脑外科刘教授11月14日2改1PPT课件

1、约10%轻度损伤患者和66-100%中、重度损伤患者遗留有永久的神经功能障碍第1页/共49页第2页/共49页自我更新自我更新多向分化多向分化可塑性可塑性迁移性迁移性bFGF、EGFBDNF、NT-3第3页/共49页干细胞治疗中枢神经系统损伤 替代治疗：移植外源性干细胞 补充治疗：激活内源性干细胞 第4页/共49页一、外源性性干细胞的 实验研究第5页/共49页胚胎干细胞(ESC)神经干细胞(NSC)神经元(Neuron)第6页/共49页ESC分离培养分离培养ESC诱导分化诱导分化ESC的实验研究第7页/共49页NSC的实验研究NestinGABANSC诱导分化NSC分离培养第8页/共49页 葡萄

2、糖对神经干细胞增殖分化的影响 对神经干细胞凋亡的影响干细胞微环境变化第9页/共49页存在问题存在问题1干细胞来源干细胞来源2致瘤性致瘤性3伦理问题伦理问题第10页/共49页二、 内源性性干细胞的 实验研究第11页/共49页来源可靠稳定无伦理问题无免疫排斥反应无致瘤性一一二二三三四四第12页/共49页碱性成纤维细胞生长因子促进血管形成促进修复再生促进神经元的功能恢复生物活性较强的促分裂原第13页/共49页40g40g重的铁质圆柱体自重的铁质圆柱体自25cm25cm高处自由落体撞击高处自由落体撞击左侧顶骨咬除左侧顶骨咬除5.0mm5.0mm5.0mm ,5.0mm ,显露硬脑膜显露硬脑膜第14页/

3、共49页第15页/共49页4A：对照组 (DAB染色，100)4B：对照组 (DAB染色，400 )4C：治疗组 (DAB染色，100)4D：治疗组 (DAB染色，400) 损伤侧海马组织中BrdU阳性细胞BrdU-positive cells at the DG of the hippocampus on the damage side第16页/共49页侧脑室室管膜下区(SVZ)海马齿状回颗粒细胞下层（DG/SGZ）第17页/共49页取材方便取材方便纯度高纯度高间充质干细胞无损害无损害无伦理学限制无伦理学限制无免疫排斥无免疫排斥生物特性好生物特性好第18页/共49页脐带间充质干细胞(UMSC

4、)骨髓间充质干细胞(BMSC)第19页/共49页Endogenous FactorsExogenous Factors第20页/共49页体外研究体外研究BMSCCD105NestinNSENSCneurons第21页/共49页+动物实验第22页/共49页BrdU(Ipsilateral cerebral cortex, Week 1, 100)BrdU(Ipsilateral cerebral cortex，Week 2 , 100)BrdU(Ipsilateral cerebral cortex, Week 3, 100)BrdU(Ipsilateral cerebral cortex，We

5、ek 4 , 100)第23页/共49页BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 2, 100)BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 4, 400)BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 3, 400)BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 2, 400)第24页/共49页BrdUBrdUGFAPNeuNMergeMerge第25页/共49页GFAP(Ipsilateral cerebral cortex)NeuN(Ipsilateral hippocampus )Ipsilater

6、al cerebral cortexIpsilateral hippocampusNeun/-actinNeun/-actin00.10.20.30.40.50.6Week 1Week 2Week 3Week 4BMSCsBMSCs+NGF00.10.20.30.40.50.60.70.8Week 1Week 2Week 3Week 4BMSCsBMSCs+NGF第26页/共49页Horizontal motionVertical motionTiltboard timeBeam-walking第27页/共49页Behavior ScalesA：BMSCs+NGF B：BMSCs C：Inju

7、ry control D：Blank Control BMSCs+NGFgroupBMSCSgroupInjury controlBlankcontrolTime factor Inter-class factorF FHorizontal motion 39.510.47 18.450.47 8.550.49 103.630.471798.678039.39 Vertical motion 9.890.18 5.250.18 2.210.19 21.800.18263.251938.69 Tiltboard time9.290.15 6.020.15 2.440.16 25.370.1535

8、6.034328.71 Beam-walking19.810.14 24.640.13 25.070.14 3.670.14435.335232.33 Comparison between groups(P)A vs. BA vs. CA vs. DB vs. CB vs. DC vs. DHorizontal motion0.0010.0010.0010.0010.0010.001Vertical motion0.0010.0010.0010.0010.0010.001Tiltboard time0.0010.0010.0010.0010.0010.001Beam-walking0.0010

9、.0010.0010.0010.0010.001第28页/共49页三、 临床实验研究第29页/共49页Progress South Korea2005 Chile2007Pro-Cardiaco Hospital Brazil2006Montreal, CA- Israel2008Boston,USA- Greece2009第30页/共49页Coma duration 23m Cause traffic accidentDiagnosisvegetable第31页/共49页HBMSCs(P1)HBMSCs(P3)CD34CD105第32页/共49页NeuNGFAPDay 2Day 8第33页/

10、共49页BMSC临床实验临床实验自体自体BMSC体外扩增体外扩增BMSC移植移植BMSC移植移植第34页/共49页美国多学科PVS研究组提出的“植物状态”(1994)评分参考评分参考脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准(1995) 神经功能缺失的临床评估 第35页/共49页影像学检查影像学检查效果评估效果评估神经电生理神经电生理学检查学检查功能学评价功能学评价第36页/共49页移植前（移植前（2008/07/01）第37页/共49页移植后（移植后（2008/09/08）第38页/共49页移植后（移植后（2009/03/03）第39页/共49页u干细胞与周围组织建立了突触联系u干细胞分泌各种营

11、养因子可能的机理？第40页/共49页存在问题老年人的骨髓脂肪化-来源少成年人骨髓干细胞-活性差急性颅脑损伤病人-周期长第41页/共49页 数量丰富，易于采集 基因稳定，安全可靠 免疫性低，免疫调节 发育更早，环境单纯 修复损伤，重建功能UMSC的特点的特点第42页/共49页强强联合 温总理强调：“北科从事的干细胞研究是生物科技的最前沿,是最有希望超越西方发达国家的领域。正如你们所期盼的，让一个国家、一个民族在一个大的科学领域领先世界！”第43页/共49页 UMSC移植方案移植方案选择病例（签署知情同意书）选择病例（签署知情同意书）完善相关检查完善相关检查脐带间充质干细胞分离提纯培养制备鉴定脐带间充质干细胞分离提纯培养制备鉴定 每周1次，共4次脐带间充质干细胞治疗。第1次：静脉 2107 （30mL）;第2次：鞘内 2107 （1mL）;第3次：鞘内 21