六味地黄丸残留检验方法和擦拭取样验证方案DOC

1、六味地黄丸残留检验方法及擦拭取样验证方案验证对象六味地黄丸文件编号JB-YZ-Q-Q-002-D编制人编制日期年 月 日复制份数审核人审核日期年 月 日颁发部门质量管理部批准人批准日期年 月 日生效日期年 月 日颁发部门质量管理部、质检科、质保科、生产科、设备部、前处理提取车间、综合制剂车间编订依据药品生产质量管理规范2010年版、药品生产验证指南17六味地黄丸残留检验方法验证方案目录项目页次1、概述 32、目的33、适用范围 34、验证小组成员、职责 35、验证所需要的仪器 36、验证项目及可接受的标准 47、验证方法58、偏差处理59、变更控制610、再验证周期6六味地黄丸残留（丹皮酚）检

2、验方法验证方案1、概述：根据药品生产质量管理规范（2010年修订）进行验证，以验证所采用方 法的适用性。GM嘤求，为评价药材灭菌、粉碎、混合系统清洁规程的效果，在每次更 换品种或连续生产一定周期后，要认真按清洁规程对厂房、设备、容器具、工器具进行 清洁。设备清洁在制药生产中有特殊地位，生产设备的清洗是指从设备表面去除可见及 不可见物质的过程。这些物质包括原辅料、清洁剂、环境污染物质、冲洗水残留物及设 备运行过程中释放的物质。为正确评估清洁规程的效果，需定期对直接接触药品的设备 进行清洁验证。2、目的验证该检测方法是否适用于本公司生产的六味地黄丸的残留检验，现对分析方法进行验证，确保检验结果的准

3、确可靠。3、验证范围六味地黄丸残留含量（丹皮酚）测定法4、验证小组成员、职责所在部门姓名生产副总生产部质量管理部质检科质保科设备部4.1 验证小组组长负责验证方案的起草。组织验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。4.2 设备部负责组织试验所需仪器、设备的验证。负责仪器、仪表、量具等的校正。负责设备的维护保养。负责设备的操作。4.3 质量部负责取样及提供验证所需检测数据o负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进行分析验证过程监督检查确保结果可靠性负责验证方案的批准和验证报告的批准4.4生产部负责验证方案制定和实施。总结验证记录5、验证所需要的仪器仪器名称规格型号检定日期有效期至图

4、效液相色谱仪电子天平超声波6、验证项目及可接受的标准：验证项目验证内容接受标准含量测定准确度回收率 98.0-102.0%重复性（n>6）RSDK 2.0%专属性应符合规定定量限方10倍信噪比线性范围80%-120%, r 应5 0.9997、验证方法：7.1、 验证材料7.1.1 对照品品名存放地点纯度丹皮酚对照品质检科100%7.1.2试药品名存放地点纯度甲醇质检科色谱纯7.1.3器具品名存放地点规格容量瓶质检科50mk 100ml、250ml单标线吸管质检科10ml> 15ml> 20ml、25ml、50ml量筒质检科50ml > 100ml7.2、残留含量测定验

5、证7.1.2 准确度照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（70:30）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 3500。对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 ml含20仙g 的溶液，即得。供试品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品，加甲醇分别制成残留浓度80%, 100%, 120%的三个浓度的样品，滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10仙1,注入液相色谱仪，测定， 即得。验证标准：按以上方法操作，由检验人员对三个样品检验

6、各测定3次，回收率应为98.0%-102.0%7.1.3 重复性照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（70:30）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 3500。对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 ml含20仙g 的溶液，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液10小，注入液相色谱仪，测定，即得。验证标准：按以上方法操作，由检验人员对样品进样 6次，且检验结果的峰面积相 对偏差不得果2.0%。7.1.4 专属性照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部

7、附录VI D）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（70:30）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 3500。对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 ml含20仙g 的溶液，即得。空白溶液的制备：取甲醇滤过，取续滤液，即得。供试品溶液的制备 取残留浓度100%的样品滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液与空白溶液各 10口，注入液相色 谱仪，测定，即得。验证标准：按以上方法操作，由检验人员分别独立对样品检验，供试品溶液中应呈 现与对照品保留相同的色谱峰，空白溶液中在这点应无色谱峰

8、。7.1.5 专属性照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（70:30）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 3500。对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 ml含20仙g 的溶液，即得。测定法 精密吸取对照品溶液10口，注入液相色谱仪，记录色谱图。在色谱图中 待基线平稳后，选取12分钟的平稳基线求得信噪比值及对照品溶液丹皮酚峰计算信噪 比，并比较丹皮酚信噪比与基线信噪比，根据比值对样品进行稀释以求的定量限。确认标准：按以上方法操作，由检验人员独立测定

