3 + hcho ho-ch2-so3na碘量法测定安乃近注射液。碘量法测定安乃近注射液。但是，甲醛也具有还原性。氧化电位高时不宜。但是，甲醛也具有还原性。氧化电位高时不宜。 亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠加入丙酮、或甲醛消除。亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠加入丙酮、或甲醛消除。1、加掩蔽剂、加掩蔽剂11【规格规格】 (1)1ml 0.25g (2)2ml 0.5g【含量测定含量测定】 精密量取本品精密量取本品10ml，置，置100ml量瓶中，加乙量瓶中，加乙醇醇80ml，再加水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取再加水稀释至

9、刻度，摇匀，立即精密量取10ml，置锥形瓶中，加乙醇置锥形瓶中，加乙醇2ml、水、水6.5ml与与甲醛溶液甲醛溶液0.5ml，放置放置1分钟，加盐酸溶液分钟，加盐酸溶液(91000)1.0ml，摇匀，用碘滴定液摇匀，用碘滴定液(0.1mol/l)滴定（控制滴定速度为每分钟滴定（控制滴定速度为每分钟35ml），），至溶液至溶液所显的淡黄色在所显的淡黄色在30秒钟内不褪。每秒钟内不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/l)相当于相当于17.57mg的的c13h16n3nao4sh2o。安乃近注射液安乃近注射液 metamizole sodium injection122 2、加酸分解消除、加

10、酸分解消除 亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠 均可均可被酸分解，加热逸出被酸分解，加热逸出soso2 2na2s2o3 + 2hcl 2nacl + h2s2o3(加热)nahso3+hcl nacl + h2so3 (加热)so2 + h2oso2 + h2o13盐酸普鲁卡因胺注射液盐酸普鲁卡因胺注射液 procainamide hydrochloride injection 本品为盐酸普鲁卡因胺的灭菌水溶液。本品为盐酸普鲁卡因胺的灭菌水溶液。 【规格规格】(1)1ml0.1g (2)2ml0.2g (3)5ml0.5g (1)1ml0.1g (2)2ml0.

11、2g (3)5ml0.5g (4)10ml1g (4)10ml1g 【含量测定含量测定】精密量取本品精密量取本品5ml5ml，加水加水40ml40ml与盐酸溶液与盐酸溶液(12)10ml(12)10ml，迅速煮沸，迅速煮沸，立即冷却至室温，照永停滴定法立即冷却至室温，照永停滴定法( (附附录录 a) a)，用亚硝酸钠滴定液用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/l)(0.1mol/l)滴定。每滴定。每1ml1ml亚硝酸亚硝酸钠滴定液钠滴定液(0.1mol/l)(0.1mol/l)相当于相当于27.18mg27.18mg的的c13h21n3ohclc13h21n3ohcl。 143 3、加弱氧化剂氧化消

12、除、加弱氧化剂氧化消除过氧化氢和硝酸，将抗氧剂过氧化氢和硝酸，将抗氧剂(亚硫酸盐等亚硫酸盐等)氧化，而不氧化被测药物，不消耗滴定液。氧化，而不氧化被测药物，不消耗滴定液。na2so3 + h2o2 na2so4 + h2ona2so3 + 2hno3 na2so4 + 2no2 + h2o15盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液本品为盐酸氯丙嗪的灭菌水溶液。本品可本品为盐酸氯丙嗪的灭菌水溶液。本品可加适量的维生素加适量的维生素c c ( 0.01mol/l ( 0.01mol/l hclhcl中中uvuv最大吸收最大吸收243nm243nm) )。【含量测定含量测定】避光操作。精密量取本品适量避光

13、操作。精密量取本品适量(约相当于盐酸氯约相当于盐酸氯丙嗪丙嗪50mg)，置，置250ml量瓶中，加盐酸溶液量瓶中，加盐酸溶液(91000)至刻度，至刻度，摇匀；精密量取摇匀；精密量取10ml，置，置50ml量瓶中，加盐酸溶液量瓶中，加盐酸溶液(91000)至刻度，摇匀，照分光光度法至刻度，摇匀，照分光光度法(附录附录 a)，在，在306nm的波长的波长处测定吸收度，按处测定吸收度，按c17h19cln2shcl的吸收系数的吸收系数( e )为为115计计算，即得。算，即得。 【规格规格】(1)1ml 10mg(2)1ml 25mg(3)2ml 50mg 4 4、uvuv吸收谱差消除干扰吸收谱差

14、消除干扰243 254 306氯丙嗪氯丙嗪维生素维生素c盐酸氯丙嗪注射液的含量测定盐酸氯丙嗪注射液的含量测定17甲萘氢醌二磷酸酯钠注射液甲萘氢醌二磷酸酯钠注射液(usp)(usp)本品为灭菌水溶液。含苯甲酸、或苯酚抑菌剂，及焦亚硫酸钠。本品为灭菌水溶液。含苯甲酸、或苯酚抑菌剂，及焦亚硫酸钠。5. 萃取分离后萃取分离后 uv测定测定【含量测定含量测定】精密移取本品适量，用精密移取本品适量，用0.1mol/l0.1mol/l盐酸稀释盐酸稀释配制为每配制为每1ml1ml含甲萘氢醌二磷酸酯钠含甲萘氢醌二磷酸酯钠5050 g g的溶液，取上述溶的溶液，取上述溶液液10ml10ml置于置于60ml60ml

