尘肺患者血清肿瘤坏死因子、白细胞介素6表达水平及意义

1、文章编号：2095 -2619(2012)03 -0245 -03【研究与实践】尘肺患者血清肿瘤坏死因子、白细胞介素-6表达水平及意义expression and significance of serum tnf-a and il6 in pneumoconiosis patients李娟，郝小惠，范雪云，刘亚楠li juan, hao xiao-hui, fan xue-yun, liu ya-nan摘要：目的探讨肿瘤坏死因子(tnfp)和白细胞介素不(il()在尘肺患者不同阶段、不同类型血清中的表达水平 及其意义。方法 对70例尘肺患者，其中矽脯42例、煤工尘肺28例，壹期病例46例、貳

2、期病例17例，塞期病例7例，以 及40例同期健康检查者，抽取空腹静脉血5 ml,采用晦联免疫吸附测定(eusa)法进行血清tnf-a和il£检测。结果 尘肺组血漬tnfa水平(22.31 ±5. 35)ng/l低于对照组(45. 63 ± 8. 32)ng/l,崔异有统计学意义(p<0. 05) ； il-6水 平(18. 78±2.46)ng/l高于对照组(10. 74 ±3. 71差异有统计学意义(p<0.05)。矽肺组和煤工尘肺组中随着期别的升高，血清tnf-a水平反而降低(pvo.05)；而其血清il-6水平升高(p<

3、0.05)o结论 tnf-a和il4表达水平对 于尘肺病的病情进展以及疗效現察分析有重要的意义，为尘肺病的预警和健康监护提供有意义的生物学指标。关键词：尘肺；肿瘤坏死因子；白细胞介素(中图分类号:r135.2文献标识码：b粉尘致肺组织纤维化涉及多种细胞和多种生物活性物质 参与的炎症、免疫反应、细胞毒作用、组织修复等，随着其机制 研究的深入,人们逐渐把研究重点从病变组织细胞成分的变化 转移到细胞因子。其中肿瘤坏死因子(tnfa)被大多数学者 公认为是肺纤维化形成与发展的关键性毒细胞因子。大赧 tnf-a的存在，一方面加殖炎症反应，另一方面促进成纤维细 胞增殖并分泌大盘胶原o白细胞介素4(il4)

4、是一种具有广 泛生物活性的多功能细胞因子，可作用于多种靶细胞而参与免 疫和炎症过程。冇报道，肺泡巨噬细胞在体内被激活后，可通 过释放il-6.tnf-a参与早期肺泡炎和后期肺纤维化。因此 本文对尘肺患者血淸中tnf-a和il-6的表达水平进行了测定 和分析，以探讨细胞因子在尘肺病发生发展中的意义。1对象和方法11对象本次研究是在对唐山钢铁集团公司某耐火材料厂 575名粉尘作业工人和开滦(集团)有限责任公司下属某煤矿 800名接尘工人进行健康检査基础上,详细核实每名工人的职 业史，调査其接尘性质及累积接尘工龄，全部拍摄后前位胸大 片，由尘肺诊断组按gbz 70-2009尘肺病诊断标准作出尘 肺诊

5、断。以确诊的尘肺患者为研究对象。本研究选择汉族的 男性70例尘肺患者为尘肺组，其中矽肺42例，言期矽肺病例 29例，贰期病例29例，盘期病例4例;煤工尘肺28例，其中壹 期煤工尘肺为17例，贰期病例8例，垒期病例3例；年龄 (55. 9 ±9.4)岁，发病年龄(51.4± & 2)岁，发病工龄3-46年。 另选40例同期健康检査者为对照组，与尘肺组同性别、同民 族、开始接尘时间及累积接尘工龄相差不超过2年、在同一车 间或同一采掘工作面工作的非尘肺接尘工人，年龄(55.6 ±基金项目：唐山市科技局资助项目(10140201aj1)作者单位:河北联合大学基础医

6、学院，河北wljl 063000作者简介：李娟(1978-),女，医学硕士，讲帅，主耍从事医学免疫学 教学工作9. 4)岁，既往无疾病史的健康者。1.2主要试剂和方法 tnf-a和ill水平检测试剂盒(深圳 晶美生物工程有限公司)。现场采集所有对象空腹静脉血5 ml,用质傲分数为2%的乙二胺四乙酸(edta)抗凝。在实验室 静置30 min后，用3 000 r/min离心(离心半径13. 5 cm) 10 min 分离血清,分装于eppendorf管中密封，置70%保存待用。待 标本集中后严格按说明书规程操作，采用酶联免疫吸附测定 (eusa)法统一检测tnf-a和il-6水平。13统计学分析

