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文档简介

1、实验原理:实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色颜色反应。 向试管内注入向试管内注入2待测组织样液。待测组织样液。向试管内注入向试管内注入1斐林试剂(斐林试剂(甲乙液等量混甲乙液等量混合均匀后再注入合均匀后再注入)。)。将试管放入盛有将试管放入盛有5065温水的大烧杯中加热约温水的大烧杯中加热约2min。观察试管中出现的颜色变化。观察试管中出现的颜色变化。颜色变化颜色变化:蓝色沉淀蓝色沉淀(Cu(OH)2)棕色沉淀棕色沉淀砖红色沉淀砖红色沉淀(Cu2O)注意事项:注意事项:结论:可溶性还原糖与斐林试剂在水浴加热的过程中生结论:可溶性还原糖与斐林试剂在水浴加热的过程

2、中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。 斐林试剂要斐林试剂要现用现配现用现配,要将甲液和乙液混合均匀后再使用,并进行,要将甲液和乙液混合均匀后再使用,并进行水浴加热。水浴加热。 时间太长,时间太长,Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而无悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。法参与反应。 选材选材切片切片制片制片镜检镜检(选取切片、染色、去浮色、(选取切片、染色、去浮色、制临时装片)制临时装片)染色染色:滴:滴2-3滴滴苏丹苏丹,染色,染色3min;或苏丹或苏丹,染色染色1min。去浮色去浮色:滴:滴1-2滴滴50%的酒精溶

3、液的酒精溶液结论:圆形小颗粒呈橘黄色(或红色)结论:圆形小颗粒呈橘黄色(或红色)蛋白质蛋白质 + 双缩脲双缩脲紫色紫色鸡蛋清稀释液鸡蛋清稀释液向试管内注入向试管内注入2待测组织样液。待测组织样液。向试管内注入向试管内注入试剂试剂A液液1 ,摇匀。摇匀。(创设碱性环境)(创设碱性环境)向试管内注入向试管内注入试剂试剂B液液4滴,摇匀。滴,摇匀。 过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应,使溶液呈蓝反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。色,而掩盖生成的紫色。结论:结论:说明组织样液中存在蛋白质说明组织样液中存在蛋白质取材:马铃薯匀浆取材:马铃薯匀浆检测:检测:碘液碘液2滴滴

4、现象:现象: 摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色四种物质颜色反应的对比 还原糖还原糖蛋白质蛋白质淀粉淀粉脂肪脂肪有机物的检测有机物的检测材料材料试剂试剂颜色反应颜色反应可溶性还原可溶性还原糖糖苹果、梨苹果、梨斐林试剂斐林试剂(甲液、乙液等量混合)(甲液、乙液等量混合)蓝色蓝色棕色棕色砖红色沉砖红色沉淀淀脂肪脂肪花生花生苏丹苏丹橘黄色橘黄色苏丹苏丹红色红色蛋白质蛋白质豆浆、牛奶豆浆、牛奶双缩脲试剂双缩脲试剂(先(先A液后液后B液)液)紫色紫色淀粉淀粉面粉面粉碘液碘液蓝色蓝色斐林试剂与双缩脲试剂的比较:斐林试剂与双缩脲试剂的比较:A A液液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOHB B液液: :

5、0.010.01g/mLCuSOg/mLCuSO4 4甲液甲液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH乙液乙液: :0.050.05g/mLCuSOg/mLCuSO4 4紫色物质生成紫色物质生成砖红色沉淀砖红色沉淀先加先加A A液液,再加再加B B液液,不需不需加热加热甲液与乙液甲液与乙液先混再用先混再用,且,且现配现用现配现用,需,需加热加热蛋白质蛋白质还原性糖还原性糖试剂试剂组成组成检验检验结果结果试剂试剂用法用法检测检测对象对象双缩脲试剂双缩脲试剂斐林试剂斐林试剂总结:总结: 斐林试剂斐林试剂 水浴加热水浴加热(5065) 还原糖还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)(葡萄糖、果糖、麦芽

6、糖)生产砖红色沉淀生产砖红色沉淀脂肪脂肪颗粒颗粒苏丹苏丹显微镜观察显微镜观察橘黄色的脂肪颗粒橘黄色的脂肪颗粒脂肪脂肪颗粒颗粒苏丹苏丹显微镜观察显微镜观察红色的脂肪颗粒红色的脂肪颗粒蛋白质蛋白质加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂1、2、3、产生紫色反应产生紫色反应4、斐林试剂与双缩脲试剂的用法比较、斐林试剂与双缩脲试剂的用法比较1、青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂、青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀,下列结论中最合理的是作用产生砖红色沉淀,下列结论中最合理的是 ( ) A青苹果汁中有淀粉,不含还原糖青苹果汁中有淀粉,不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉 C苹果转熟时,大量淀粉水解成还原糖苹果转熟时,大量淀粉水解成还原糖 D苹果转熟时单糖聚合成淀粉苹果转熟时单糖聚合成淀粉 Cl小试牛刀小试牛刀2、(2005.广东广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是( )A、可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生、可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀砖红色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要

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