PBS缓冲液的配制方法(共9页)

1、精选优质文档-倾情为你奉上PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。pH A液 （ml） B液（ml） 5.60 9.50 0.255.91 9.00 1.006.24 8.00 2.0

2、06.47 7.00 3.006.64 6.00 4.006.81 5.00 5.006.98 4.00 6.007.17 3.00 7.007.38 2.00 8.007.73 1.00 9.008.04 0.50 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO412H2O（磷酸氢二钠） NaH2PO42H2O（磷酸二氢钠）Nacl 用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液 称取NaCl 8g

3、，KCl 0.2g，Na2HPO412H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结： 母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7

4、.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB （PH=

5、7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCL 的话，加入 NaCL 至0.9%（g/100ml）即可。 另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：pH      &#

6、160;0.2M NaH2PO4（ml）   0.2M Na2HPO4（ml）5.7             93.5                         &

7、#160;6.55.8             92                             8     

8、0;      5.9             90                             106.0

9、             87.7                          12.36.1         &

10、#160;   85                             156.2             81.5  &#

11、160;                       18.56.3             77.5           

12、60;              22.56.4             73.5                    

13、0;     26.56.5             68.5                          31.56.6  

14、0;          62.5                          37.56.7            

15、; 56.5                          43.56.8             51       

16、0;                    496.9              45              

17、60;            557.0              38                      &#

18、160;    627.1              33                           677.2  &#

19、160;          28                            727.3          &

20、#160;   23                           777.4              19ml   &#

21、160;                     81ml7.5              16             

22、;              847.6              13                    

23、0;      877.7             10.5                          0.57.8  &

24、#160;           8.5                          91.57.9          

25、60;  7                              938.0             5.3   

26、                        94.7 磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB），磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）试剂： NaH2PO4·2H2O     Na2HPO4·12H2O配制方法：配制时，常先配制0.2mol

27、/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：

28、取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.47.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.78.0）pH   0.2mol/L NaH2PO4(ml)   0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.7           93.5                

29、;       6.55.8           92.0                       8.05.9           90.0                     10.06.0        

30、  87.7                     12.36.1           85.0                     15.06.2           81.5              

31、60;     18.56.3           77.5                     22.56.4           73.5                     26.56.5           68.

32、5                     31.56.6           62.5                     37.56.7           56.5                  

33、   43.56.8           51.0                     49.06.9           45.0                     55.07.0           39.0   &

34、#160;                 61.07.1           33.0                     67.07.2           28.0                     72

35、.07.3           23.0                     67.07.4           19.0                     81.07.5           16.0     

36、0;               84.07.6           13.0                     87.07.7           10.5                     89.57.8 

37、;           8.5                     91.57.9            7.0                     93.08.0            5.3               &#