7、 采用spss 11.5统计软件进行数据分析，计 员资料采用阿样本均数f检验和单因素方差分析；多分类有序 及无序资料采用行x列表/检验或尸沏协.确切概率法;检验水 准为双侧a=0. 05,p <0. 05为差异有统计学意义。2结果21基本情况由于生产性粉尘对不同年龄的劳动者有看不 同的危害，调査显示，矿工初次接尘年龄的大小与煤工尘肺的 发生率和发病工龄的长短有密切关系。本研究为了控制年龄 的影响，对2组的年龄分布进行了比较，差异无统计学意义 (p>0.05)。2.2尘肺组和对照组吸烟情况吸烟是呼吸系统疾病的重要 危险因素之一，有研究表明吸烟的二氧化硅(si。?)粉尘作业工 人想矽肺

8、的危险性明显升高。笔者对研究对象的吸烟情况 进行了比较，按照世界卫生组织(who)标准，以每天吸烟1支 以上，持续吸烟1年以上者定义为吸烟。吸烟情况用吸烟指数 表示，吸烟指数=日平均吸烟支数x吸烟年数/开始吸烟年龄, 经比较2组的吸烟率及吸烟指数差异均无统计学意义(p> 0. 05),见表 1。2.3 尘肺各组与对照组血清中tnf-a和il4水平比校 由表 2可见，尘肺组血清tnf-a水平低于对照组，差异有统计学意 义(p<0. 05)；由于粉尘类型不同致纤维化的能力不同，笔者分 别对矽肺组和煤工尘肺组tnf-a及il-6水平进行比较，结果发 现:矽肺组血清tnf-a水平低于煤工尘

9、肺组，建异有统计学意 义(pvo. 05)；矽肺组血清1l4水平高于煤工尘肺组，差异有 统计学意义(pvo. 05)。表1 尘肺组和对照组吸烟情况比较组别例数吸烟情况吸烟指数例数m025(?75尘肺组704564.37018对照组402562.56017x2/u 值%2 =0.166=049p值>0.05>0.05注:m代表中位数;025代表第一四分位数;<?7s代表第三四分位数。表2 尘肺各组与对照组血清tnf-a和il-6 水平比校 (x ±s,ng/l)组别例数tnf-a尘肺组7022.31 ±5.35°18.78 ±2.46&#

10、176;矽肺组4220.01 ±6.532)20.41 ±2.812)煤工尘肺组2826.32 ±7.65°17.31 ±3.93°对照组4045.63 ±8.3210.74 ±3.71p值0.0000.003与对照组比较*<0 05t2)p<0.01o2.4 不同期别尘肺组与对照组血清tnf-a和il-6水平比较 由表3可见，煤工尘肺组和矽肺组血清tnf-a水平随着期别的 升高而降低,11"水平随着期别的升高而升高，与对照组比较 差异均有统计学意义(p <0. 01)。表3 不同期别尘

11、肺组与对照组血清tnf-a和il-6 水平比校(丘土s,ng/l)ffi别例数tnfpil-6矽肺组42賣期2922.36 ±4.45°17.21 ±2.32°试期917.36 ±3.87,)j>20.46 ±2.98,3)卷期413.87 ±4.032),>25.63 ±3.152),)煤工尘肺组28老期1726. 12 ±4. 19°12.21 ±2.72°貳期819.78±2.98,)3)17.57 ±2.12,)3)期315.41 &#

12、177;3.872>,)22.23 ±3.062>,)对照组4045.63 ±8.3210.74 ±3.71与对照姐比校，八pv0.05, 2)p<0.01；与同组壹期比较，3)p< 0.05。3讨论尘肺病址生产性粉尘引屈的最严巫的职业病是由于在生 产过程中长期吸入粉尘并在肺内潴留而引起的以肺部组织弥 漫性纤维化为主的全身性疾病。尘肺病到冃前为止没有特效 的治疗方法,肺泡灌洗术等治疗方法也只能延缓疾病的进展速 度。因此，尘肺的发病机制仍然是当今研究的热点ctnf-a和il-6在尘肺病中的主要作用足诱导炎症细胞的 吸附，参与其他细胞因子的调节