9、，以对照品溶液浓度信噪比方10倍的基线信噪比的浓度为定量限浓度。7.1.6 线性范围照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（70:30）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 3500。标准曲线的制备 在标示含量80%-120%的范围内，分别精密吸取对照品溶液4口、6仙1、8膜、10仙l、12口注入液相色谱仪，各浓度连续进样一次，测定，即得。确认标准：以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，线性相关系数 0.9998、偏差处理验证方案的执行过程中出现的异常情况或偏差应进行记

10、录。按偏差处理规程进行管理9、变更控制在实施验证过程中，如需对验证方案进行补充和修改，可起草并经批准一个补充性验证 方案，而不必将整个验证方案重新改写。在充性验证方案中，应说明修改或补充验证的 具体内容和理由，并由验证小组讨论、审核、经质量负责人批准后生效。10、再验证周期10.1、 当处方、工艺等变更时，需要对本方案进行调整后做方法再验证。10.2、 当国家相关标准改变原分析方法后需要对本方法重新进行再验证。文件、仪器、人员培训验证记录文件确认记录在舁 厅P文件名称文件编号存放地点验证人/时间1K昧地史丸质重标准2六味地黄丸检验操作规程3六味地黄丸擦拭取样及残 留检验方法验证方案偏差记录：仪

11、器确认记录仪器名称规格型号检定日期有效期至验证人/时间图效液相色谱仪电子天平三、验证实施人员培训记录在舁 厅P文件名称文件编号培训地点培训人/时间1K昧地史丸质重标准2六味地黄丸检验操作规程3六味地黄丸擦拭取样及残 留检验方法验证方案偏差记录：4、结论:确认人:日期：六味地黄丸残留检验方法验证记录1、验证依据六味地黄丸残留（丹皮酚）检验方法验证方案2、验证品种名称：丹皮酚对照品批号:3、验证记录3.1、 验证材料验证3.1.1 确认以下仪器设备是否齐备。仪器名称规格型号确认结果图效液相色谱仪电子天平超声波确认人：日期:3.1.2确认容量器具。品名规格校验期生产商容量瓶50ml100ml250m

12、l单标线吸管10ml15ml20ml25ml50ml量筒50ml100ml确认人：日期:3.1.3 确认以下试剂品名纯度批号后效期生产商甲醇色谱纯确认人：日期:3.1.4 确认以下对照品。品名纯度批号后效期生产商丹皮酚对照品含量确认人：日期:3.2、 验证方法3.2.1 残留含量检验方法验证3.2.1.1 准确度浓度实测浓度平均值回收率检验人检验日期复核人复核日期3.2.2.2重复性次数123456峰面积RSD%检验人复核人检验日期复核日期3.2.2.3专属性溶液检验结果检验人检验日期复核人复核日期供试品溶液对照品溶液空白溶液3.2.2.4定量限对照品溶液浓度（ug/ml）信噪比检验人：检验日

13、期：复核人：复核日期：3.2.2.5线性范围进样量口4口618小10口12仙1峰面积回归方程相关系数检验人：检验日期：复核人：复核日期：4、验证结论:分析人:六味地黄丸擦拭取样方法验证方案目录项目页次1、概述 122、目的123、适用范围124、验证小组成员、职责 125、验证所需要的仪器136、验证步骤137、验证合格标准 148、偏差处理149、变更控制1410、再验证周期14六味地黄丸擦拭取样方法验证方案1、概述：该验证是针对六味地黄丸生产设备和环境清洁验证所需的擦拭取样方法的验 证，是对棉签、溶剂的选择、取样人员的操作、残留溶剂转移到棉签、溶出过程的全面 考察，是对取样过程的验证。2、

14、目的通过回收率试验验证擦拭取样过程的回收率和重现性，以与检验方法验证结合起来,以对设备的清洁提供科学的评价。3、验证范围设备和环境清洁验证所需的擦拭取样方法4、验证小组成员、职责所在部门姓名生产副总生产部质量管理部质检科质保科设备部4.1 验证小组组长负责验证方案的起草。组织验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。4.2 设备部负责组织试验所需仪器、设备的验证。负责仪器、仪表、量具等的校正。负责设备的维护保养。负责设备的操作。4.3 质量部负责取样及提供验证所需检测数据。负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进行分析验证过程监督检查确保结果可靠性负责验证方案的批准和验证报告的批准

