琼脂糖凝胶电泳原理步骤详细PPT课件

1、讲课内容讲课内容 概述概述 1 琼脂糖凝胶的特点琼脂糖凝胶的特点 2 琼脂糖凝胶电泳的应用琼脂糖凝胶电泳的应用 3 影响迁移率的因素影响迁移率的因素 4 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白 5第1页/共42页第2页/共42页天然琼脂（agar）:又名琼胶、菜燕、冻粉 从石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状高聚物。琼脂糖（agarose）琼脂果胶（agaropectin） Acid sulfateCarboxylic acid groups第3页/共42页琼脂糖（琼脂糖（AgaroseAgarose） 半乳糖及其衍生物构成的中性物质半乳糖及其衍生物构成的中性物质第4页/

2、共42页第5页/共42页讲课内容讲课内容 概述概述 1 琼脂糖凝胶的特点琼脂糖凝胶的特点 2 琼脂糖凝胶电泳的应用琼脂糖凝胶电泳的应用 3 影响迁移率的因素影响迁移率的因素 4 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白 5第6页/共42页第7页/共42页第8页/共42页讲课内容讲课内容 概述概述 1 琼脂糖凝胶的特点琼脂糖凝胶的特点 2 琼脂糖凝胶电泳的应用琼脂糖凝胶电泳的应用 3 影响迁移率的因素影响迁移率的因素 4 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白 5第9页/共42页第10页/共42页第11页/共42页第12页/共42页第13页/共42页讲课内容讲课

3、内容 概述概述 1 琼脂糖凝胶的特点琼脂糖凝胶的特点 2 琼脂糖凝胶电泳的应用琼脂糖凝胶电泳的应用 3 影响迁移率的因素影响迁移率的因素 4 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白 5第14页/共42页影响迁移率的因素影响迁移率的因素Factors affecting migration Factors affecting migration the size of the moleculethe size of the molecule conformation of the molecule conformation of the molecule the agarose

4、 concentration of a gelthe agarose concentration of a gel VoltageVoltage第15页/共42页Percent agarose and resolution limits Percent agarose and resolution limits 第16页/共42页讲课内容讲课内容 概述概述 1 琼脂糖凝胶的特点琼脂糖凝胶的特点 2 琼脂糖凝胶电泳的应用琼脂糖凝胶电泳的应用 3 影响迁移率的因素影响迁移率的因素 4 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白 5第17页/共42页 原理（原理（ PrincipleP

5、rinciple） 血清脂蛋白经饱和苏丹黑血清脂蛋白经饱和苏丹黑B B预染后，以琼预染后，以琼脂糖凝胶为支持介质，在脂糖凝胶为支持介质，在pH8.6pH8.6巴比妥缓冲巴比妥缓冲液中电泳，根据各脂蛋白的组成、大小、形液中电泳，根据各脂蛋白的组成、大小、形状分离成不同区带。状分离成不同区带。 第18页/共42页第19页/共42页第20页/共42页第21页/共42页第22页/共42页第23页/共42页第24页/共42页第25页/共42页第26页/共42页 第27页/共42页临床应用：高脂蛋白血症的分型临床应用：高脂蛋白血症的分型 CM CM 前前 正常正常型型a a型型b b型型型型型型型型第28页/共42页操操 作作第29页/共42页玻璃片第30页/共42页第31页/共42页第32页/共42页第33页/共42页第34页/共42页第35页/共42页第36页/共42页第37页/共42页 CM第38页/共42页 正常参考值（百分比）正常参考值（百分比） -脂蛋白脂蛋白 30-40% 30-4