15、分液漏斗中，用分液漏斗中，用15ml15ml三氯甲烷提取三氯甲烷提取三次，弃三次，弃去有机层，取水层离心分离后作为供试液，去有机层，取水层离心分离后作为供试液，于于290nm290nm处处测定测定其吸收值其吸收值a a。另取甲萘氢醌二磷酸酯钠对照品同法测定，按。另取甲萘氢醌二磷酸酯钠对照品同法测定，按计算含量，即得。计算含量，即得。18溶剂油溶剂油脂溶性药物脂溶性药物( (甾体激素等甾体激素等) )常配制成油溶液。常配制成油溶液。溶剂油对以水为溶剂的分析方法可产生影响：溶液溶剂油对以水为溶剂的分析方法可产生影响：溶液浑浊，影响浑浊，影响uvuv测定、容量滴定、测定、容量滴定、hplchplc测

16、定。测定。1 1、有机溶剂稀释法、有机溶剂稀释法药物标示量高，稀释倍数大或测定溶剂对油溶药物标示量高，稀释倍数大或测定溶剂对油溶解性好，溶剂油对测定无干扰。解性好，溶剂油对测定无干扰。19维生素维生素e注射液注射液 vitamin e injection 本品为维生素本品为维生素e的灭菌油溶液。的灭菌油溶液。【含量测定含量测定】 精密量取本品精密量取本品2ml，置棕色具塞锥形瓶中，照维置棕色具塞锥形瓶中，照维生素生素e项下的方法，精密加入项下的方法，精密加入内标溶液内标溶液50ml，密塞，密塞，摇匀，取摇匀，取13l注入气相色谱仪，并依法测定校正注入气相色谱仪，并依法测定校正因子，计算，即得。

17、因子，计算，即得。【规格规格】1ml 50mg202 2、溶剂提取、溶剂提取-hplc-hplc法法 例：丙酸睾酮注射液丙酸睾酮注射液 testosterone propionate injection本品为丙酸睾酮的灭菌油溶液。本品为丙酸睾酮的灭菌油溶液。 【含量测定含量测定】hplc法法测定法测定法 用用内容量移液管内容量移液管精密量取本品适量精密量取本品适量(约相当于丙酸睾约相当于丙酸睾酮酮50mg)，置，置50ml 量瓶中，用量瓶中，用乙醚乙醚分数次洗涤移液管内壁，分数次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加洗液并入量瓶中，加乙醚稀释乙醚稀释至刻度，摇匀；精密量取至刻度，摇匀；精密量取5m

18、l 置具塞离心管中，在温水浴内置具塞离心管中，在温水浴内使乙醚挥散使乙醚挥散；用；用甲醇甲醇振摇振摇提取提取4次次(5，5，5，3ml)，每次振摇每次振摇10分钟后分钟后离心离心15分钟，并用分钟，并用滴管将甲醇液移置滴管将甲醇液移置25ml 量瓶中，量瓶中，合并合并提取液，精密加入内提取液，精密加入内标溶液标溶液5ml,用甲醇稀释至刻度，摇匀，取用甲醇稀释至刻度，摇匀，取510l 注入液相注入液相色谱仪，色谱仪，测定测定，即得。，即得。21容量分析法：容量分析法：标示量标示量%=v t fv样样 标示量（标示量（g/ml) 100%紫外分光光度法：紫外分光光度法：标示量标示量%=a/ e 稀

19、释倍数稀释倍数100 标示量（标示量（g/ml) 100%注射剂含量测定结果计算注射剂含量测定结果计算22例：马来酸氯苯那敏注射液的含量测定例：马来酸氯苯那敏注射液的含量测定 精密量取本品精密量取本品2.5ml（标示量标示量1ml:10mg），），置置500ml量瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度；精量瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度；精密吸取密吸取25ml，置，置50ml量瓶中，加盐酸溶液稀量瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度。取稀释液在释至刻度。取稀释液在264nm处测得吸收度为处测得吸收度为0.536，按吸收系数，按吸收系数e1%1cm为为217，计算其百分计算其百分标示量。标示量。23复方制剂分析复方制剂分

20、析 assay of compound preparationso复方制剂的意义增强某些药物的作用某几种药物有协同作用降低某些成分的毒副作用o复方制剂分析的特点成分更复杂含量差异悬殊 24复方制剂的分类复方制剂的分类o各国药典收载的复方制剂复方解热镇痛类复方甾体激素类复方维生素类复方磺胺类25方法选择原则方法选择原则 o是否有特殊的、不受干扰的性质o由简到繁（不分离分离测定、同时分别测定）o先准确后快速o新药：hplc优先原则o医院制剂：uv优先原则26u复方磺胺甲噁唑片是由复方磺胺甲噁唑片是由磺胺甲噁唑（磺胺甲噁唑（smz）、）、甲氧苄啶（甲氧苄啶（tmp）两种有效成分组成。两种有效成分组成