15、4.4 生产部负责验证方案制定和实施总结验证记录5、验证所需要的仪器仪器名称规格型号检定日期有效期至图效液相色谱仪电子天平超声波6、验证步骤：6.1、验证用品：(1)拭子：尼龙或塑料棒棉签，在使用前置纯化水(每一个棉签头约消耗纯化水5ml)内，超声处理10min。(2)平整光洁的500 mmx 500 mm不锈钢板三块；用钢锥划出 400 mmX400 mm的区域，每隔100 mm划线，形成16块100 mmx 100 mm的方块。(3)含丹皮酚浓度0.02%的甲醇溶液(4)容积为20ml或30ml的玻璃喷雾器(5)电吹风(6)具塞试管。(7)纯化水：取样溶剂。6.2验证过程6.2.1 棉签法

16、回收率的测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定。6.2.1.1 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇水(70: 30)为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 3500。6.2.1.2 供试品溶液的制备 精密移取65U10.02%丹皮酚溶液至棉签上，将棉签头剪下， 置已放有甲醇10ml的具塞试管中，先震荡1min,冉超声处理10min,取溶液作为供试 液，平行做3个样品。6.2.1.3 对照品溶液的制备取丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 ml含20g的溶液,即得。6.2.1.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液

17、与供试品溶液各 10仙l,注入液相色谱仪， 记录色谱图。按外标法以峰面积计算，即得丹皮酚含量。6.2.1.5 验证标准：计算各测定结果的回收率、回收率的RSD及平均回收率。平均回收率不得低于55.0%, RSD不得大于10%6.2.2 取样前准备6.2.2.1 精密量取10ml含丹皮酚浓度0.02%的溶液，装入喷雾瓶。6.2.2.2 将喷雾瓶内溶液尽量均匀地喷在 400 mmX 400 mm的区域内。6.2.2.3 根据实际喷出的溶液量计算单位面积的物质量（约1 pg/cm2）6.2.2.4 自然干燥或用电吹风温和地吹干板材。6.2.3 取样6.2.3.1 用纯化水润湿棉签，并将其靠在溶剂瓶上

18、以除去多余的溶剂。6.2.3.2 将棉签头按在取样表面上，用力使其弯曲，平稳而缓慢的擦拭取样表面。在向 前移动的同时将其从一边移动到另一边。擦拭过程应覆盖整个表面。翻转棉签，让棉签 的另一面也进行擦拭。但与前次擦拭移动的方向垂直见 .6.2.3.3 每擦拭一个方块（100cm2）换一根棉签。擦拭完成后，剪下棉签头，置已放有 甲醇10ml的试管，并用塞密封。6.2.3.4 将擦拭后的棉签头分别放入已加入甲醇的具塞试管中，加塞。6.2.3.5 取样完成后在试管上贴上标签，注明品名、编号、取样时间、取样目的及取样 员等有关取样信息后送至质检科。6.2.4 检验用经验证的检验方法检验，计算擦拭取样的回

19、收率以及回收率的RSD7、验证合格标准包括取样回收率和棉签法回收率在内的综合回收率不低于55.0%,多次取样回收率的RSD不得大于20%8、偏差处理验证方案的执行过程中出现的异常情况或偏差应进行记录。按偏差处理规程进行管理9、变更控制在实施验证过程中，如需对验证方案进行补充和修改，可起草并经批准一个补充性验证 方案，而不必将整个验证方案重新改写。在充性验证方案中，应说明修改或补充验证的 具体内容和理由，并由验证小组讨论、审核、经质量负责人批准后生效。10、再验证周期10.1、 当处方、工艺等变更时，需要对本方案进行调整后做方法再验证。10.2、 当国家相关标准改变原分析方法后需要对本方法重新进

20、行再验证。文件、仪器、人员培训验证记录文件确认记录在舁 厅P文件名称文件编号存放地点验证人/时间1K昧地史丸质重标准2六味地黄丸检验操作规程3六味地黄丸擦拭取样及残 留检验方法验证方案偏差记录：四、仪器确认记录仪器名称规格型号检定日期有效期至验证人/时间图效液相色谱仪电子天平三、验证实施人员培训记录在舁 厅P文件名称文件编号培训地点培训人/时间1K昧地史丸质重标准2六味地黄丸检验操作规程3六味地黄丸擦拭取样及残 留检验方法验证方案偏差记录：4、结论:确认人:日期：六味地黄丸擦拭取样方法验证记录1、验证依据六味地黄丸擦拭取样方法验证方案2、验证记录2.1 、验证用品确认以下材料是否齐备。仪器名称标准实际情况棉签尼龙或塑料棒棉签，在使用前置纯化水（每一个棉签头约消耗纯化水 5ml） 内，超声处理10min。再置纯化水（每 一个棉签头约消耗纯化水 5ml）内， 超声处理10min。板材平整光洁的500 mmx 500 mm不锈钢 板三块；用钢锥划出400 mmx 400 mm 的区域