13、，促炎症反应、胶原蛋白沉积和 促成纤维细胞堆殖。冇研究报道，肺部炎症反应是尘肺病发生 发展的早期事件,tne-a是激活的巨噬细胞释放的一种前炎性 介质，该因子在尘肺早期炎症反应和械终尘肺纤维化发生过程 中起着重要的作用o本研究结果表明,tnf-a在尘肺患者血 清中的水平低于对照组r差异具冇统计学意义，说明在患者 肺纤维化过程中,tnf-a起曽较重要的作用。有研究发现si。? 冇较强的致纤维化作用,矽尘中sio2颗粒慢性持续对巨噬细胞 产生毒性作用，促进巨噬细胞持续释放炎性细胞因子刺激成 纤维细胞增殖和促进胶原纤维合成产生纤维化。据此，对尘 肺组分类分析发现:矽肺组和煤工尘肺组间2种因子水平差异

14、 有统计学盘义(pvo. 05)。而矽肺和煤工尘肺组均随着期别的 增加,tnf-a水平逐渐降低。李庆等提出，随着尘肺期别的 上升,tnfa水平逐渐下降;邢景才等提示tnf-a水平变化 与煤工尘肺病变严重性之间呈负相关，这些均与本研究结果一 致。但也有研究报道，给小鼠气件性注人石英粉尘后.tnf-a mrna水平明显增高。本研究结果显示：ild在尘肺患者血 清中的水半岛于对照组，并在矽肺和煤工尘肺中随期別增加苴 水平逐渐升高。对此，笔者认为，尘肺匸人一般是在无机粉尘 的长期剌激卜一，引起肺泡巨噬细胞凋亡，导致tnf-a分泌逐渐 减少,tnf-a是由thl细胞分泌的，ii"是由th2细胞

15、分泌的， 患者体内thl型细胞因子产生较少，而th2型细胞因子产生较 多，从而导致thl/th2免疫失衡，尘肺患者屮呈现出明显的th2 优势。免疫功能不断下降，导致尘肺患者并发肺结核、癌症等。 有研究表明，11"可能减缓肺纤维化过程的纤维母细胞凋亡. 从而促进肺纤维化发展，实验证实,tnf-a不仅能直接刺激培 养的成纤维细胞增殖，还能诱导矽肺患者肺成纤维细胞释放 ii",而tnf-a jl-6又具有协同作用共同促进肺纤维化。综上所述，工人在接触粉尘早期,机体对sio2刺激敏感而发 生强烈的应激反应,肺泡巨噬细胞、内皮细胞、成纤维细胞持续、 过度激活,分泌大量的细胞因子tnf

16、a和il-6等,造成肺组织损 伤和纤维化的发生;随着接尘时间的延长，机体可能对粉尘产生 耐受，产生细胞因子的细胞活力降低，在这个过程中刺激降低机 体受损，免疫应答失衡,免疫功能进一步下降，提示尘肺免疫损 伤的原因可能为tnf-a和il-6体内免疫调廿紊乱所致。參考文献：1辖春梅，王茂义，4翠徃.尘肺易感性相关宰冈研究现况j j .中国 职业医学.2010,37(4):331 -334.：2 sco1ton c jtchambers r c. molecular targets in pulnumary fibrosis :the myofibroblast in focus j. (hirst

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18、200(),44( i ) ：3 - 145 albrecht ctschins r pjiohr d.cl al. innamniatory time course after quartz instillation ： n)le of tumor necrosis factor-alpha and particle surfaccfj. am j rcbpir cell mol biol°2004.31 (2) ：292 3016 丁焕然，吗小兵，戴丽霁二紙化硅对人風肺泡巨味细胞和肺成纤 维细胞tge-pi表达的影响j 工业卫生与职业病，2007,33 (4)：214-2!6.7 李庆李廷，祁新兰.煤工尘肺您者血清tnf-axsll-2rjl-6和il- 8检测的意义j 中国工业瞑学杂志,2(x)6,9(1):11-12.8 邢耳才，范连生，冯国贤，等.早期煤工尘肺支代代肺泡淞洗役中 sp-a及tnf-a含就的变