21、。u处方：处方： 磺胺甲噁唑磺胺甲噁唑 400g 甲氧苄啶甲氧苄啶 80g 制成制成 1000片片uchp（2000版）版）: 双波长分光光度法双波长分光光度法uchp（2005、2010版）版）: 高效液相色谱法高效液相色谱法复方制剂分析示例复方制剂分析示例27 chpchp（20002000版）版）: : 双波长分光光度法双波长分光光度法原理：原理：u选择二个测定波长选择二个测定波长1 1 与与2 2 u干扰组分干扰组分a a在这两个波长处有等吸收在这两个波长处有等吸收u待测组分待测组分b b在这两个波长处有显著的在这两个波长处有显著的a aua a与与b b浓度成正比，与浓度成正比，与a

22、 a浓度无关浓度无关复方磺胺甲复方磺胺甲噁噁唑片的含量测定唑片的含量测定28测定测定smzsmz时，把时，把tmptmp作为干扰成分作为干扰成分smz smz max = 257 nmmax = 257 nmtmp atmp a257nm257nm = a = a304nm 304nm 测定测定tmp tmp 时，把时，把smzsmz作为干扰成分作为干扰成分tmp tmp = 239 nm = 239 nm （有较大紫外吸收）（有较大紫外吸收）smz asmz a239nm239nm = a = a295nm295nm29复方左炔诺孕酮片 o 本品每片中含左炔诺孕酮本品每片中含左炔诺孕酮(c2

23、1h28o2)应为应为0.1350.1725mg，含炔雌醇，含炔雌醇(c20h24o2)应为应为27.034.5g。o 【处方处方】左炔诺孕酮左炔诺孕酮150mg炔雌醇炔雌醇 30mg 制成制成1000片片o chp 2005年版年版分光光度法分光光度法o chp 2010年版年版-hplc法法30chp2005年版年版-分光光度法分光光度法o【含量测定含量测定】对照品溶液的制备对照品溶液的制备精密称取左炔诺孕酮对照品精密称取左炔诺孕酮对照品15mg，摇匀摇匀(每每1ml中含左炔诺孕酮中含左炔诺孕酮75g、炔雌醇、炔雌醇15g)。o 供试品溶液的制备供试品溶液的制备取本品取本品5片，置分液漏斗

24、中，加水片，置分液漏斗中，加水6ml，振摇使崩，振摇使崩解，用解，用氯仿振摇提取氯仿振摇提取56次，每次约次，每次约78ml，提取液经同一棉花滤入，提取液经同一棉花滤入50ml量瓶中量瓶中,加氯仿稀释至刻度加氯仿稀释至刻度,摇匀即得。摇匀即得。o左炔诺孕酮左炔诺孕酮精密量取供试品溶液精密量取供试品溶液10ml，置，置50ml具塞锥形瓶中，在水具塞锥形瓶中，在水浴上蒸干，精密加乙醇浴上蒸干，精密加乙醇5ml使溶解；另精密量取对照品溶液使溶解；另精密量取对照品溶液2ml，置另，置另一具塞锥形瓶中，加乙醇一具塞锥形瓶中，加乙醇3ml。在上述各锥形瓶中分别精密加。在上述各锥形瓶中分别精密加碱性三碱性三

25、硝基苯酚溶液硝基苯酚溶液4ml，密塞，在暗处放置，密塞，在暗处放置40分钟分钟,照分光光度法照分光光度法(附录附录 )，在，在490nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。的波长处分别测定吸收度，计算，即得。o炔雌醇炔雌醇 .同上，上述各锥形瓶置冰浴上冷却同上，上述各锥形瓶置冰浴上冷却30秒后，各精密加秒后，各精密加硫酸硫酸6ml，随加随振摇，加完继续冷却，随加随振摇，加完继续冷却30秒钟，取出秒钟，取出,在室温放置在室温放置20分钟，分钟，照分光光度法照分光光度法(附录附录),在在530nm波长处分别测定吸收度，计算，波长处分别测定吸收度，计算，即得。即得。 31chp2010年版hplc法o【含量测定含量测定】 照高效液相色谱法（附录照高效液相色谱法（附录 d）测定。）测定。o色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈剂；乙腈-水（水（60:40）为流动相；检测波长为）为流动相；检测波长为220nm。理论板。理论板数按左炔诺孕酮峰计算应不低于数按左炔诺孕酮峰计算应不低于5000，左炔诺孕酮峰与炔雌醇，左炔诺孕酮峰与炔雌醇峰的分离度应不小于峰的分离度应不小于2.5。o测定法测定法 取本品取本品10片，分别置片，分别置10ml量瓶中，量瓶中，加流动相适量，超加流动相适量，超声处